本文關(guān)鍵詞： Itk 甲型流感病毒 T細胞 BALB/c小鼠　出處：《福建農(nóng)林大學(xué)》2012年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：甲型流感病毒能夠引起人和動物的急性呼吸道感染，每年造成大量的人口死亡和經(jīng)濟損失，給全世界的公共健康帶來了巨大的威脅。因此，，為了能夠更好的了解宿主的抗病毒免疫機制，人們已經(jīng)做出了大量的研究工作,并已揭示除了體液免疫以外，天然免疫和獲得性免疫中多種類型的細胞和細胞因子都參與了宿主的抗病毒免疫反應(yīng)。然而，盡管對于宿主防御和抗病毒免疫反應(yīng)機制的了解取得了一定的進展，但是對于引起人和動物嚴(yán)重疾病的流感病毒和宿主免疫系統(tǒng)之間的直接相互作用卻知之甚少。而且，對于流感病毒是否對宿主免疫系統(tǒng)的淋巴細胞具有易感性以及流感病毒與淋巴細胞之間的相互作用是否依賴于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路（如T細胞受體信號）介導(dǎo)的細胞活化也不清楚。 為此，本研究中我們利用甲型流感病毒A/WSN/33(H1N1)感染BALB/c小鼠和原代T細胞為模型來檢測甲型流感病毒是否對淋巴器官中的T細胞具有易感性。我們發(fā)現(xiàn)在病毒感染小鼠的脾臟和胸腺中有一定比例的CD4+T細胞和CD8+T細胞表達流感病毒蛋白。同時，我們發(fā)現(xiàn)有相當(dāng)數(shù)量的小鼠原代T細胞表達流感病毒α-2,6唾液酸受體并且這些細胞能直接被甲型流感病毒感染。這些實驗揭示了小鼠體內(nèi)存在一定比例的T細胞對甲型流感病毒具有易感性。而且我們還利用人T細胞白血病細胞系Jurkat來研究流感病毒與Jurkat T細胞的相互作用，尤其關(guān)注調(diào)控T細胞活化的Tec家族酪氨酸激酶Itk是否參與了甲型流感病毒對T細胞的感染過程。研究結(jié)果表明甲型流感病毒A/WSN/33(H1N1)能直接感染Jurkat T細胞，更為有趣的是研究結(jié)果表明流感病毒感染導(dǎo)致被感染細胞Itk表達量的增加和Itk向細胞膜募集，并且細胞內(nèi)PLC-γ1磷酸化的磷酸化水平也有所增加，說明流感病毒感染激活了Itk/PLC-γ1信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。我們還證實Itk的缺失會抑制甲型流感病毒的復(fù)制過程，而Itk的過表達則會促進流感病毒復(fù)制。這些結(jié)果顯示Itk是流感病毒在被感染T細胞中的高效復(fù)制所必需的。 總之，我們的研究結(jié)果表明甲型流感病毒在BALB/c小鼠體內(nèi)可以直接感染特定的一群T細胞。進一步實驗證實甲型流感病毒A/WSN/33(H1N1)能直接感染Jurkat T細胞，并且Itk信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對甲型流感病毒在Jurkat T細胞中的復(fù)制有重要影響。
[Abstract]:Acute respiratory tract influenza A virus can cause human and animal infections, causing deaths and a large economic losses each year, has brought great threat to the world of public health. Therefore, in order to understand better the mechanism of antiviral immunity of the host, people have made a lot of research work, and has revealed the humoral immunity in addition to outside and, natural immune cells and cytokines in various types of immunity are involved in host antiviral immune response. However, although the mechanism of host defense and antiviral immune response solution has made some progress, but the direct interaction between human and animal diseases of influenza virus and the host immune system little is known about. Moreover, with susceptibility and influenza virus and influenza virus for Neisseria whether the host immune system cells Whether the interaction between the Ba cells depends on the signal transduction pathway, such as the T cell receptor signal, is not clear.
Therefore, in this study we use the influenza virus A/WSN/33 (H1N1) as a model to detect influenza virus with susceptibility to T cells in lymphoid organs of mice infected with BALB/c and primary T cells. We found that the virus infected mice spleen and thymus in a certain ratio of CD4+T cells and CD8+T cells with the expression of influenza virus protein. At the same time, we found that there are a considerable number of influenza virus expression in mouse primary T cells -2,6 sialic acid receptors and these cells can directly be influenza A virus infection. These experiments revealed the presence of a certain proportion of mice with T cells with susceptibility to influenza A virus interaction. And we also use human T cell leukemia Jurkat of influenza virus and Jurkat T cells, with particular attention to whether the regulation of T cell activation of Tec family tyrosine kinase Itk in influenza The sense of process of virus infection on T cells. The results show that influenza virus A/WSN/33 (H1N1) Jurkat can infect T cells, more interesting is the results of the study show that influenza virus infected cells leads to increased expression of Itk and recruitment of Itk to the cell membrane, and intracellular PLC- gamma 1 phosphorylation of phosphate the level also increased, indicating influenza virus infection activates Itk/PLC- gamma 1 signaling pathways. We also confirmed the absence of Itk could inhibit the replication of influenza A virus, and the overexpression of Itk may promote the replication of influenza virus. These results show that Itk is required for influenza virus in the infected efficient replication in T cells.
In conclusion, our results suggest that influenza A virus infection in BALB/c mice can direct specific group of T cells. Further experiments confirmed influenza virus A/WSN/33 (H1N1) can infect Jurkat T cells and Itk signal transduction pathway has an important effect on the replication of influenza A virus in Jurkat T cells.

【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R363

【參考文獻】

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本文編號：1454515