抑制Runx2的表達增強BMP2誘導的干細胞成軟骨分化
本文關鍵詞:抑制Runx2的表達增強BMP2誘導的干細胞成軟骨分化 出處:《中國生物工程雜志》2016年04期 論文類型:期刊論文
更多相關文章: Runx 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 CHT/細胞 成軟骨分化
【摘要】:目的:利用腺病毒介導RNA干擾抑制成骨分化關鍵轉錄調控因子Runx2(Runt-related transcription factor 2)的表達,研究其對骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)誘導間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成軟骨分化的影響,并初步探討相關機制。方法:利用腺病毒Ad-GFP、Ad-BMP2、Ad-SiRunx2感染C3H10T1/2細胞;共分4組:GFP組、BMP2組、BMP2+SiRunx2組和SiRunx2組。Alcian blue染色檢測各組軟骨細胞基質糖胺聚糖分泌;RTPCR檢測Runx2、早期成軟骨標志物(Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)及晚期成軟骨標志物(Col10a1)mRNA表達水平;Western blot檢測目的蛋白BMP2、Ⅱ型膠原(Col2a1)及X型膠原(Col10a1)的蛋白表達。結果:在BMP2誘導C3H10T1/2細胞成軟骨分化過程中,下調Runx2的表達可以增強Col2a1、Aggrecan及軟骨細胞外基質糖胺聚糖的合成,抑制Col10a1的合成。結論:下調Runx2表達可以增強BMP2誘導間充質干細胞成軟骨分化能力,并抑制軟骨細胞的成熟和肥大。
[Abstract]:Objective: to inhibit the osteogenic differentiation by adenovirus-mediated RNA interference, a key transcriptional regulator Runx2 (. Runt-related transcription factor 2. To study its effect on bone morphogenetic protein 2bone morphogenetic protein 2. BMP2) induced mesenchymal stem cells differentiation. Methods: Ad-BMP2Ad-SiRunx2 was used to infect C3H10T1 / 2 cells. The matrix glycosaminoglycan secretion of chondrocytes was detected by blue staining in 4 groups: BMP2 SiRunx2 and SiRunx2. Alcian blue staining. RTPCR was used to detect Runx2 and early cartilage marker Col2a1). The mRNA expression level of Aggrecan) and the late chondrogenic marker, Col10a1a; The target protein BMP2 was detected by Western blot. Results: BMP2 induced chondrogenic differentiation of C3H10T1 / 2 cells. Down-regulating the expression of Runx2 could enhance the synthesis of Col2a1Ag-grecan and the extracellular matrix glycosaminoglycan in chondrocytes. Conclusion: down-regulation of Runx2 expression can enhance the chondrogenic differentiation of mesenchymal stem cells induced by BMP2 and inhibit the maturation and hypertrophy of chondrocytes.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院;
【基金】:國家自然科學基金面上項目(81371972)資助項目
【分類號】:Q78;R329.2
【正文快照】: 過度運動容易引起關節(jié)軟骨損害[1],關節(jié)軟骨修復能力很弱,且自體和異體軟骨細胞移植雖然近期效果較好,但遠期由于纖維軟骨的形成,臨床治療效果一般不理想[2-3]。因此利用干細胞培養(yǎng)出正常的透明軟骨進行軟骨移植具有重要的臨床意義。 間充質干細胞( mesenchymal stem cells,M
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,本文編號:1432860
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