本文關(guān)鍵詞：丙型肝炎病毒感染與白細胞介素27的相關(guān)性研究　出處：《武漢大學》2011年博士論文　論文類型：學位論文

  更多相關(guān)文章： 丙型肝炎病毒 白細胞介素27 復制 信號傳導

【摘要】：人類丙型肝炎的病原體是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)。世界上1.8億人感染HCV,感染率約為3%,但50%～80%的病人會變成慢性感染者,其中部分慢性感染者可發(fā)展為肝纖維化、肝硬化,或者肝細胞癌。已有的研究表明,白細胞介素在HCV感染過程中起到重要作用。白細胞介素27(interleukin27, IL-27)是IL-6/IL-12家族的新成員,是一個異源二聚體,由EBI3和P28兩個亞基組成,其中EBI3與IL-12的p40亞基同源,p28與IL-12的p35亞基同源。近年來有研究發(fā)現(xiàn)IL-27能夠抑制HIV在PBMC細胞,CD4+T細胞,巨噬細胞中的復制。2009年有報道IL-27融合蛋白對肝細胞和肝癌細胞有類似IFN-γ的作用,認為IL-27很可能具有在肝細胞和肝癌細胞中抗病毒活性,并發(fā)現(xiàn)IL-27可以抑制禽流感病毒和人流感病毒在HepG2細胞中的復制。因此,IL-27在宿主抗病毒感染過程中可能有重要作用。但到目前為止,關(guān)于HCV感染與IL-27的關(guān)系尚不明確。 為了探討HCV感染與IL-27的關(guān)系,我們檢測了慢性丙肝患者和健康對照者血清中IL-27的蛋白水平。臨床數(shù)據(jù)表明,慢性丙肝患者血清中IL-27的蛋白水平顯著升高。此后,我們在體外細胞試驗中同樣證明了HCV的感染可以增強IL-27的表達水平,并初步探討了HCV上調(diào)IL-27表達水平的分子機制。在IL-27p28亞基和EBI3亞基的啟動子水平,我們通過報告基因檢測系統(tǒng),發(fā)現(xiàn)HCV能分別上調(diào)p28亞基和EBI3亞基啟動子的活性。我們用RT-PCR和ELISA檢測了HCV感染對IL-27的轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達水平的影響,發(fā)現(xiàn)HCV感染顯著上調(diào)了IL-27p28亞基和EBI3亞基的mRNA和蛋白表達量。通過對信號通路的研究,我們進一步發(fā)現(xiàn)HCV株JFH-1可以通過NF-κB通路激活IL-27亞基EBI3啟動子,而HCV NS3蛋白通過激活NF-κB通路上調(diào)IL-27EBI3亞基啟動子活性。 最后,我們還探討IL-27對于HCV復制的影響。我們采用HCV病毒株JFH-1感染Huh7.5.1細胞以產(chǎn)生HCV顆粒,用IL-27融合蛋白刺激感染后細胞,并用熒光定量PCR法檢測感染細胞培養(yǎng)基中HCV拷貝數(shù),結(jié)果發(fā)現(xiàn)IL-27融合蛋白在細胞水平能夠抑制HCV的復制。 該實驗結(jié)果表明在HCV感染會導致IL-27的表達水平明顯提高,而且進一步研究初步揭示了HCV調(diào)節(jié)IL-27表達的分子機制,最后還提示IL-27可能抑制HCV的復制。為更好地了解HCV病人機體的自然保護機制和研發(fā)抗HCV治療方案提出了新思路。
[Abstract]:Hepatitis C virus is the pathogen of human hepatitis C. 180 million people in the world are infected with hepatitis C virus, and the infection rate is about 3%. But 50 percent of patients become chronically infected, some of whom can develop liver fibrosis, cirrhosis, or hepatocellular carcinoma. Interleukin 27 (IL 27) is a new member of IL-6/IL-12 family. It is a heterodimer composed of two subunits, EBI3 and P28, in which EBI3 is homologous to the p40 subunit of IL-12. P28 is homologous to the p35 subunit of IL-12. In recent years, it has been found that IL-27 can inhibit HIV in PBMC cells. Replication in macrophages. In 2009, it was reported that IL-27 fusion protein had IFN- 緯 similar effects on hepatocytes and hepatoma cells. It is suggested that IL-27 may have antiviral activity in hepatocytes and hepatoma cells, and that IL-27 can inhibit the replication of avian influenza virus and human influenza virus in HepG2 cells. IL-27 may play an important role in the process of host anti-virus infection, but the relationship between HCV infection and IL-27 is unclear. In order to investigate the relationship between HCV infection and IL-27, we measured the serum IL-27 protein levels in chronic hepatitis C patients and healthy controls. The level of IL-27 protein in serum of patients with chronic hepatitis C was significantly increased. Since then, we have also demonstrated in vitro cell tests that HCV infection can enhance the expression of IL-27. At the promoter level of IL-27p28 subunit and EBI3 subunit, we used the reporter gene detection system to study the molecular mechanism of up-regulation of IL-27 expression by HCV. It was found that HCV could up-regulate the promoter activity of p28 subunit and EBI3 subunit, respectively. RT-PCR and ELISA were used to detect the transcriptional level and protein expression level of HCV infection on IL-27. The impact. It was found that HCV infection upregulated the expression of mRNA and protein of IL-27p28 subunit and EBI3 subunit. We further found that HCV JFH-1 can activate EBI3 promoter of IL-27 subunit through NF- 魏 B pathway. HCV NS3 protein upregulated the promoter activity of IL-27EBI3 subunit by activating NF- 魏 B pathway. Finally, we also investigated the effect of IL-27 on HCV replication. We used HCV virus strain JFH-1 to infect Huh7.5.1 cells to produce HCV particles. IL-27 fusion protein was used to stimulate the infected cells and the HCV copy number in the culture medium of infected cells was detected by fluorescence quantitative PCR. The results showed that IL-27 fusion protein could inhibit the replication of HCV at cell level. The results showed that the level of IL-27 expression was significantly increased after HCV infection, and further studies revealed the molecular mechanism of HCV regulating the expression of IL-27. Finally, it is suggested that IL-27 may inhibit the replication of HCV, which provides a new idea for better understanding of the nature protection mechanism of HCV patients and for the development of anti-#en3# therapy.
【學位授予單位】：武漢大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R373.21

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊小翠,王永堂,劉玉泉;白細胞介素-8的臨床意義[J];標記免疫分析與臨床;2002年04期

2 商素潔;閆曉娟;龐義存;;瘦素對子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞分泌白細胞介素的影響[J];中國計劃生育學雜志;2006年09期

3 貢堅;045何謂白細胞介素-2?其作用與臨床意義為何?[J];新藥與臨床;1987年06期

4 勞紅;劉國良;;白細胞介素的檢測[J];細胞生物學雜志;1988年02期

5 朱迅;;新型白細胞介素[J];生命的化學(中國生物化學會通訊);1988年05期

6 李電東,蔡年生;白細胞介素類的檢測方法及評價[J];中國抗生素雜志;1989年04期

7 吳南君;;新的白細胞介素測定系統(tǒng)[J];生物技術(shù)通報;1989年02期

8 向建之;;白細胞介素的研究開發(fā)現(xiàn)狀[J];生物制品學雜志;1990年02期

9 虞冠華;施鳳霞;朱有華;許祥裕;丁樹標;;產(chǎn)生白細胞介素-2最佳條件的研究[J];南京大學學報(自然科學版);1990年03期

10 馬大龍;;白細胞介素[J];自然雜志;1993年Z1期

相關(guān)會議論文 前10條

1 姜曉君;魏海明;孫lm;田志剛;;白細胞介素2保護刀豆蛋白A誘導的肝損傷[A];第六屆全國免疫學學術(shù)大會論文集[C];2008年

2 劉玉春;林士軍;葉建華;劉美描;陳雄;張靜;;白細胞介素2、可溶性白細胞介素2受體在慢性阻塞性肺疾病表達的研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術(shù)會議論文匯編[C];2013年

3 曹艷華;張蕊;余奕;張威;祝成亮;王青;宋煜;白蘭;劉映樂;鄔開朗;吳建國;;由白細胞介素-29介導的白細胞介素-27抑制乙型肝炎病毒復制機制的研究[A];2013年湖北省暨武漢微生物學會會員代表大會暨學術(shù)年會論文摘要集[C];2013年

4 張曉光;惠延年;韓泉洪;馬吉獻;;培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細胞受附加磁場作用后單核細胞趨化蛋白-1和白細胞介素-8的表達[A];中國眼底病論壇·全國眼底病專題學術(shù)研討會論文匯編[C];2008年

5 曹艷華;吳建國;;由白細胞介素-29介導的白細胞介素-27抑制乙型肝炎病毒復制機制的研究[A];2012年鄂粵微生物學學術(shù)年會——湖北省暨武漢微生物學會成立六十年慶祝大會論文集[C];2012年

6 鄭夢凝;張湘燕;葉賢偉;余紅;李翠;;四種白細胞介素與阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2013第十四次全國呼吸病學學術(shù)會議論文匯編[C];2013年

7 李素，

本文編號：1418729