本文關(guān)鍵詞：可溶性Tim-3體外增強免疫應(yīng)答的作用及機制研究　出處：《軍事醫(yī)學(xué)》2017年01期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的評價重組人(hTim-3)-Fc融合蛋白在調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答中的作用及其機制研究。方法分別將重組hTim-3-Fc融合蛋白與人巨噬細(xì)胞系U937細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞系Jurkat細(xì)胞及正常人外周血細(xì)胞共培養(yǎng),采用ELISA、實時熒光定量PCR(RT-PCR)和蛋白質(zhì)免疫印跡(Western印跡)方法檢測免疫相關(guān)細(xì)胞因子水平的變化,探討重組hTim-3-Fc融合蛋白對免疫細(xì)胞活性的影響并闡明機制。結(jié)果重組hTim-3-Fc融合蛋白可顯著提高免疫細(xì)胞活性,表現(xiàn)為U937中IL-8分泌水平,Jurkat細(xì)胞IL-2分泌水平,以及人外周血中IL-2和IFN-γ分泌水平顯著升高;在mRNA水平,發(fā)現(xiàn)重組hTim-3-Fc融合蛋白能顯著提高上述細(xì)胞中Ⅰ型干擾素(包括IFN-α2、IFN-β1)的表達(dá)。在分子機制方面,重組hTim-3-Fc融合蛋白可增強T細(xì)胞(Jurkat)及巨噬細(xì)胞(U937)中stat-1的磷酸化水平。結(jié)論制備的重組人Tim-3-Fc融合蛋白在體外能顯著增強免疫細(xì)胞活性,有望成為免疫抑制性疾病新的免疫干預(yù)藥物。
[Abstract]:Objective to evaluate the recombinant human hTim-3). The role and mechanism of -FC fusion protein in regulating immune response. Methods Recombinant hTim-3-Fc fusion protein was transfected into human macrophage cell line U937. T-lymphocytes were co-cultured with Jurkat cells and normal peripheral blood cells, and ELISA was used. The changes of immune-associated cytokines were detected by real-time fluorescence quantitative PCR- RT-PCR and Western blot. To explore the effect of recombinant hTim-3-Fc fusion protein on immune cell activity and elucidate the mechanism. Results the recombinant hTim-3-Fc fusion protein could significantly improve the immune cell activity. The level of IL-8 secretion in U937 and the levels of IL-2 and IFN- 緯 in human peripheral blood were significantly increased. At the mRNA level, it was found that the recombinant hTim-3-Fc fusion protein could significantly increase the expression of interferon type I (including IFN- 偽 2, IFN- 尾 1) in these cells. Recombinant hTim-3-Fc fusion protein enhanced T cell Jurkat and macrophage U937). Conclusion the recombinant human Tim-3-Fc fusion protein can significantly enhance the activity of immune cells in vitro. It is expected to be a new immune intervention drug for immunosuppressive diseases.
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所免疫學(xué)研究室;安徽醫(yī)科大學(xué);
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上資助項目(81471540) 北京市自然科學(xué)基金重點資助項目(7141007)
【分類號】：R392
【正文快照】： T細(xì)胞免疫球蛋白及黏蛋白3(T cell immuno-globulin and mucin-domain containing-3,Tim-3)是表達(dá)于活化的Th1、Th17、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等表面的免疫調(diào)控分子,隸屬于Tim家族成員,通過與其配體半乳凝素9(galectin-9,Gal-9)結(jié)合誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,或通過其他機制抑制T效應(yīng)細(xì)胞的

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