本文關鍵詞：應用慢病毒載體攜帶HBV基因組DNA制備乙型肝炎病毒感染小鼠模型的影響因素分析　出處：《病毒學報》2017年05期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：應用慢病毒載體構建不同HBV轉導質粒,通過高壓水動力法尾靜脈注射小鼠,比較不同HBV轉導質粒、劑量(5μg和10μg)、小鼠品系(Balb/c和C57BL/6)及鼠齡(6周齡和18周齡)對建立HBV感染模型的影響。不同的時間點尾靜脈采血,ELISA檢測血清HBsAg、HBeAg的表達水平及動力變化,Real-time PCR檢測血清及肝組織病毒載量;免疫組織化學法檢測肝組織HBcAg的定位與表達。1.3倍HBV基因組慢病毒載體轉導質粒(pCSHBV1.3)優(yōu)于1.1倍與1.2倍HBV基因組轉導質粒(pCS-HBV1.1or pCS-HBV1.2);pCS-HBV1.3注射Balb/c小鼠后抗原表達維持時間短,抗體出現早;pCS-HBV1.3注射C57BL/6小鼠后,HBsAg、HBeAg抗原表達及血清HBV DNA水平維持時間長;且注射5μg質粒相對于10μg質粒注射小鼠后抗原表達維持時間更長;而6周齡和18周齡小鼠血清均可在較長時間內檢測到HBsAg、HBeAg及HBV DNA的表達,但在注射后35周內,前者的表達量均高于后者;所有注射質粒的小鼠肝組織中均可檢測到HBcAg的表達,且在血清HBV感染標志轉陰時均可檢測到肝內HBV DNA的存在。注射質粒的HBV基因組長度、劑量以及宿主的遺傳背景均對建立乙肝成體轉基因小鼠模型有影響,且發(fā)現以5μg含1.3倍HBV基因組的轉導質粒pCS-HBV1.3注射6周齡C57BL/6小鼠,HBV抗原表達和HBV DNA水平維持時間長,更適合建立HBV持續(xù)感染模型。
[Abstract]:The expression of HBsAg , HBeAg and HBV DNA was detected by ELISA . The expression of HBsAg , HBeAg and HBV DNA was detected by ELISA . The expression of HBsAg , HBeAg and HBV DNA was detected by ELISA .

【作者單位】： 中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所衛(wèi)生部醫(yī)學病毒學重點實驗室;河北醫(yī)科大學病原生物學教研室;北京大學醫(yī)學部基礎醫(yī)學院;
【基金】：重大新藥創(chuàng)制科技重大專項(項目號:2009ZX09102-237),題目:新型乙型肝炎疫苗的臨床前研究~~
【分類號】：R-332;R512.62
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是部分雙鏈DNA病毒,盡管HBV疫苗推廣應用顯著降低了HBV感染流行,但全世界約有20億人感染了HBV,超過3.5億人為持續(xù)感染者[1]。慢性乙型肝炎(CHB)感染易導致嚴重肝臟疾病,包括肝硬化、肝細胞癌。目前HBV的臨床治療效果并不理想,因而預防控制，

本文編號：1394048