本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用慢病毒載體攜帶HBV基因組DNA制備乙型肝炎病毒感染小鼠模型的影響因素分析　出處：《病毒學(xué)報(bào)》2017年05期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：應(yīng)用慢病毒載體構(gòu)建不同HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)質(zhì)粒,通過高壓水動(dòng)力法尾靜脈注射小鼠,比較不同HBV轉(zhuǎn)導(dǎo)質(zhì)粒、劑量(5μg和10μg)、小鼠品系(Balb/c和C57BL/6)及鼠齡(6周齡和18周齡)對(duì)建立HBV感染模型的影響。不同的時(shí)間點(diǎn)尾靜脈采血,ELISA檢測(cè)血清HBsAg、HBeAg的表達(dá)水平及動(dòng)力變化,Real-time PCR檢測(cè)血清及肝組織病毒載量;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)肝組織HBcAg的定位與表達(dá)。1.3倍HBV基因組慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)質(zhì)粒(pCSHBV1.3)優(yōu)于1.1倍與1.2倍HBV基因組轉(zhuǎn)導(dǎo)質(zhì)粒(pCS-HBV1.1or pCS-HBV1.2);pCS-HBV1.3注射Balb/c小鼠后抗原表達(dá)維持時(shí)間短,抗體出現(xiàn)早;pCS-HBV1.3注射C57BL/6小鼠后,HBsAg、HBeAg抗原表達(dá)及血清HBV DNA水平維持時(shí)間長;且注射5μg質(zhì)粒相對(duì)于10μg質(zhì)粒注射小鼠后抗原表達(dá)維持時(shí)間更長;而6周齡和18周齡小鼠血清均可在較長時(shí)間內(nèi)檢測(cè)到HBsAg、HBeAg及HBV DNA的表達(dá),但在注射后35周內(nèi),前者的表達(dá)量均高于后者;所有注射質(zhì)粒的小鼠肝組織中均可檢測(cè)到HBcAg的表達(dá),且在血清HBV感染標(biāo)志轉(zhuǎn)陰時(shí)均可檢測(cè)到肝內(nèi)HBV DNA的存在。注射質(zhì)粒的HBV基因組長度、劑量以及宿主的遺傳背景均對(duì)建立乙肝成體轉(zhuǎn)基因小鼠模型有影響,且發(fā)現(xiàn)以5μg含1.3倍HBV基因組的轉(zhuǎn)導(dǎo)質(zhì)粒pCS-HBV1.3注射6周齡C57BL/6小鼠,HBV抗原表達(dá)和HBV DNA水平維持時(shí)間長,更適合建立HBV持續(xù)感染模型。
[Abstract]:The expression of HBsAg , HBeAg and HBV DNA was detected by ELISA . The expression of HBsAg , HBeAg and HBV DNA was detected by ELISA . The expression of HBsAg , HBeAg and HBV DNA was detected by ELISA .

【作者單位】： 中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;河北醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)教研室;北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：重大新藥創(chuàng)制科技重大專項(xiàng)(項(xiàng)目號(hào):2009ZX09102-237),題目:新型乙型肝炎疫苗的臨床前研究~~
【分類號(hào)】：R-332;R512.62
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是部分雙鏈DNA病毒,盡管HBV疫苗推廣應(yīng)用顯著降低了HBV感染流行,但全世界約有20億人感染了HBV,超過3.5億人為持續(xù)感染者[1]。慢性乙型肝炎(CHB)感染易導(dǎo)致嚴(yán)重肝臟疾病,包括肝硬化、肝細(xì)胞癌。目前HBV的臨床治療效果并不理想,因而預(yù)防控制，

本文編號(hào)：1394048