本文關(guān)鍵詞：A組人輪狀病毒VP3基因克隆及重組表達(dá)　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：輪狀病毒(rotavirus,RV)屬于呼腸病毒科(Reoviridae)輪狀病毒屬(Rotavirus),是引起嬰幼兒嚴(yán)重胃腸炎的主要病原體,每年全球因RV感染所導(dǎo)致的重癥腹瀉而死亡的兒童約600000。RV是直徑約為70nm,無(wú)包膜,由3層衣殼蛋白組成的正二十面體雙鏈RNA病毒。RV基因組包含11個(gè)分節(jié)段的雙鏈RNA,編碼6個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白(VP1-VP4, VP6, VP7)和6個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白(NSP1-NSP6)。根據(jù)結(jié)構(gòu)蛋白VP6的抗原性差異,可將已發(fā)現(xiàn)的RV分為A-G7個(gè)組,其中,A組為引起嬰幼兒腹瀉的主要病原。 RV結(jié)構(gòu)蛋白VP3在病毒基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程中發(fā)揮著重要的功能。本研究運(yùn)用基因克隆和重組表達(dá)技術(shù),構(gòu)建了攜帶A組人RV TB-Chen株VP3蛋白完整編碼基因的重組表達(dá)質(zhì)粒,在大腸桿菌中表達(dá)重組VP3蛋白(rVP3),對(duì)A組RV VP3進(jìn)行了系統(tǒng)進(jìn)化和基因分型研究。結(jié)果表明,rVP3可在大腸桿菌BL21(DE3)細(xì)胞中表達(dá)；表達(dá)的完整rVP3在菌體中以包涵體形式存在；rVP3可以被抗SA1l株RV全病毒蛋白的豚鼠血清抗體識(shí)別；至今發(fā)現(xiàn)的A組RVVP3至少可以分為7個(gè)不同的基因型(M1-M7),其中人類(lèi)中有3個(gè)型(M1-M3),M4和M7型僅在鳥(niǎo)類(lèi)中發(fā)現(xiàn),TB-Chen株的VP3基因?qū)儆贛2型；不同VP3基因型有獨(dú)特的敏感宿主范圍,同一基因型可能感染不同種動(dòng)物,同一種動(dòng)物也可能感染不同基因型。研究結(jié)果為大量制備RV VP3蛋白及進(jìn)一步研究其結(jié)構(gòu)功能提供了重要基礎(chǔ)。
[Abstract]:Rotavirus (rotavirus, RV) belonging to the Reoviridae (Reoviridae) rotavirus (Rotavirus), is the major pathogen causing severe gastroenteritis in infants, every year around the world because of the death of RV infection caused by severe diarrhea of children about 600000.RV is about 70nm in diameter, without capsule, twenty sided double chain RNA virus.RV genome consists of 3 layers of double stranded RNA capsid protein contains 11 segments, 6 structural proteins (VP1-VP4, VP6, VP7 encoding) and 6 non structural protein (NSP1-NSP6). According to the antigenic difference of structural protein VP6 of RV has been found, can be divided into A-G7 groups, including, group A was mainly caused by the pathogen of infantile diarrhea.
RV VP3 protein played an important role in viral gene transcription. In this study the use of gene cloning and recombinant expression technology, construct the intact VP3 protein encoding gene of human group A RV TB-Chen strain of recombinant expression plasmid, recombinant VP3 protein expressed in Escherichia coli (rVP3), the A group VP3 was RV study on system evolution and gene. The results showed that rVP3 in Escherichia coli BL21 (DE3) cells; complete expression of rVP3 in bacteria in the form of inclusion body; guinea pig serum rVP3 antibody recognition can be anti SA1l strains of RV virus protein; A RVVP3 has found the group can be divided into at least 7 different genotypes (M1-M7), in which humans have 3 type (M1-M3), M4 and M7 found only in birds, VP3 genes of TB-Chen strains belong to type M2; different VP3 genotypes have unique sensitive host range, the same genotype infection may not Different genotypes can also be infected in the same animal and the same animal. The results provide an important basis for the preparation of RV VP3 protein and further study of its structure and function.

【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R373

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 文喻玲;李傳印;范耀春;張艷;魏海濤;陳元鼎;;TB-Chen株輪狀病毒NSP5/NSP6及基因型的初步研究[J];病毒學(xué)報(bào);2009年05期

2 曹志亮;文喻呤;陳元鼎;;A組人輪狀病毒VP6基因克隆及在大腸桿菌中的高效表達(dá)[J];中國(guó)生物工程雜志;2006年03期

3 陳元鼎;劉曉;熊新宇;曹志亮;文喻玲;趙慶歡;余洋;尹興曉;李傳印;范耀春;;A組人輪狀病毒全基因組克隆和基因型分析[J];中國(guó)生物工程雜志;2008年02期

4 李傳印;范耀春;文喻玲;張艷;魏海濤;陳元鼎;;A組輪狀病毒NSP6蛋白表達(dá)及免疫學(xué)性質(zhì)研究(英文)[J];中國(guó)生物工程雜志;2009年09期

5 魏海濤;張艷;范耀春;李傳印;文喻玲;陳元鼎;;A組輪狀病毒NSP1基因克隆表達(dá)及免疫學(xué)性質(zhì)研究[J];中國(guó)生物工程雜志;2010年03期

6 于洋;文喻玲;趙慶歡;曹志亮;陳元鼎;;A組人輪狀病毒NSP3基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)[J];生物技術(shù)通訊;2007年03期

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本文編號(hào)：1393660