目的:創(chuàng)傷后機(jī)體失控性炎癥反應(yīng)綜合癥已成為全球青壯年的首要死亡原因，細(xì)菌未甲基化CPG-DNA結(jié)構(gòu)是啟動(dòng)機(jī)體固有免疫，導(dǎo)致失控性sirs的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，mtDNA在結(jié)構(gòu)和功能上與細(xì)菌類似，通過TLR-9激活NF-κB通路并產(chǎn)生炎癥因子，本文主要觀察嚴(yán)重創(chuàng)傷大鼠外周血中mtDNA的表達(dá)變化，觀察mtDNA含量與損傷程度的關(guān)系以及應(yīng)用氯喹及PDTC對炎性指標(biāo)和重要器官的影響。 方法:第一部分，嚴(yán)重創(chuàng)傷大鼠模型的制備：1雙股骨干骨折大鼠模型的制備；2.失血性休克模型大鼠模型的制備；3.雙股骨干骨折合并失血性休克模型大鼠模型的制備。第二部分將大鼠分為4組：1.單純雙股骨干骨折組（n=21）2.單純失血性休克組（n=21）3.雙股骨干骨折骨折合并失血性休克組（n=21）4.對照組（n=3）第三部分將大鼠分為4組：1.雙股骨干骨折骨折合并失血性休克+氯喹（10mg/kg）組（n=21）2.雙股骨干骨折骨折合并失血性休克+氯喹（30mg/kg）組（n=21）3.雙股骨干骨折骨折合并失血性休克+PDTC（30mg/kg）組（n=21）4.雙股骨干骨折骨折合并失血性休克+PDTC（120mg/kg）組（n=21）后兩部分分別在2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、16小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)和72小時(shí)，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA）觀測外周血中TNF-α、IL-10、IL-6、的表達(dá)水平；用實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time PCR)檢測肺組織中NF-κB亞單位p65mRNA、I-κBmRNA、TLR9mRNA的表達(dá)；熒光定量PCR檢測外周血中mtDNA的水平；HE染色觀察肝、肺、腎、腸的病理學(xué)變化。實(shí)驗(yàn)資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤(x±s)表示。所有數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件采用單因素方差分析(one way ANoVA)。 結(jié)果: 1.改進(jìn)后的雙股骨干骨折合并失血性休克模型造模成功率高，死亡率低，穩(wěn)定性及可重復(fù)性好，能較好的模擬臨床高能量創(chuàng)傷；2.創(chuàng)傷后的3組大鼠血液中mtDNA的含量，血中IL-6、TNF-a的含量均呈現(xiàn)出高峰并在隨后呈現(xiàn)逐步下降趨勢，IL-10出現(xiàn)逐步下降而后逐漸升高趨勢，但幾種因子濃度升高的幅度在三組動(dòng)物中呈現(xiàn)出明顯的不同，失血性休克+股骨干骨折組升高的幅度明顯大于單純失血性休克組和單純雙股骨干骨折組；3.線粒體DNA與損傷程度關(guān)系：損傷越重，外周血線粒體DNA濃度越高，炎癥因子濃度越高。肺組織損傷積分越高，，可作為損傷程度的預(yù)警指標(biāo)；4.嚴(yán)重創(chuàng)傷大鼠外周血的線粒體DNA濃度與炎性指標(biāo)和肺組織中p65mRNA、TLR-9mRNA呈現(xiàn)正相關(guān)；5.p65mRNA、I-κBmRNA在肺組織中的表達(dá)水平呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)；6.氯喹與PDTC濃度越高，炎癥因子表達(dá)水平越低，肺組織損傷積分越低，器官損害越輕，但是氯喹與PDTC的阻滯效果未見明顯差異。 結(jié)論:線粒體DNA與損傷程度關(guān)系：損傷越重，外周血線粒體DNA濃度越高，炎癥因子濃度越高，肺組織損傷積分越高。氯喹和PDTC均能對嚴(yán)重創(chuàng)傷大鼠起保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R641;R-332