本文關(guān)鍵詞：不同發(fā)育階段大鼠脊髓中Olig1的表達及表達規(guī)律　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： Olig1 脊髓 少突前體細(xì)胞 少突膠質(zhì)細(xì)胞 表達

【摘要】：目的：(1)建立SD大鼠從胚胎到成年不同發(fā)育階段脊髓的組織標(biāo)本庫。 (2)觀察Olig1在SD大鼠不同發(fā)育階段脊髓中的表達及細(xì)胞定位。 (3)探討Olig1在SD大鼠不同發(fā)育階段脊髓中的表達規(guī)律。 方法：建立SD大鼠從胚胎到成年不同發(fā)育階段的脊髓組織標(biāo)本庫,選取E14.5d(胚胎期14.5天),E18.5d(胚胎期18.5天),POd(出生0天),P3d(出生后3天),P7d(出生后7天),P2w(出生后2周),P4w(出生后4周),Adult(成年)幾個不同發(fā)育時期的SD大鼠的脊髓。(1)使用Trizol試劑抽提出RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA檢測Olig1表達情況；(2)使用熒光定量PCR,免疫印跡檢測中樞神經(jīng)系統(tǒng)不同發(fā)育階段Olig1在信使核糖核酸(messenger RNA, mRNA)和蛋白水平的表達變化規(guī)律；(3)使用免疫熒光組織化學(xué)技術(shù),通過Oligl單染檢測出其在大鼠脊髓發(fā)育上述幾個時期的表達情況；同時使用Oligl/O4, Oligl/MBP, Oligl/GFAP, Oligl/β-Tublin雙標(biāo)記染色法檢測大鼠脊髓發(fā)育的P7d(出生后第7天),P2w(出生后2周)時Oligl在不同類型神經(jīng)細(xì)胞上的表達和定位；最后總結(jié)出Oligl在大鼠脊髓發(fā)育過程中的表達規(guī)律。 結(jié)果：(1)RT-PCR,免疫印跡法,免疫熒光組織化學(xué)單染顯示,Oligl在E14.5d,E18.5d, POd, P3d, P7d, P2w, P4w, Adult幾個不同發(fā)育時期的SD大鼠脊髓中均有表達；(2)免疫熒光雙標(biāo)記染色檢測顯示,在P7d和P2w的SD大鼠的脊髓中,Oligl在04陽性細(xì)胞和β-Tublin陽性細(xì)胞中表達,在MBP陽性細(xì)胞和GFAP陽性細(xì)胞中不表達；(3)熒光定量PCR、免疫印跡法檢測進一步顯示,Oligl在大鼠脊髓從E14.5d時期即有表達并且一直持續(xù)到成年,但是其mRNA和蛋白的表達水平在E14.5d, E18.5d, POd, P3d, P7d, P2w, P4w, Adult的8個不同時期不是一直保持在同—水平,也不是隨著發(fā)育逐漸增加或減少,而是在胚胎早期表達水平較高以后逐漸減低,至P7d時低表達,而后又漸增高。 結(jié)論：(1)Olig1在E14.5d到成年不同發(fā)育時期的SD大鼠脊髓中均表達；(2)Oligl在SD大鼠脊髓中的表達水平在胚胎早期較高,以后逐漸減弱,至P7d時呈最低水平,以后又逐漸升高；(3)Olig1主要是在少突膠質(zhì)前體細(xì)胞和神經(jīng)元中表達,在成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞中不表達或表達很低,在星形膠質(zhì)細(xì)胞中也不表達。
[Abstract]:Objective to establish a tissue library of spinal cord of SD rats at different stages of development from embryo to adulthood. (2) to observe the expression and cellular localization of Olig1 in the spinal cord of SD rats at different developmental stages. To investigate the expression of Olig1 in the spinal cord of SD rats at different developmental stages. Methods: the spinal cord tissue library of SD rats from embryonic to adult stages was established. E14.5 days (14.5 days of embryo) and 18.5 days of embryo (18.5 days of embryo) were selected. POD (0 days after birth) P3d (3 days after birth) P7d (7 days after birth) (2 weeks after birth P4w (4 weeks after birth). The spinal cord of several adult SD rats at different developmental stages) Trizol reagent was used to extract RNAs and reverse transcription was used to detect the expression of Olig1 in the spinal cord of SD rats. (2) fluorescent quantitative PCR and Western blot were used to detect Olig1 in messenger RNA messenger RNA at different stages of development of central nervous system (CNS). Expression of mRNAs and proteins; (3) Immunofluorescence histochemical technique was used to detect the expression of Oligl in the above stages of spinal cord development in rats. And use Olig / O _ 4, Olig / MBP, Oligl/GFAP. Oligl- 尾 -Tublin double labeling staining was used to detect P7 days of spinal cord development in rats (7 days after birth). Expression and localization of Oligl in different types of nerve cells at P2w (2 weeks after birth); Finally, the expression of Oligl in the development of rat spinal cord was summarized. Results the expression of Oligl in E14.5dE 18.5d, POD, P3d, P7d was detected by Western blot and Western blotting. P2w, P4wand Adult were all expressed in spinal cord of SD rats at different developmental stages. (2) Immunofluorescence double labeling staining showed that Oligl was expressed in 04 positive cells and 尾 -Tublin positive cells in the spinal cord of P7d and P2w SD rats. It was not expressed in MBP positive cells and GFAP positive cells. Fluorescence quantitative PCR and Western blotting further showed that Oligl was expressed in the spinal cord of rats from E14.5d and lasted until adulthood. But the expression levels of mRNA and protein were at 14.5 days, 18.5 days, POD, P3d, P7d, P2wand P4w. The eight different stages of Adult were not maintained at the same level, nor increased or decreased with the development, but decreased gradually after the early embryonic stage was higher, and the expression was low at P7 days. And then it went up again. Conclusion the expression of Olig1 in the spinal cord of Sprague-Dawley rats from 14. 5 d to 14. 5 d was found in adult SD rats. The expression of Oligl in spinal cord of Sprague-Dawley rats was higher at the early stage of embryo, then gradually decreased, and then decreased to the lowest level at P7 day, and then increased gradually in the Sprague-Dawley rat spinal cord. Olig1 was mainly expressed in oligodendrocytes and neurons, but not in mature oligodendrocytes or astrocytes.
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R329

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本文編號：1379197