鄰苯二甲酸二乙基已酯(DEHP)及代謝產(chǎn)物鄰苯二酸—單-2-乙基已酯(MEHP)對(duì)幼鼠精原細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究
本文關(guān)鍵詞:鄰苯二甲酸二乙基已酯(DEHP)及代謝產(chǎn)物鄰苯二酸—單-2-乙基已酯(MEHP)對(duì)幼鼠精原細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究 出處:《遵義醫(yī)學(xué)院》2011年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:目的:了解環(huán)境內(nèi)分泌干擾因子鄰苯二甲酸二乙基已酯(Ethylhexyl phthalate,DEHP)及代謝產(chǎn)物鄰苯二酸-單-2-乙基己酯(single-ethylhexyl phthalate,MEHP)對(duì)幼鼠精原細(xì)胞有否損害。 方法:生后2周齡的Wistar雄性幼鼠96只,隨機(jī)分8組,每組12只。隨機(jī)選擇1組行生理鹽水(0.9%NS 0.2ml·kg-1·d-1喂養(yǎng)3周)灌胃,作為正常對(duì)照組(NC組);再選1組行環(huán)磷酰胺(CTX 100mg·kg-1·d-1,喂養(yǎng)1周)灌胃,作為陽(yáng)性對(duì)照組(PC組);余各組分別用DEHP、MEHP按低劑量(100mg·kg-1·d-1,喂養(yǎng)3周)、中劑量(200mg·kg-1·d-1,喂養(yǎng)2周)、高劑量(300mg·kg-1·d-1,喂養(yǎng)1周)灌胃制作動(dòng)物模型。觀察不同時(shí)期、不同劑量下睪丸精原細(xì)胞的變化,并應(yīng)用TUNEL法檢查精原細(xì)胞凋亡,免疫組化法檢測(cè)睪丸組織中c-kit、PI3K的表達(dá),放射免疫法檢測(cè)血清性激素(卵泡刺激素FSH、黃體生成素LH以及睪酮T)水平。 結(jié)果:(1)、睪丸精原細(xì)胞的變化:用藥組精原細(xì)胞萎縮、發(fā)育落后,數(shù)量少、線粒體腫脹、空泡化等,但在用藥的高劑量組短時(shí)間內(nèi)損害與低劑量組長(zhǎng)時(shí)間的損害一致; (2)、睪丸組織中精原細(xì)胞凋亡:與NC組比較,用藥組精原細(xì)胞凋亡顯著增多(P0.01),但在高劑量短時(shí)間喂養(yǎng)組與低劑量長(zhǎng)時(shí)間喂養(yǎng)組間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05); (3)、睪丸組織中c-ki、PI3K的表達(dá):與NC組比較,用藥組睪丸組織中c-kit及其下游信號(hào)分子PI3K的表達(dá)顯著減少(P0.01),但高劑量短時(shí)間喂養(yǎng)組與低劑量長(zhǎng)時(shí)間喂養(yǎng)組間比較,差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05); (4)、血清性激素水平:與NC組比較,用藥組FSH、LH水平升高,IT水平下降(P0.05);但用藥的高劑量組與低劑量組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論:DEHP及代謝產(chǎn)物MEHP對(duì)幼鼠精原細(xì)胞有明顯損害,推測(cè)可能對(duì)小兒的生精功能也有損害,小兒應(yīng)避免過(guò)多的接觸DEHP及代謝產(chǎn)物MEHP的物質(zhì)。
[Abstract]:Objective: to understand the environmental endocrine disrupting factor, Ethylhexyl phthalate (DEHP two) and the metabolite of phthalate mono -2- ethylhexyl ester (single-ethylhexyl phthalate, MEHP), which can damage spermatogonia in young rats.
Methods: after 2 week old male Wistar rats 96 rats, were randomly divided into 8 groups, 12 rats in each group. 1 groups were randomly selected for saline (0.9%NS 0.2ml - kg-1 - D-1 for 3 weeks) by gavage, as normal control group (group NC); group CTX (cyclophosphamide 1 choose 100mg kg-1. D-1, for 1 weeks) by gavage, as positive control group (PC group); the other groups were treated with DEHP and MEHP at low dose (100mg - kg-1 - D-1, for 3 weeks), middle dose (200mg - kg-1 - D-1, for 2 weeks), high dose (300mg - kg-1 - D-1, feeding 1 weeks) animal model by gavage. Observation of different period, changes of different doses of spermatogonia, and the application of TUNEL method to examine the apoptosis of spermatogenic cells, c-kit immunohistochemistry was used to detect the expression of PI3K in testicular tissue, serum hormone radioimmunoassay (FSH FSH, LH LH T) and testosterone level.
Results: (1) the changes of testicular spermatogonial cells: the spermatogonial atrophy, the number of development was backward, the number of mitochondria was swollen and vacuolated, but in the high-dose group, the damage was consistent with the long time damage of low dose group.
(2) spermatogonia apoptosis in testicular tissue: compared with group NC, apoptosis in spermatogonia increased significantly (P0.01), but there was no significant difference between high-dose short time feeding group and low dose long time feeding group (P0.05).
(3) the expression of c-ki and PI3K in testicular tissue: compared with NC group, the expression of c-kit and its downstream signal molecules PI3K in the testicular tissue decreased significantly (P0.01), but there was no significant difference between the high-dose short time feeding group and the low dose long time feeding group (P0.05).
(4) serum sex hormone level: compared with group NC, the level of FSH and LH increased and IT level decreased (P0.05), but there was no significant difference between high dose group and low dose group (P0.05).
Conclusion: DEHP and its metabolite MEHP have obvious damage to spermatogonia in young rats. It is presumed that they may also damage the Spermatogenesis Function of children. Children should avoid excessive exposure to DEHP and metabolites MEHP.
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號(hào)】:R329
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