本文關(guān)鍵詞：輪狀病毒感染膽管上皮細(xì)胞對(duì)HMGB1表達(dá)及釋放的影響　出處：《華中科技大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:了解輪狀病毒感染膽管上皮細(xì)胞對(duì)HMGB1 mRNA表達(dá)及蛋白釋放的影響。 方法:1.體外培養(yǎng)小鼠膽管上皮細(xì)胞,設(shè)立對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組接種輪狀病毒,對(duì)照組接種等量病毒培養(yǎng)液,24小時(shí)后免疫組化分析HMGB1表達(dá)。 2.體外培養(yǎng)小鼠膽管上皮細(xì)胞,設(shè)對(duì)照組、病毒組、SiRNA組,分別于12h、24h、36h、48h收集細(xì)胞和培養(yǎng)上清,RT-PCR及ELISA分別檢測(cè)膽管上皮細(xì)胞HMGB1 mRNA表達(dá)及培養(yǎng)上清蛋白表達(dá)。 結(jié)果:1. HMGB1存在于正常膽管上皮細(xì)胞的胞核。 2.病毒感染后胞核HMGB1含量較正常明顯下降。 3. 12h、24h膽管上皮細(xì)胞HMGB1 mRNA表達(dá):病毒組表達(dá)較對(duì)照組升高(P0.01),SiRNA組表達(dá)較病毒組降低(P0.01)。 4. 36h、48h細(xì)胞培養(yǎng)上清HMGB1濃度:病毒組HMGB1蛋白濃度較對(duì)照組顯著升高(P0.01 ),SiRNA組較病毒組顯著降低(P0.01)。 結(jié)論:1.輪狀病毒感染能引起膽管上皮細(xì)胞HMGB1 mRNA表達(dá)上調(diào)及胞外HMGB1蛋白濃度升高。 2. SiRNA干擾能有效抑制病毒感染引起的胞外HMGB1蛋白水平。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of rotavirus infection on HMGB1 mRNA expression and protein release in bile duct epithelial cells. Methods 1. Murine bile duct epithelial cells were cultured in vitro. Control group and experimental group were established. The experimental group was inoculated with rotavirus and the control group was inoculated with the same amount of virus culture medium. The expression of HMGB1 was detected by immunohistochemistry 24 hours later. 2. Murine bile duct epithelial cells were cultured in vitro. The cells were collected and supernatant were collected at 12h / 24h / 36h / 48h, respectively, in control group and virus group (SiRNA group). HMGB1 mRNA expression and culture supernatant protein expression were detected by RT-PCR and ELISA, respectively. Results 1. HMGB1 exists in the nucleus of normal bile duct epithelial cells. 2. Nuclear HMGB1 content decreased significantly after virus infection. 3The expression of HMGB1 mRNA in bile duct epithelial cells at 12 h and 24 h: the expression of HMGB1 mRNA in virus group was higher than that in control group (P 0.01). The expression of P0. 01 in SiRNA group was lower than that in virus group. 436h and 48h culture supernatant HMGB1 concentration: the concentration of HMGB1 protein in virus group was significantly higher than that in control group (P0.01). Compared with virus group, SiRNA group was significantly lower than that of virus group (P 0.01). Conclusion 1. Rotavirus infection can up-regulate the expression of HMGB1 mRNA and increase the concentration of extracellular HMGB1 protein in bile duct epithelial cells. 2. SiRNA interference can effectively inhibit the extracellular HMGB1 protein level induced by virus infection.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R373

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1365810