本文關(guān)鍵詞：人巨細(xì)胞病毒Han株US12基因缺失株的構(gòu)建及其在人胚肺成纖維細(xì)胞中的復(fù)制　出處：《中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報》2017年06期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 巨細(xì)胞病毒 US 細(xì)菌人工染色體 生長曲線

【摘要】：目的構(gòu)建人巨細(xì)胞病毒(HCMV)Han株US12基因缺失的BAC毒株,研究US12產(chǎn)物對HCMV Han株在人胚肺成纖維細(xì)胞(HELF)中復(fù)制的影響。方法以側(cè)翼含有US12基因同源序列的PCR引物擴增卡那霉素抗性基因,電轉(zhuǎn)至含有Han株BAC質(zhì)粒的大腸桿菌DY380-Han-wt-BAC,PCR及DNA測序驗證US12缺失的病毒序列。將缺失突變質(zhì)粒Han-ΔUS12-BAC-P電轉(zhuǎn)至HELF,獲得感染性病毒顆粒Han-ΔUS12-BAC。以MOI為0.1的Han-ΔUS12-BAC毒株及Han-wt-BAC毒株感染HELF,TCID50法測定上清中病毒滴度,繪制病毒增殖曲線。結(jié)果成功構(gòu)建了Han-ΔUS12-BAC克隆,轉(zhuǎn)染HELF后成功獲得感染性病毒。生長曲線實驗結(jié)果表明,ΔUS12缺失和野生型毒株在HELF中復(fù)制增殖與擴散水平無明顯差異。結(jié)論 US12為HCMV臨床株Han在HELF中增殖和擴散過程中的非必需基因。
[Abstract]:......
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院病毒研究室;錦州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;沈陽市婦嬰醫(yī)院臨床實驗室;沈陽市婦嬰醫(yī)院兒科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30672248,81371788) 盛京醫(yī)院自由研究者項目
【分類號】：R373
【正文快照】： 人巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV) US12家族包括US12~US21共10個位置相鄰但彼此沒有重疊序列的開放讀碼框架,編碼產(chǎn)物與G蛋白耦聯(lián)受體(G protein-coupled receptors,GPCRs)超家族及抗凋亡蛋白Bax inhibitor 1家族具有結(jié)構(gòu)同源性[1]。該家族成員基因高度保守[2-3],推

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本文編號：1353054