本文關鍵詞：葡萄糖及O-GlcNAc糖基化對人骨髓間充質干細胞增殖、凋亡、衰老的影響　出處：《中國脊柱脊髓雜志》2016年04期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的:探討微環(huán)境中不同濃度葡萄糖是否可通過蛋白質O位氮乙酰葡糖胺(O-Glc NAc)糖基化修飾影響人骨髓間充質干細胞增殖、周期、凋亡及衰老。方法:構建常規(guī)濃度葡萄糖(A組)(5.5mmol/L)、高濃度葡萄糖(B組)(25mmol/L)微環(huán)境模型及常糖糖基化(C組)(常糖+Thiamet-G 1.0mmol/L)、高糖糖基化(D組)(高糖+Thiamet-G 1.0mmol/L)細胞模型。人骨髓間充質干細胞在各組中培養(yǎng),于第3、5、7天用WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒測定各組細胞增殖情況;于第5天用流式細胞儀檢測各組細胞周期和細胞凋亡情況;于第7天用細胞衰老β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測各組細胞衰老情況;于第5天用Real-time PCR、Westen-bolt檢測不同處理組Cyclin D1和caspase-3的表達水平。結果:第3、5、7天時細胞增殖結果顯示,與A組相比,B組、C組和D組細胞增殖明顯下降(P0.05)。細胞周期結果顯示,B組、C組和D組相較于A組細胞周期G1期阻滯(P0.05)。細胞凋亡結果顯示,與A組相比,B組、C組和D組凋亡明顯增多(P0.05)。細胞衰老染色顯示,與A組相比,B組、C組和D組細胞衰老明顯增多(P0.05)。Real-time PCR結果顯示,Cyclin D1的m RNA相對值A組、B組、C組和D組分別為1.01±0.31、0.31±0.07、0.42±0.1、0.18±0.04,其他三組顯著低于A組(P0.05);caspase-3的m RNA相對值A組、B組、C組和D組分別為1.09±0.82、5.73±1.54、3.43±0.59、6.82±2.13,其他三組顯著高于A組(P0.05)。Westen-bolt結果顯示,A組h BMSCs內蛋白質O-Glc NAc糖基化水平高于B組;Cyclin D1的蛋白水平表達B組、C組和D組低于A組(P0.05),caspase-3的蛋白質水平表達B組、C組和D組高于A組(P0.05)。結論:微環(huán)境中高濃度葡萄糖和細胞蛋白質高水平O-Glc NAc糖基化修飾抑制人骨髓間充質干細胞增殖,阻滯細胞周期促進細胞凋亡及衰老。微環(huán)境中高濃度葡萄糖可誘導胞內蛋白質O-Glc NAc糖基化水平升高。微環(huán)境中高濃度葡萄糖誘導的蛋白質O-Glc NAc糖基化水平升高可能是其抑制增值促進凋亡和衰老的機制之一。
[Abstract]:......
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學新橋醫(yī)院骨科;武漢大學中南醫(yī)院循證與轉化醫(yī)學中心;
【基金】：國家自然科學基金面上項目(81271982,81472076);國家自然科學基金青年科學基金項目(81401801)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 間充質干細胞因其較強的增殖能力和潛在的平,可能通過O-Glc NAc糖基化修飾影響相關蛋分化多能性[1~3]在再生醫(yī)學領域有著廣闊的發(fā)展白質活性進而影響細胞內的生物學過程,比如增前景。其可以從骨髓、脂肪及臍帶血等多種組織中殖、凋亡和衰老等[18]。本研究擬通過觀察微環(huán)境中獲

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本文編號：1351087