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大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞體外分離培養(yǎng)及CM-DiI標記后的傳代示蹤

發(fā)布時間:2017-12-29 16:23

  本文關鍵詞:大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞體外分離培養(yǎng)及CM-DiI標記后的傳代示蹤 出處:《安徽醫(yī)科大學學報》2016年11期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的建立大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞(ADSCs)體外分離培養(yǎng)和細胞標記的方法,探討CM-Di I標記ADSCs在體外傳代示蹤的可行性。方法無菌切取SD大鼠腹股溝脂肪組織,運用酶原消化并差速貼壁的方法獲取原代細胞并進行傳代培養(yǎng)。觀察細胞形態(tài),對第3代ADSCs進行細胞表型鑒定和成骨成脂分化能力鑒定。采用CM-Di I標記第3代ADSCs并進行傳代培養(yǎng),熒光顯微鏡和激光掃描共聚焦顯微鏡觀察熒光標記情況,流式細胞儀檢測標記率。結果 ADSCs呈長梭形、漩渦樣生長,傳代后細胞生長增殖速度加快。流式細胞儀檢測結果顯示CD29、CD90陽性表達,CD34、CD45、CD31陰性表達。茜素紅和油紅O染色顯示ADSCs具有成骨成脂分化潛能。CM-Di I標記的紅色熒光存在于細胞膜和細胞質(zhì),不存在于細胞核,傳代培養(yǎng)后熒光有所衰減,第3、6、9代的熒光標記率分別為97.09%、66.21%和37.86%。結論大鼠ADSCs的生長增殖能力強,具有多向分化潛能,采用CM-Di I標記ADSCs簡單易行且示蹤效果良好,可為后期體內(nèi)實驗提供依據(jù)。
[Abstract]:......
【作者單位】: 西南醫(yī)科大學附屬醫(yī)院整形燒傷科;西南醫(yī)科大學附屬醫(yī)院骨關節(jié)外科;
【基金】:國家自然科學基金(編號:31271049) 四川省衛(wèi)生廳科研課題(編號:090228) 瀘州市科學技術局指導性科技計劃項目(編號:2010-6)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 2016-06-27接收脂肪間充質(zhì)干細胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)在2001年首先由Zuk et al[1]從人脂肪組織中發(fā)現(xiàn),其類似于骨髓間充質(zhì)干細胞,能夠穩(wěn)定增殖及自我更新,具有多向分化潛能。與其他干細胞相比,ADSCs具有來源廣泛、取材容易且獲取率高、體外擴增快、細胞老化率

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本文編號:1350951

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