本文關(guān)鍵詞：hESC和hiPSC體外定向誘導(dǎo)分化的實驗研究　出處：《鄭州大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 人胚胎干細(xì)胞 人工誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞 定向分化 類胚體 神經(jīng)花環(huán)

【摘要】：目的 研究體外誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cell,ESC)和人工誘導(dǎo)的人多能干細(xì)胞(Inducible pluripotent stem cells,iPSC)分化為內(nèi)耳毛細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞祖細(xì)胞的方案,并探討體外誘導(dǎo)分化各個階段相關(guān)基因的表達情況及其意義。 材料和方法 應(yīng)用含有抑制劑(DKK1, A8301,DMH)和細(xì)胞因子(胰島素樣生長因-1,堿性成纖維細(xì)胞生長因子)的培養(yǎng)基,使胚胎干細(xì)胞和人工誘導(dǎo)的人多能干細(xì)胞先懸浮培養(yǎng)后貼壁培養(yǎng),并對各個時間點的基因表達量進行實時定量PCR檢測,培養(yǎng)第13天進行免疫熒光檢測。 結(jié)果 懸浮培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞第三天可形成類胚體,隨著懸浮培養(yǎng)類胚體變得圓潤飽滿；貼壁培養(yǎng)并更換培養(yǎng)基,類胚體開始分化形成神經(jīng)花環(huán)。多能性基因nanog和oct4表達量隨時間的增長而降低；神經(jīng)元祖細(xì)胞特異性基因pax6和nestin表達量分別在第8天和第10天達到最高后開始減低；毛細(xì)胞祖細(xì)胞特異性基因otx2,pax2和pax8分別在第4天,第10天和第10天達到最高后開始減低。實驗組胚胎干細(xì)胞分化的祖細(xì)胞特異性基因otx2,nestin,pax6,pax2和pax8表達量與對照組相比有顯著性差異(p0.05)；實驗組人工誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞分化的祖細(xì)胞特異性基因otx2,nestin,pax6,pax2和pax8表達量與對照組相比有顯著性差異(p0.05)；胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞來源的祖細(xì)胞可特異性表達抗體PAX6,PAX2和NESTIN。 結(jié)論 1通過本實驗確立了誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞有效分化為毛細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞的祖細(xì)胞的實驗方案。 2體外培養(yǎng)時WNT信號抑制劑DKK1,BMPH信號抑制劑DMH1,TGF-β信號抑制劑A8301和細(xì)胞因子IGF可以有效的促進人胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)的人多能干細(xì)胞分化為毛細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞的祖細(xì)胞。 3在體外誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)的人多能干細(xì)胞分化為毛細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞的祖細(xì)胞的過程中特異性基因是相繼表達的。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R329

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 Wang Junli;Xu Yinglong;Zhao Yuli;Xu Min;;Different morphologic features of rat cochlea progenitor spheres and their implications[J];Journal of Medical Colleges of PLA;2012年06期

2 鄧曉聰;楊新明;;哺乳動物內(nèi)耳毛細(xì)胞的再生和功能恢復(fù)的研究進展[J];南通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年02期

3 趙云程;陳博;周川;張秀華;黃俊成;;家畜胚胎干細(xì)胞多能性候選信號通路及分子標(biāo)志[J];生物工程學(xué)報;2010年12期

4 張衛(wèi)琴;曹鴻國;張運海;殷慧群;陳濤;章孝榮;;體細(xì)胞重編程為多能干細(xì)胞的研究進展[J];生命科學(xué);2009年01期

5 鄧力山;毛小波;王燁;韓宇;張建波;趙鑫;;Reg3b在大鼠耳蝸的分布及噪聲刺激后的表達變化[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2013年29期

6 郎海南;;神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的活化和成人聽覺損傷后神經(jīng)再生及自我修復(fù)(英文)[J];中國醫(yī)學(xué)文摘(耳鼻咽喉科學(xué));2013年04期

7 邢蔚;閆輝;米文娟;陳俊;邱建華;;miR-182可以促進耳蝸前體細(xì)胞分化為毛細(xì)胞[J];中華耳科學(xué)雜志;2014年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 殷慧群;豬誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞的建立[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 韓瑋;移植胰島細(xì)胞和骨髓單個核細(xì)胞治療糖尿病實驗研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2010年

3 黑任軼;microRNA在耳蝸前體細(xì)胞增殖和分化中的作用探討[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

4 林穎;體外共培養(yǎng)誘導(dǎo)嗅球神經(jīng)前體細(xì)胞分化為功能性外周神經(jīng)元[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

5 薛濤;新生大鼠腦干耳蝸核存在神經(jīng)前體細(xì)胞的初步證據(jù)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

6 陳俊;新生大鼠耳蝸前體細(xì)胞分化的分子機制及微環(huán)境的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

7 袁先道;人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)內(nèi)耳毛細(xì)胞樣細(xì)胞的實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

8 秦賀;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療藥物性聾的基礎(chǔ)研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2010年

9 黃一波;Math1誘導(dǎo)的前庭毛細(xì)胞再生的轉(zhuǎn)分化過程與細(xì)胞增殖[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

10 趙宏喜;克服多能干細(xì)胞移植免疫排斥反應(yīng)的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李利;胚胎干細(xì)胞大鼠內(nèi)耳導(dǎo)入后的遷移與分化[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

2 肖佳佳;牛Oct4/Sox2/c-Myc/Klf4基因真核表達載體的構(gòu)建及皮膚成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

3 張衛(wèi)琴;豬Sox2和Nanog慢病毒表達載體的構(gòu)建[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

4 王蕾;老年性耳聾患者內(nèi)皮祖細(xì)胞功能研究[D];鄭州大學(xué);2009年

5 殷吉慶;山羊角膜緣干細(xì)胞熒光蛋白（Venus）細(xì)胞株建立及其移植研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

6 叢姍;不同飼養(yǎng)層對牛胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)效果的影響[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2012年

7 王一茹;人羊水間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特征及其體外向內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2012年

8 賈琦s，

本文編號：1350042