發(fā)布時(shí)間：2017-12-28 17:25

  本文關(guān)鍵詞：腸道病毒71型感染對(duì)小鼠IL-6，TNF-α和腦細(xì)胞凋亡的影響　出處：《青島大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 腸道病毒71型 RT-PCR IL-6 TNF-α 腦細(xì)胞凋亡

【摘要】：目的觀察balb/c小鼠對(duì)腸道病毒71型(EV71)感染的反應(yīng),不同組織(肺、腦)的病理變化,外周血清IL-6,TNF-α的水平及腦細(xì)胞凋亡情況。 方法5日齡balb/c小鼠,建立EV71感染模型,根據(jù)不同處理因素將小鼠分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組：給予100 TCID50 EV71灌胃0.1ml,對(duì)照組：給予相同劑量RPMI1640灌胃。接種后每天詳細(xì)觀察動(dòng)物癥狀并相應(yīng)予以評(píng)分；分別于接種不同時(shí)間(1天、3天、5天、7天)處死小鼠,HE染色觀察不同組織(肺、腦)的病理變化；RT-PCR檢測(cè)EV71對(duì)腦組織的侵犯情況；ELISA檢測(cè)外周血清IL-6,TNF-α的水平；膜連蛋白(Annexin V)/碘化丙啶(PI)雙染結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)(FCM)測(cè)定小鼠腦細(xì)胞的凋亡情況。應(yīng)用方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果(1)接種病毒1天后實(shí)驗(yàn)組小鼠即可出現(xiàn)少動(dòng)、弓背、翹尾癥狀,3天后明顯消瘦,其中7只小鼠出現(xiàn)后肢活動(dòng)不靈,5天后3只小鼠死亡。對(duì)照組小鼠均存活且主觀觀察未見(jiàn)明顯癥狀。(2)實(shí)驗(yàn)組小鼠于接種病毒3天時(shí)肺組織出現(xiàn)明顯病理改變,表現(xiàn)為肺泡壁增厚,大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),肺間質(zhì)水腫,腦組織表現(xiàn)為膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯,對(duì)照組未見(jiàn)明顯變化。(3)接種病毒第5天和第7天可于實(shí)驗(yàn)組腦組織檢測(cè)到病毒RNA,接種病毒第1天和第3天于實(shí)驗(yàn)組未檢測(cè)到病毒RNA,對(duì)照組所有時(shí)段病毒RNA全部陰性。(4)實(shí)驗(yàn)組血清IL-6,TNF-α水平明顯高于對(duì)照組(P0.05),并于24-72h達(dá)高峰,此后逐漸下降,于第7天時(shí)基本降至正常。(5)實(shí)驗(yàn)組小鼠腦細(xì)胞于接種第3天始出現(xiàn)凋亡,于第5天達(dá)高峰,第7天時(shí)該比率反而降低,但是仍高于對(duì)照組,差異有顯著性。 結(jié)論(1)balb/c小鼠模型可以模擬EV71感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)：接種EV71后小鼠出現(xiàn)相應(yīng)癥狀,腦、肺組織出現(xiàn)病毒感染的表現(xiàn),腦組織可檢測(cè)到EV71 RNA； (2)EV71感染過(guò)程中,外周血TNF-α,IL-6于感染早期明顯升高,72h后逐漸下降,7天左右恢復(fù)正常,可引起機(jī)體炎癥反應(yīng)；(3)EV71感染過(guò)程中,早期即可出現(xiàn)腦細(xì)胞凋亡,接種病毒第5天時(shí)達(dá)高峰,與病毒核酸檢出相一致；(4)炎癥損傷和細(xì)胞凋亡機(jī)制共同參與EV71感染中樞損害過(guò)程。
[Abstract]:Objective To observe the response of balb/c mice to enterovirus 71 (EV71) infection, pathological changes in different tissues (lungs and brain), serum levels of IL-6, TNF- alpha and apoptosis of brain cells.
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R373

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