基于順磁微粒的金黃色葡萄球菌腸毒素B免疫層析試紙條的制備
本文關(guān)鍵詞:基于順磁微粒的金黃色葡萄球菌腸毒素B免疫層析試紙條的制備 出處:《西北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2016年03期 論文類(lèi)型:期刊論文
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【摘要】:采用基于順磁微粒標(biāo)記抗體的免疫層析法,制備金黃色葡萄球菌腸毒素B(SEB)快速定量檢測(cè)的層析試紙條。利用EDC和NHS交聯(lián)活化順磁微粒,對(duì)順磁微粒包被抗體的體系進(jìn)行優(yōu)化;根據(jù)雙抗夾心法原理制備免疫層析試紙條,對(duì)制備的SEB免疫層析試紙條進(jìn)行測(cè)試研究。優(yōu)化的順磁微粒偶聯(lián)抗體的緩沖體系為p H 9.0,5mmol/L硼酸,0.05%Tween-20;磁珠包被抗體量為125μg/2mg磁珠,封閉劑為0.25%的脫脂牛奶,磁珠保存液為5mmol/L硼酸、0.05%Tween-20+0.05%Triton X-100,0.01%Na N3,0.5%BSA,p H9.0;建立的SEB順磁微粒免疫層析試紙條T線抗體濃度為1mg/m L,最低檢測(cè)限為1ng/m L,磁信號(hào)檢測(cè)顯示,該試紙條在SEB濃度0.1~1 000ng/m L范圍內(nèi)具有很好的線性關(guān)系。SEB順磁微粒免疫層析法具有簡(jiǎn)單快速、靈敏度高、可定量的特點(diǎn),可應(yīng)用于SEB的快速檢測(cè)。
【作者單位】: 陜西省微生物研究所分子生物學(xué)研究中心;第四軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院藥物基因組學(xué)教研室;
【基金】:西安市科技局現(xiàn)代農(nóng)業(yè)推進(jìn)計(jì)劃基金資助項(xiàng)目(NC1208(4)) 陜西省科學(xué)院應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金資助項(xiàng)目(2013K-07) 陜西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2014K11-02-02-01)
【分類(lèi)號(hào)】:R392
【正文快照】: 金黃色葡萄球菌腸毒素(Staphylococcal enter-otoxins,SEs)是金葡菌分泌產(chǎn)生的胞外毒素,最主要有SEA-SEE五種血清型[1],其中SEB具有極強(qiáng)的耐熱性,可耐受100℃30min不被破壞[2],這就造成食品經(jīng)加熱處理后金葡菌雖已被殺死,但其產(chǎn)生的SEB致病力仍然存在,其半數(shù)致死劑量為0.02μg
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1313162
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