KSHV K15蛋白多克隆抗體的制備及其初步鑒定
本文關(guān)鍵詞:KSHV K15蛋白多克隆抗體的制備及其初步鑒定 出處:《安徽醫(yī)科大學學報》2016年01期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的制備卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒(KSHV)K15蛋白多克隆抗體,并將其應用于細胞內(nèi)K15蛋白的檢測。方法選擇K15基因第8個外顯子(K15P_(ex8))序列做為模板,構(gòu)建K15P_(ex8)的表達載體p QE-80L-K15P_(ex8)。誘導重組菌蛋白表達,免疫新西蘭兔,制備抗K15P_(ex8)多克隆抗體,并用間接ELISA法測定抗體效價。將p FJ和p FJ-K15P兩種重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)入HEK 293T細胞,用Western blot法檢測抗K15P_(ex8)多克隆抗體對K15P-Flag蛋白的識別。結(jié)果由K15P_(ex8)制備的抗K15P_(ex8)多克隆抗體效價大于1∶6 400,能特異性識別重組質(zhì)粒p FJ-K15P轉(zhuǎn)染293T細胞產(chǎn)生的K15P-Flag融合蛋白。結(jié)論初步證明K15P_(ex8)蛋白有免疫反應性,該多克隆抗體可用于重組的K15P-Flag融合蛋白的檢測。
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學微生物學教研室;
【基金】:國家自然科學基金(編號:81271837) 安徽高校省級自然科學研究項目(編號:KJ2012A161) 安徽醫(yī)科大學博士科研經(jīng)費資助項目(編號:XJ200914)
【分類號】:R392
【正文快照】: 2015-10-22接收卡波氏肉瘤相關(guān)皰疹病毒(Kaposi's sarcoma-as-sociated herpesvirus,KSHV)又被稱為人類皰疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8),于1994年Chang et al[1]在卡波氏肉瘤(Kaposi's sacoma,KS)組織中發(fā)現(xiàn),是引起KS的病原體[2]。研究[3]證明KSHV還是原發(fā)滲液性淋巴
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3 高t熻,
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