本文關鍵詞：補陽還五湯聯(lián)合MSCs移植對腦缺血再灌注模型大鼠VEGF及信號通路的影響

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【摘要】：目的揭示補陽還五湯聯(lián)合骨髓間充質干細胞(MSCs)移植促進腦缺血血管新生的機制。方法選取雄性SD大鼠96只,隨機分為腦缺血再灌注模型組、內皮細胞抑制素組、MSCs移植組及補陽還五湯聯(lián)合MSCs移植組。參照改良的Longa法建立大鼠腦缺血再灌注模型(MCAO)。模型組在立體定位儀下,用微量進樣器通過側腦室給予生理鹽水10μl;抑制素組給予內皮細胞抑制素阿瓦斯汀5μl,生理鹽水5μl;MSCs組及聯(lián)合組給予阿瓦斯汀5μl、培養(yǎng)的MSCs 5μl。聯(lián)合組術前3天給予補陽還五湯(10ml/kg)灌胃,其它各組以同等體積的生理鹽水灌胃,每日一次。模型組、抑制素組及MSCs組48 h后,采集實驗動物血清和腦組織;聯(lián)合組分別于12h、24h、36h、48h采集,采用免疫組化法檢測大鼠血清VEGF及缺血腦組織VEGF的表達;應用免疫印跡蛋白法檢測VEGFR2、p-VEGFR2、ERK、p-ERK、AKT、p-AKT的蛋白含量。結果抑制素組與模型組相比,大鼠血清及腦組織VEGF含量明顯降低(P0.05);ERK、AKT含量變化不大(P0.05);VEGFR2、p VEGFR2、p ERK和p AKT表達均顯著下降(P0.05)。MSCs組與抑制素組相比,大鼠血清及腦組織VEGF含量明顯升高(P0.05);ERK、AKT含量影響不大(P0.05);VEGFR2、p-VEGFR2、p-ERK和p-AKT表達均升高(P0.05);聯(lián)合組與抑制劑組相比,除ERK外,所有指標均有升高,以24h、36h、48h三個時間點最為明顯(P0.05、P0.01)。結論內皮細胞抑制素(阿瓦斯汀)可通過抑制VEGFR2及其磷酸化,降低ERK、AKT的磷酸化水平,阻止經(jīng)MAPK途徑的胞Qg信號轉導途徑,從而抑制內皮細胞的增殖和遷移,阻止新生血管的形成;MSCs組及聯(lián)合組主要經(jīng)VEGFR-2所介導的信號通路及PI3K/AKT信號途徑,誘導內皮細胞增殖和遷移,促進血管新生,對ERK途徑的胞Qg信號影響不大。
【作者單位】： 河南中醫(yī)學院;河南中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學基金(No.81072799/H2708)
【分類號】：R285.5;R-332
【正文快照】： P13K/Akt;ERK前期的研究證明:補陽還五湯聯(lián)合骨髓間充質干細胞通過促進神經(jīng)細胞分化、抑制神經(jīng)細胞凋亡、促進神經(jīng)營養(yǎng)因子等機制對大鼠腦缺血再灌注損傷起到保護作用[1~5]。血管新生[6](An-giogenesis)是指從已存在的血管上以出芽方式長出新的毛細血管的過程,是一個程序化的

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