本文關(guān)鍵詞：脂肪間充質(zhì)干細胞對博來霉素誘導的硬皮病小鼠模型的治療作用

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【摘要】：目的:研究脂肪間充質(zhì)干細胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)對博來霉素(bleomycin,BLM)誘導的硬皮病小鼠的治療效果及其可能的作用機制。方法:選取C57BL/6J雌性小鼠24只,采用皮下注射BLM[2mg/(kg·d)]建立硬皮病小鼠模型,隨機分為正常對照組、BLM組、ADSCs(皮下)組和ADSCs(靜脈)組,每組6只,正常對照組給予生理鹽水2 m L/(kg·d)皮下注射,其余3組分別給予BLM皮下注射,連續(xù)3周,然后,ADSCs皮下和尾靜脈注射組分別給予皮下和尾靜脈注射ADSCs(2×105個細胞)治療,每4天1次,共3次。流式細胞術(shù)檢測小鼠脾細胞中的輔助T細胞17(T-helper 17,TH17)及調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cell,Treg),實時熒光定量聚合酶聯(lián)反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)法檢測小鼠肺組織中相關(guān)細胞因子的表達水平,酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)檢測小鼠血清中白介素(interleukin,IL)-6、轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)的含量,蘇木精-伊紅染色(hematoxylin eosin staining,HE)觀察小鼠的皮膚和肺組織病理學改變。結(jié)果:流式細胞術(shù)結(jié)果顯示,BLM組較正常對照組小鼠脾細胞中TH17和Treg所占比例升高(15.30%±1.29%vs.4.32%±0.79%;9.90%±1.95%vs.5.18%±1.35%,P均0.05),經(jīng)ADSCs治療后,TH17所占比例降低(5.02%±0.83%,6.00%±0.82%vs.15.30%±1.29%,P均0.05),而Treg所占比例升高(14.32%±1.59%,11.09%±4.31%vs.9.90%±1.95%,P均0.05)。與正常對照組相比,BLM組小鼠肺組織中IL-17、IL-6、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的mRNA表達水平及血清中IL-6的含量均升高[3.54±0.30,10.65±0.66,5.37±0.52 vs.1.00±0.00;(21.2±1.74)ng/L vs.(16.87±1.09)ng/L,P均0.05],ADSCs治療后,其表達量下降[1.63±0.45,1.50±0.29 vs.3.54±0.30;3.11±0.85,2.98±0.76 vs.10.65±0.66;1.45±0.47,1.59±0.41 vs.5.37±0.52;(17.87±1.45)ng/L,(17.61±1.16)ng/L vs.(21.2±1.74)ng/L,P均0.05],ADSCs(皮下)組和ADSCs(靜脈)組比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。BLM組小鼠血清中TGF-β的含量較正常對照組升高[(33.95±2.49)ng/L vs.(28.8±2.29)ng/L,P0.05],但小鼠肺組織中TGF-βmRNA的表達水平與正常對照組之間差異無統(tǒng)計學意義(1.17±0.11 vs.1.00±0.00,P0.05),經(jīng)ADSCs治療后TGF-β基因和蛋白的表達無明顯變化[1.25±0.11,1.26±0.12 vs.1.17±0.11;(31.84±2.04)ng/L,(31.25±2.36)ng/L vs.(33.95±2.49)ng/L,P0.05]。HE染色結(jié)果顯示,BLM組與正常對照組相比,肺組織有大量炎性細胞浸潤,肺泡間隔斷裂或消失;皮膚真皮層增厚,有大量的膠原纖維積聚,經(jīng)ADSCs治療后小鼠肺組織炎癥有所改善,皮膚的真皮層變薄,膠原纖維積聚減少。結(jié)論:ADSCs可以有效緩解硬皮病小鼠肺的炎癥和皮膚的纖維化癥狀,其抗炎和抗纖維化作用與其免疫調(diào)節(jié)功能有關(guān)。
【作者單位】： 包頭醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院風濕免疫科;內(nèi)蒙古自治區(qū)自體免疫學重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金項目(81360464) 內(nèi)蒙古自然科學基金項目(2016MS08109)資助~~
【分類號】：R593.25;R-332
【正文快照】： 室,內(nèi)蒙古自治區(qū)包頭014010)mice were randomly divided into control group,bleomycin(BLM)group,ADSCs(hypodermic injection)group and ADSCs(intravenous injection)group.BLM[2 mg/(kg·d)]was injected into the mice toestablish the model of scleroderma.There were

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