本文關(guān)鍵詞：H3亞型流感重組腺病毒的純化工藝研究

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【摘要】：目的為了探索經(jīng)濟(jì)、高效的腺病毒的純化工藝,采用陰離子交換層析和分子篩層析兩步法對(duì)H3亞型流感重組腺病毒pacAd-H3-EHA-H1HA1new進(jìn)行純化,并評(píng)價(jià)純化效果。方法利用7L生物反應(yīng)器培養(yǎng)HEK-293細(xì)胞,用于對(duì)H3型流感重組腺病毒進(jìn)行擴(kuò)增;利用凍融的方法使病毒從細(xì)胞中釋放,通過陰離子交換層析和分子篩層析法純化病毒,用分光光度計(jì)檢測(cè)純化樣品的純度,并測(cè)定病毒的滴度和回收率。結(jié)果純化后的樣品經(jīng)PCR鑒定正確,純化前后的病毒滴度分別為5.6×10~9 TCID_(50)/ml和1.1×10~(10) TCID_(50)/ml,純化后樣品純度(A260/A280值)分別為2.01和1.26,陰離子交換層析純化的回收率為31.5%,分子篩層析純化的回收率為81.4%,總回收率為25.6%。結(jié)論利用陰離子交換層析和分子篩層析兩步法純化H3亞型流感重組腺病毒的回收率和滴度高,該方法可用于重組腺病毒的純化。
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所;吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;
【基金】：國(guó)家863項(xiàng)目(No.2012AA02A403) 國(guó)際合作交流項(xiàng)目(No.2014DFA30290) 吉林省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.20130101093JC)
【分類號(hào)】：R373.13
【正文快照】： *?**?流感病毒(influenza viruses,IV)每年的季節(jié)性流行造成約500 000人死亡,對(duì)人類的危害極大[1]。歷史上有幾次流感大流行,分別是1918年的西班牙H1N1流感,1957年亞洲H2N2流感,1968年香港H3N2流感和2009年墨西哥H1N1豬流感[2]。隨著流感病毒的變異,流感病毒已經(jīng)突破種屬界限,

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 黃盛東,張寶仁,梅舉,李白翎;人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-D的重組腺病毒制備與鑒定[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2000年05期

2 趙小東,韓峰,王艷,楊貴賓,應(yīng)革,林勇平,王璇,吳淑華;表達(dá)流感病毒神經(jīng)氨酸酶基因的重組腺病毒的構(gòu)建[J];中國(guó)病毒學(xué);2003年03期

3 祁麗,顧銘,叢威;重組腺病毒生產(chǎn)技術(shù)研究進(jìn)展[J];過程工程學(xué)報(bào);2004年05期

4 吳小兵,董小巖,伍志堅(jiān),屈建國(guó),侯云德;一種快速高效分離和純化重組腺病毒伴隨病毒載體的方法[J];科學(xué)通報(bào);2000年19期

5 何金生,王健偉,溫樂英,洪濤;一種快速構(gòu)建重組腺病毒的簡(jiǎn)便方法[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年01期

6 唐云霞,顧錦法,蔣琳蘭;構(gòu)建重組腺病毒的新策略[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).病毒學(xué)分冊(cè);2005年03期

7 龐小娟;趙曉琴;陳芳芳;彭薇;張弛;臧宇輝;羅冰;虞偉;秦浚川;李曉軍;;人分化抑制因子3重組腺病毒的制備及鑒定[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2010年01期

8 黃泰源;薛濤;張光武;;大鼠降鈣素基因相關(guān)肽重組腺病毒的構(gòu)建與鑒定[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2012年15期

9 李志會(huì);岳盈盈;邢來(lái)田;張鳳麗;李妍;劉菊華;李鵬;萬(wàn)言珍;孟紅;;重組腺病毒HBV preS2/S-AD5的構(gòu)建及生物安全性初步研究[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年05期

10 劉根梅;羅滿林;陳瑞愛;陳矩豪;裴黨帥;;豬γ干擾素基因重組腺病毒的構(gòu)建與鑒定[J];中國(guó)獸醫(yī)雜志;2011年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 熊俊;孫擎;胡凱猛;冀凱宏;劉厚奇;;重組腺病毒pAdEasy-1/pAdTrack-CMV-hSnaill質(zhì)粒的構(gòu)建[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

2 張春紅;黃忠;阮良基;曹漢威;;含豬生長(zhǎng)激素基因的重組腺病毒的構(gòu)建[A];第一屆中國(guó)養(yǎng)豬生產(chǎn)和疾病控制技術(shù)大會(huì)——2005中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2005年

3 齊延新;李霄;金寧一;;重組腺病毒Ad-GP的純化[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第十二次人獸共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)暨第六屆第十四次教學(xué)專業(yè)委員會(huì)論文集[C];2012年

4 郄春花;秦波;劉杞;黃愛龍;;Hyper-IL-6融合基因重組腺病毒的構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二次全國(guó)病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

5 谷雨;葉菁;李煩繁;張麗英;李航;劉芳;李青;;攜帶CIDE-3基因重組腺病毒的構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

6 杜以軍;姜平;楊曉瑋;湯景元;李玉峰;李永東;;豬口蹄疫病毒多抗原表位重組腺病毒的構(gòu)建與鑒定[A];第六屆全國(guó)會(huì)員代表大學(xué)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上）[C];2005年

7 杜以軍;姜平;楊曉瑋;湯景元;李玉峰;李永東;;豬口蹄疫病毒多抗原表位重組腺病毒的構(gòu)建與鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第六屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

8 湯景元;姜平;蔣文明;李玉峰;馬蘇;;表達(dá)PRRSV M蛋白重組腺病毒的構(gòu)建及其免疫特性研究[A];第六屆全國(guó)會(huì)員代表大學(xué)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上）[C];2005年

9 張伶;魏于全;蔣磊;李繼承;;OX-M-AdmCLB1重組腺病毒制備及其誘導(dǎo)的體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng)[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2006年

10 張翠云;孫恩成;劉霓紅;楊濤;徐青元;趙晶;秦永麗;馮瑜菲;魏鵬;王文世;吳東來(lái);;西尼羅病毒E蛋白重組腺病毒的構(gòu)建[A];2012年中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)病理學(xué)分會(huì)暨中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)動(dòng)物病理生理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 李文輝;基于重組腺病毒的狂犬病毒基因工程疫苗研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

2 馬臻;HBV X-HCV C融合基因重組腺病毒的構(gòu)建及對(duì)肝細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

3 梁蔚芳;聚乙二醇化干擾素α-2a與干擾素α-2a在體內(nèi)和體外的抗乙型肝炎病毒活性研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

4 金軼;攜帶GFAP啟動(dòng)子和p27基因的重組腺病毒對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖的影響[D];華中科技大學(xué);2014年

5 李廣明;靶向PRRSV及其PAM細(xì)胞病毒受體基因shRNA重組腺病毒的構(gòu)建與抑制PRRSV復(fù)制研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

6 李璞媛;漢坦病毒嵌合基因G1S0.7、G2S0.7重組腺病毒的改建、表達(dá)及其免疫學(xué)特性的比較研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

7 馬樹東;Her-2/neu膜外及跨膜區(qū)蛋白基因重組腺病毒的構(gòu)建和誘導(dǎo)的免疫效應(yīng)[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

8 楊閩楠;RNAi靶向PRRSV N基因及GP5基因ADE表達(dá)缺失重組腺病毒免疫原性研究[D];吉林大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 薛曉娟;表達(dá)水泡性口炎病毒G蛋白重組腺病毒的構(gòu)建與免疫原性分析[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 劉凱;乙腦E基因和豬白細(xì)胞介素6基因重組腺病毒的構(gòu)建與初步免疫研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

3 焦月盈;表達(dá)人呼吸道合胞病毒結(jié)構(gòu)蛋白的重組腺病毒及桿狀病毒的構(gòu)建與鑒定[D];北京交通大學(xué);2011年

4 蘇永良;力生長(zhǎng)因子、E肽重組腺病毒的構(gòu)建及其在神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)[D];西南大學(xué);2013年

5 葛瑋;Dmrt7基因重組腺病毒及腺相關(guān)病毒載體的構(gòu)建及鑒定[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

6 李繼偉;氧化固醇結(jié)合蛋白8重組腺病毒構(gòu)建及相關(guān)功能研究[D];暨南大學(xué);2013年

7 李亞瓊;hIFN-γ重組腺病毒的構(gòu)建[D];四川大學(xué);2006年

8 李光明;重組腺病毒rAdCDglyTK的構(gòu)建和體內(nèi)、外抑殺瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

9 王卓越;重組腺病毒Ad-VT的安全性評(píng)價(jià)[D];吉林大學(xué);2012年

10 戈小琴;腸道病毒71型VP1-VP4在重組腺病毒系統(tǒng)中的表達(dá)及免疫學(xué)評(píng)價(jià)[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

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本文編號(hào)：1195329