本文關(guān)鍵詞：小鼠ANA-1巨噬細(xì)胞不同極化狀態(tài)下補(bǔ)體組分mRNA動(dòng)態(tài)分析

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【摘要】：目的:觀察小鼠ANA-1巨噬細(xì)胞不同極化狀態(tài)下補(bǔ)體相關(guān)組分的mRNA動(dòng)態(tài)變化。方法:分別以LPS(1μg/ml)、IL-4(20 ng/ml)體外刺激小鼠ANA-1細(xì)胞,于刺激后3、8、12及24 h時(shí)間點(diǎn)收獲細(xì)胞,Trizol法提取細(xì)胞總RNA,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測IL-1β、CCL2、Arg-1的表達(dá),判斷細(xì)胞極化情況,檢測胞內(nèi)C3、Cf B、CRIg、C1q補(bǔ)體分子mRNA的動(dòng)態(tài)表達(dá)。結(jié)果:細(xì)胞極化情況:刺激3 h后LPS組IL-1β、CCL2的mRNA表達(dá)上調(diào),12 h達(dá)高峰(2~(-△△Ct)分別為297.0±31.0和19.9±3.3);在IL-4組中以Arg-1mRNA表達(dá)上調(diào)顯著,于24 h達(dá)高峰(2~(-△△Ct):27.3±9.1),提示LPS組細(xì)胞向M1方向極化,IL-4組向M2方向極化。細(xì)胞內(nèi)補(bǔ)體mRNA的動(dòng)態(tài):兩極化組的相應(yīng)補(bǔ)體組分均表現(xiàn)為不同程度的上調(diào),其中:C1q、C3在M2極化組刺激8 h后顯著上調(diào),刺激12 h時(shí)達(dá)高峰(2~(-△△Ct)分別為94.9±12.9和11.3±2.4);Cf B因子在M1極化組中顯著上調(diào),以刺激12 h表達(dá)上調(diào)達(dá)高峰(2~(-△△Ct)為61.4±6.2);CRIg在兩組中均在24 h時(shí)表達(dá)上調(diào)且具有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:LPS/IL-4刺激3 h后,ANA-1細(xì)胞分別向M1、M2方向極化;不同補(bǔ)體組分mRNA的表達(dá)在兩組中均上調(diào)但表達(dá)譜不同,其中C1q、C3和CRIg在M2極化組中上調(diào)更為顯著,而Cf B因子在M1極化組中顯著上調(diào);除CRIg外,C1q、C3及Cf B因子均在刺激12 h時(shí)上調(diào)達(dá)高峰,上述結(jié)果提示補(bǔ)體組分的變化可能與極化的巨噬細(xì)胞功能有關(guān)。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;貴州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：貴州省社會(huì)發(fā)展合作專項(xiàng)資金項(xiàng)目(黔科合[2010]3155) 貴州省科學(xué)技術(shù)基金(黔科合J字[2008]2156號)資助
【分類號】：R392
【正文快照】： 在脊椎動(dòng)物體內(nèi)補(bǔ)體系統(tǒng)由30多種蛋白組成,通常以無活性的形式廣泛存在于血液、組織液和細(xì)胞膜表面,是機(jī)體固有免疫的重要組成成分[1]。除血液中的補(bǔ)體成分主要由肝細(xì)胞合成分泌外,機(jī)體局部組織中的肝外補(bǔ)體主要來自活化的巨噬細(xì)胞。近年來,不同微環(huán)境造成巨噬細(xì)胞的極化而導(dǎo)

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