本文關(guān)鍵詞：家蠶過敏原CSP5克隆表達(dá)、純化鑒定及分析

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【摘要】：克隆家蠶過敏原CSP5(chemosensory protein 5precursor)基因,表達(dá)、純化該蛋白,鑒定其免疫活性,并進(jìn)行生物信息學(xué)分析。人工合成家蠶化學(xué)感受蛋白5前體CSP5基因,將其連接至pMD18-T克隆載體,用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá)后進(jìn)行純化,用western blotting和ELISA鑒定其免疫學(xué)特性,并采用生物信息學(xué)方法預(yù)測CSP5蛋白的理化性質(zhì)、三級(jí)結(jié)構(gòu)、潛在B細(xì)胞抗原表位。本研究成功克隆了純度較高的重組CSP5蛋白,測序鑒定蛋白分子質(zhì)量約為14.25kD。重組過敏原CSP5能與家蠶過敏患者血清IgE發(fā)生特異性結(jié)合。生物信息學(xué)方法推導(dǎo)其潛在B細(xì)胞抗原表位為17~22、35~36、51~55、70~74、106~110、112~115。獲得的重組蛋白CSP5具有與天然蛋白相似的免疫學(xué)活性,為以標(biāo)準(zhǔn)化抗原作為臨床特異性診斷和治療以及由家蠶引起的過敏性疾病的進(jìn)一步研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 深圳大學(xué)過敏反應(yīng)與免疫學(xué)研究所;
【基金】：國家自然基金(81273275) 衛(wèi)生部公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(2015SQ00136) 廣東省對(duì)外科技合作項(xiàng)目(2013B051000088)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 近年來,變態(tài)反應(yīng)性疾病在世界各國的發(fā)病率逐步提高,總發(fā)病率高達(dá)10%~30%,被世界衛(wèi)生組織視為當(dāng)前世界性的重大衛(wèi)生學(xué)問題[1-2]。過敏性哮喘、過敏性鼻炎、過敏性皮炎及過敏性眼結(jié)膜炎等多種疾病在臨床上十分常見[3]。引起變態(tài)反應(yīng)性疾病的變應(yīng)原種類眾多,其中蠶蛹體因高蛋白

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