本文關(guān)鍵詞：衰老標(biāo)記蛋白30對過氧化氫所致人皮膚成纖維細(xì)胞衰老表型的影響

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【摘要】：目的觀察高表達(dá)的衰老標(biāo)記蛋白30(SMP30)對過氧化氫(H_2O_2)所致的正常人皮膚成纖維細(xì)胞(NHSF)衰老表型的影響。方法實驗分為轉(zhuǎn)染H_2O_2處理組(NHSF+SMP30+H_2O_2組)、轉(zhuǎn)空載體H_2O_2處理組(NHSF+空載體+H_2O_2組)和轉(zhuǎn)空載體組(NHSF+空載體組)。NHSF細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染人SMP30 c DNA或空載體pc DNA3.1(分別命名為NHSF+SMP30、NHSF+空載體),然后150μmol·L-1H_2O_2處理2 h。應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和蛋白印跡法分析SMP30的表達(dá),顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),并檢測與衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)、細(xì)胞活性氧(ROS)及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。結(jié)果人SMP30 c DNA明顯上調(diào)了NHSF中SMP30的表達(dá)。NHSF+空載體+H_2O_2組SMP30 mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯低于NHSF+空載體組(P0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2組SMP30 mRNA和蛋白表達(dá)水平高于NHSF+空載體+H_2O_2組(P0.05)。NHSF+空載體+H_2O_2組較NHSF+空載體組SA-β-gal染色率明顯增高(P0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2組較NHSF+空載體+H_2O_2組SA-β-gal染色率明顯下降(P0.05)。NHSF+空載體+H_2O_2組較NHSF+空載體組ROS活性明顯增高(P0.05),而SOD水平明顯降低(P0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2組較NHSF+空載體+H_2O_2組ROS活性明顯下降,而SOD水平明顯上升(P0.05)。結(jié)論高表達(dá)的SMP30能夠抑制細(xì)胞SA-β-gal和ROS的表達(dá),同時上調(diào)SOD的活性。
【作者單位】： 湖北中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院武漢市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院皮膚科;湖北中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 衰老標(biāo)記蛋白 過氧化氫 成纖維細(xì)胞 氧化應(yīng)激 細(xì)胞衰老
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:81101212,81574037) 湖北省自然科學(xué)基金資助項目(編號:2012ffc83,2015CFB577) 武漢市衛(wèi)生局(衛(wèi)生計生委)科研基金資助項目(編號:WX12B20,WX16D30) 武漢市中青年醫(yī)學(xué)骨干人才培養(yǎng)工程基金資助項目(編號:2015)
【分類號】：R339.38
【正文快照】： 衰老標(biāo)記蛋白30(senescence marker protein 30,SMP30)又稱為鈣調(diào)素[1],是最早在老鼠肝臟中被識別的一種新穎的衰老標(biāo)記蛋白[2]。作者前期研究發(fā)現(xiàn),SMP30可能介導(dǎo)了β-聯(lián)蛋白延緩人皮膚成纖維細(xì)胞衰老[3]。為進(jìn)一步明確SMP30是否具有抗人皮膚成纖維細(xì)胞(normal human skin fib

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本文編號：1109015