本文關(guān)鍵詞：小鼠生精細胞的體外雙室無血清培養(yǎng)

  更多相關(guān)文章： 精細胞 細胞培養(yǎng)技術(shù) 小鼠

【摘要】：目的探討無血清條件下應(yīng)用插入式細胞培養(yǎng)皿(Transwell小室)對小鼠睪丸間質(zhì)細胞-支持細胞-生精細胞的雙室培養(yǎng)技術(shù)。方法取60日齡C57BL/6雄性小鼠睪丸間質(zhì)細胞和15日齡雄性小鼠睪丸支持細胞與生精細胞混合細胞團雙室共培養(yǎng),不添加血清。每日在倒置顯微鏡下觀察生精細胞的形態(tài)和生長情況,蘇木精染色觀察生精細胞形態(tài),染色體倍性分析檢測細胞分化情況。結(jié)果在培養(yǎng)1周后,可見圓形精子細胞出現(xiàn),2周后可見長形精子細胞,3周后可見較短鞭毛,生精細胞可存活8周;培養(yǎng)1周時,流式細胞術(shù)可檢測出單倍體細胞,單倍體細胞百分比隨培養(yǎng)時間延長而增加。結(jié)論應(yīng)用雙室無血清培養(yǎng)體系體外培養(yǎng)小鼠生精細胞可獲得精子且生精細胞存活時間較長。
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院組織胚胎學(xué)教研室;河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院腎內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 精細胞 細胞培養(yǎng)技術(shù) 小鼠
【基金】：河北省自然科學(xué)基金項目(H2013201139)
【分類號】：R321.1
【正文快照】： 由于精子發(fā)生與睪丸結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性,很難針對整個有機體精子發(fā)生及相關(guān)基因的作用機制進行深入研究。同時,外源化學(xué)物質(zhì)對精子發(fā)生的影響逐漸引起更多學(xué)者的關(guān)注,主要以動物實驗和體外研究為主[1-2]。因此,生精細胞的體外培養(yǎng)成為深入研究精子發(fā)生過程,闡明精子發(fā)生相關(guān)基因功能

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 商學(xué)軍,黃宇烽;生精細胞移植與睪丸功能研究[J];中華男科學(xué);2001年01期

2 蔣耀青,張乃昌,吳鑒,顧蘇濱,朱蘇玲,李芳媛,孫海源;鎘對雄性小鼠生精細胞的影響[J];遺傳學(xué)報;1988年03期

3 黃宇烽,徐建平,商學(xué)軍,戈一峰;凋亡生精細胞的形態(tài)學(xué)觀察[J];金陵醫(yī)院學(xué)報;1995年03期

4 黃宇烽，徐建平，商學(xué)軍，戈一峰;凋亡生精細胞的觀察[J];解剖學(xué)報;1996年01期

5 童建孫,王興海;生精細胞的凋亡[J];國外醫(yī)學(xué)(計劃生育分冊);1996年01期

6 王江平,葉德立,張明輝,李焱萍;睪丸內(nèi)生精細胞與精液生精細胞之研究[J];江西醫(yī)學(xué)檢驗;2003年02期

7 陳偉;陸祥;舒小林;李季蓉;;砷對大鼠生精細胞及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達影響[J];中國公共衛(wèi)生;2008年11期

8 李翠英;袁長巍;曹興午;;生精細胞檢查及其臨床意義[J];中國男科學(xué)雜志;2010年06期

9 印洪林,周曉軍,黃宇烽,崔英霞,陸珍鳳;人類凋亡生精細胞超微結(jié)構(gòu)研究[J];中華男科學(xué);2001年01期

10 陳偉;陸祥;舒小林;李季蓉;;三氧化二砷對大鼠生精細胞端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶活性的影響[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 趙廣明;楊立順;趙連華;韓貴夫;王相澤;陳奇珂;楊明;;人凋亡生精細胞、脹亡生精細胞和精子形態(tài)學(xué)研究[A];第四屆全國臨床檢驗學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

2 趙廣明;;人凋亡生精細胞、脹亡生精細胞和精子形態(tài)學(xué)研究[A];第五次全國中青年檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

3 杜一;張燕君;曹慧仁;田青云;彭正華;孔維華;;熱激對小鼠生精細胞中前列腺素E合成酶表達的影響[A];中國生理學(xué)會2007年消化內(nèi)分泌生殖學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2007年

4 李學(xué)家;張秀娟;陳子亮;季芳;彭白露;劉曉明;;性成熟前食蟹猴生精細胞的發(fā)育進程[A];第九屆中國實驗動物科學(xué)年會（2010新疆）論文集[C];2010年

5 王懷秀;李弘;袁彩霞;曹瑩麗;秦琴;;人類生精細胞在培養(yǎng)過程中的分化與變形[A];中華醫(yī)學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)分會人類精子庫管理學(xué)組第三屆年會全國男性生殖醫(yī)學(xué)和精子庫管理新進展第四次研討會論文匯編[C];2012年

6 張燕君;李學(xué)坤;解艷艷;劉增英;孔維華;;熱激通過泛素-蛋白酶體途徑導(dǎo)致小鼠生精細胞中Cdc2含量降低[A];中國生理學(xué)會消化內(nèi)分泌生殖代謝生理專業(yè)委員會2011年消化內(nèi)分泌生殖學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2011年

7 楊筱珍;陳耀星;王子旭;;己烯雌酚影響成年倉鼠睪丸一氧化氮生成及其與生精細胞凋亡關(guān)系的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2004學(xué)術(shù)年會暨第五屆全國畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2004年

8 劉輝;;牦牛及其種間雜交后代生精細胞的凋亡[A];新世紀 新機遇 新挑戰(zhàn)——知識創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（上冊）[C];2001年

9 陳敏;劉以訓(xùn);;熱浴對猴支持細胞骨架與連接分子的影響[A];第一屆中華醫(yī)學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)分會、中國動物學(xué)會生殖生物學(xué)分會聯(lián)合年會論文匯編[C];2007年

10 薛蕾;陳浩宇;王水明;吳惠;孫成峰;常公民;王少霞;董波;彭瑞云;;微波輻射對大鼠生精細胞的影響研究[A];第八屆全國生物醫(yī)學(xué)體視學(xué)學(xué)術(shù)會議、第十一屆全軍軍事病理學(xué)學(xué)術(shù)會議、第七屆全軍定量病理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文（摘要）匯編[C];2012年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 徐蕾蕊;氟絡(luò)草酮睪丸毒牲及其機制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 王濤;TLR3在小鼠生精細胞中的表達及功能[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

3 俞作仁;小鼠精子發(fā)生不同階段生精細胞基因表達譜的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

4 楊筱珍;己烯雌酚對成年倉鼠精子發(fā)生的影響及其作用機理的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

5 陳巧媛;小鼠雄性生殖細胞的天然免疫防御機制[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

6 張曉艷;Toll樣受體在小鼠受損生精細胞誘導(dǎo)睪丸炎癥反應(yīng)中的功能[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

7 徐健;小鼠睪丸生殖細胞凋亡及相關(guān)基因調(diào)控的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1999年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫靜波;不同培養(yǎng)方法和細胞因子對小鼠生精細胞的增殖分化效應(yīng)[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

2 譚俊玲;小鼠生精細胞與支持細胞自噬與自噬誘因的初步研究[D];山東大學(xué);2013年

3 張春紅;鎘致體外培養(yǎng)雞支持—生精細胞凋亡機理的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

4 李桂玲;槲皮素對己烯雌酚致倉鼠生精損害的緩解作用[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

5 朱勤;兩種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對小鼠生精細胞T型Ca~(2+)通道的作用研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

6 楊西平;熱激導(dǎo)致小鼠生精細胞中MPF變化的動態(tài)過程[D];山東大學(xué);2006年

7 華葉;小鼠生精細胞的分離純化與鑒定[D];華東理工大學(xué);2011年

8 夏長河;丙烯酰胺對大鼠生精細胞XRCC1蛋白表達與凋亡的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

9 陸亮;小鼠生精細胞T型Ca~（2+）通道和ENaC的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2008年

10 高小燕;仔豬生精細胞體外培養(yǎng)、增殖及分化研究[D];西南大學(xué);2007年

，

本文編號：1096350