發(fā)布時(shí)間：2017-10-20 22:36

  本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌Esx-1底物蛋白Rv3615c的原核表達(dá)及其免疫功能研究

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【摘要】：目的:構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌(M.tb)Esx-1底物蛋白Rv3615c的原核表達(dá)質(zhì)粒p ET30b-Rv3615c并在大腸桿菌BL21(DE3)中進(jìn)行原核表達(dá);以全血IFN-γ分析試驗(yàn)(WBIA)檢測rRv3615c蛋白能否被淮南市M.tb感染者T細(xì)胞所識別;在小鼠模型中檢測其免疫原性。方法:以分子克隆技術(shù)構(gòu)建重組載體p ET30b-Rv3615c并表達(dá)、純化rRv3615c蛋白,以WBIA檢測rRv3615c抗原刺激淮南市M.tb感染者和未感染者外周血淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的特異性IFN-γ水平。此外聯(lián)合佐劑SAS免疫C57BL/6小鼠,評價(jià)其體液免疫應(yīng)答和Th1型應(yīng)答水平。結(jié)果:成功構(gòu)建p ET30b-Rv3615c質(zhì)粒,SDS-PAGE和Western blot顯示其正確表達(dá)和純化。rRv3615c蛋白特異性刺激淮南市M.tb感染者淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的IFN-γ濃度顯著高于健康對照者。Rv3615c/SAS誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生的IgG、IgG1、IgG2a以及Rv3615c1SAS誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞分泌的特異性IFN-γ、TNF-α和IL-2,均顯著高于PBS組和SAS組,顯示rRv3615c可誘導(dǎo)趨向于Th1型免疫應(yīng)答。結(jié)論:Rv3615c可被淮南市M.tb感染者T細(xì)胞識別,具有較強(qiáng)的免疫原性,是用于結(jié)核病(TB)預(yù)防和診斷的潛力靶抗原。
【作者單位】： 安徽理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： Rvc 原核表達(dá) 免疫功能 全血IFN-γ分析試驗(yàn) 結(jié)核分枝桿菌
【分類號】：R378.91+1
【正文快照】： 卡介苗(Bacille calmette-Guerin,BCG)作為當(dāng)前全球范圍內(nèi)唯一廣泛應(yīng)用于結(jié)核病(Tuberculosis,TB)預(yù)防的減毒活疫苗,盡管對嬰幼兒TB(尤其是結(jié)核性腦膜炎和粟粒性TB)預(yù)防效果較好,但卻受制于免疫保護(hù)期較短、對成人TB保護(hù)性不夠理想的缺陷[1,2]。因此,篩選具有高度免疫原性的、

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2 丁夢蝶;魯?shù)?王紅寧;田浪;陽泰;張毅;樊汶樵;郭自成;;禽傳染性支氣管炎病毒多基因串聯(lián)表位抗原的原核表達(dá)研究[A];四川省動(dòng)物學(xué)會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨第十屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

3 林海波;張桂紅;詹國英;廖明;任濤;羅開健;曹偉勝;徐成剛;辛朝安;;豬白細(xì)胞介素-6基因的非融合原核表達(dá)研究[A];第一屆中國養(yǎng)豬生產(chǎn)和疾病控制技術(shù)大會(huì)——2005中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2005年

4 隋桂琴;左玲;王桂云;;人堿性成纖維細(xì)胞生長因子的原核表達(dá)[A];中國眼底病論壇·全國眼底病專題學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

5 黃斯勇;梁英民;韓驊;李國輝;伍艷蘭;康志杰;何飛;張萍;徐恒;劉利;;人Detla-like4ext-93-217原核表達(dá)、純化及蛋白活性檢測[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

6 張紅;劉志國;屈伸;;人源受體相關(guān)蛋白的原核表達(dá)優(yōu)化及功能檢測[A];湖北省暨武漢生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)和第十五次學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2004年

7 袁志棟;王志亮;劉雨田;吳曉東;劉海生;;水貂朊蛋白前體基因的克隆與原核表達(dá)[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第六次研討會(huì)論文集[C];2005年

8 王士友;張耀洲;;一個(gè)新的家蠶基因的克隆、原核表達(dá)及純化[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2006年

9 伍艷蘭;黃斯勇;牛曉麗;張麗;陳茹菲;何飛;張萍;梁英民;劉利;;人Delta-like4ext-93-217原核表達(dá)、純化及蛋白活性檢測[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

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1 張曉鳴;人IL-16的原核表達(dá)與其功能的初步研究[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2000年

2 曹秀利;楊樹PtCDD基因的原核表達(dá)及酶活分析[D];南京林業(yè)大學(xué);2008年

3 黃新河;小鼠TAp63γ的原核表達(dá)、純化、結(jié)構(gòu)及功能初步研究[D];四川大學(xué);2007年

4 張大鵬;VP60蛋白的原核表達(dá)、抗體制備及VP60基因轉(zhuǎn)化的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

5 張少斌;豌豆肌動(dòng)蛋白異型體（PEAc1）的原核表達(dá)及其藻熒光探針的研制[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

6 尹國華;利用Red重組系統(tǒng)構(gòu)建dsRNA原核表達(dá)體系抗煙草花葉病毒的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

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8 于揚(yáng);重組人源GPx4及其模擬物的原核表達(dá)、結(jié)構(gòu)與功能的研究[D];吉林大學(xué);2013年

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1 周鵬;結(jié)核分枝桿菌特異性蛋白的原核表達(dá)、純化及免疫原性分析[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

2 高小磊;六種結(jié)核分枝桿菌特異性抗原的原核表達(dá)及16 KD-38 KD和Ag85A血清學(xué)診斷效果的研究[D];蘭州大學(xué);2015年

3 彭傳林;家蠅抗真菌肽MAF-1原核表達(dá)體系優(yōu)化與活性分析[D];貴陽醫(yī)學(xué)院;2015年

4 鐘樹懷;豬囊尾蚴膜聯(lián)蛋白的原核表達(dá)及其免疫反應(yīng)性分析[D];貴陽醫(yī)學(xué)院;2015年

5 孫明潭;豬繁殖與呼吸綜合征病毒河北地方株ORF7基因的原核表達(dá)及ELISA方法的建立[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

6 張良斌;天祝白牦牛KAP家族基因克隆、原核表達(dá)及其在皮膚中的表達(dá)分析[D];西北民族大學(xué);2015年

7 達(dá)小強(qiáng);牦牛轉(zhuǎn)鐵蛋白基因克隆與原核表達(dá)[D];西北民族大學(xué);2015年

8 高翠娥;飛蝗2個(gè)CYP450轉(zhuǎn)基因果蠅品系對殺蟲劑的敏感性及原核表達(dá)[D];山西大學(xué);2015年

9 吳雨航;布氏桿菌病間接ELISA方法的建立及吉林省梅花鹿主要養(yǎng)殖地區(qū)鹿布病血清學(xué)調(diào)查[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

10 姜旭;百合無癥病毒16kDα基因的克隆、原核表達(dá)及亞細(xì)胞定位[D];大連理工大學(xué);2015年

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本文編號：1069794