本文關(guān)鍵詞：表皮干細胞向汗腺細胞分化的表型改變及其通路機制研究

  更多相關(guān)文章： 皮膚 表皮干細胞 汗腺細胞 細胞分化 表型 信號通路

【摘要】：目的探討表皮干細胞(epidermal stem cells,ESCs)誘導分化為汗腺細胞(sweat gland cells,SGCs)過程中表型的改變及其通路的調(diào)控機制。方法取健康成人包皮,采用中性蛋白酶消化后高濃度Ⅳ型膠原黏附法分離培養(yǎng)獲得ESCs,行β_1整合素、角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)及p63免疫熒光染色法鑒定;取健康成人全層皮膚,采用Ⅱ型膠原酶消化法分離提取汗腺組織,體外增殖培養(yǎng)SGCs,行CK7、CK18、CK19和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)免疫熒光法鑒定。取第2代ESCs分為4組:A組將ESCs及SGCs兩種細胞通過Ttranswell共培養(yǎng)系統(tǒng)共培養(yǎng),B組通過單純添加汗腺上清液培養(yǎng)ESCs,C組在A組基礎(chǔ)上加入濃度為60 ng/mL的EGF,D組在A組基礎(chǔ)上加入濃度為10 mmol/L的PD98059。分別通過倒置相差顯微鏡進行細胞形態(tài)學觀察、流式細胞術(shù)檢測ESCs表型陽性率及Western blot檢測分化過程中的信號通路機制。結(jié)果經(jīng)細胞形態(tài)學觀察及免疫熒光染色鑒定提示培養(yǎng)細胞為ESCs和SGCs。倒置相差顯微鏡觀察示,A、C、D組培養(yǎng)后細胞形態(tài)變化相似,9 d后細胞開始出現(xiàn)扁平多角形結(jié)構(gòu)改變;B組形態(tài)變化較慢培養(yǎng)12 d后與其他3組結(jié)構(gòu)相似。流式細胞術(shù)結(jié)果示,與B組比較,A組Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)共培養(yǎng)后,ESCs的β_1整合素陽性率顯著下調(diào)、CEA陽性率顯著上調(diào)(P0.05);C組加入EGF可降低共培養(yǎng)系統(tǒng)中ESCs的β_1整合素下調(diào)和CEA上調(diào),D組加入PD98059可增強共培養(yǎng)系統(tǒng)中ESCs的β_1整合素下調(diào)和CEA上調(diào),A、C、D組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。Western blot檢測示,4組均有較高水平細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)表達,但B組明顯低于其他3組(P0.05);磷酸化-ERK表達A組最高、C組最低,各組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論處于SGCs生長環(huán)境中時,通過Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)共培養(yǎng),ESCs可經(jīng)誘導分化為SGCs,其表型發(fā)生相應改變;通過對絲裂原活化蛋白激酶/ERK通路的控制,可以調(diào)節(jié)ESCs的分化方向和程度。
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院燒傷整形科;
【關(guān)鍵詞】： 皮膚 表皮干細胞 汗腺細胞 細胞分化 表型 信號通路
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 大面積深度燒傷創(chuàng)面愈合后汗腺缺失導致的體溫調(diào)節(jié)障礙,是亟待解決的嚴重影響患者生存質(zhì)量的問題。近年來干細胞與再生醫(yī)學領(lǐng)域研究的飛速發(fā)展,使得汗腺重建成為可能[1-2]。表皮干細胞(epi-dermal stem cells,ESCs)作為皮膚的特異性干細胞,具有包括向汗腺細胞(sweat gland cel

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李海紅;付小兵;歐陽云淑;周崗;陳偉;孫同柱;;人骨髓間充質(zhì)干細胞表型轉(zhuǎn)化為汗腺細胞的體外研究[J];中華創(chuàng)傷雜志;2006年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 歐陽云淑;賈赤宇;戚可名;付小兵;;與人汗腺細胞共培養(yǎng)的人骨髓間充質(zhì)干細胞表型轉(zhuǎn)化及相關(guān)機制的初步研究[A];第四屆全國燒傷救治專題研討會燒傷感染救治新進展論文匯編[C];2006年

2 賈赤宇;歐陽云淑;付小兵;;與人汗腺細胞共培養(yǎng)的人骨髓間充質(zhì)干細胞表型轉(zhuǎn)化及相關(guān)機制的初步研究[A];中華醫(yī)學會燒傷外科學分會2009年學術(shù)年會論文匯編[C];2009年

3 李海紅;付小兵;周崗;白曉東;陳偉;蔡存良;孫同柱;;人骨髓間充質(zhì)干細胞與汗腺細胞共同培養(yǎng)誘導細胞表型轉(zhuǎn)化的初步研究[A];2005'中國修復重建外科論壇論文匯編[C];2005年

4 賈赤宇;歐陽云淑;付小兵;柴家科;;與人汗腺細胞共培養(yǎng)的人骨髓間充質(zhì)干細胞表型轉(zhuǎn)化及相關(guān)機制的初步研究[A];第八屆全國燒傷外科學年會論文匯編[C];2007年

5 雷永紅;付小兵;盛志勇;孫同柱;周學萍;;人皮膚汗腺細胞提取液誘導hMSCs定向分化的研究[A];第七屆全國創(chuàng)傷學術(shù)會議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學論壇論文匯編[C];2009年

6 歐陽云淑;賈赤宇;戚可名;付小兵;;與人汗腺細胞共培養(yǎng)的人骨髓間充質(zhì)干細胞表型轉(zhuǎn)化中ERK通路的作用研究[A];第四屆全國燒傷救治專題研討會燒傷感染救治新進展論文匯編[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 記者 江卉;人造汗腺研究成功[N];湖北日報;2008年

2 張獻懷;體外培養(yǎng)汗腺細胞有發(fā)汗功能[N];健康報;2009年

3 張獻懷;我國醫(yī)學家體外培養(yǎng)汗腺破解燒傷愈后排汗難題[N];中國醫(yī)藥報;2009年

4 張獻懷;我國大面積燒傷患者有望用上人造汗腺[N];中國醫(yī)藥報;2008年

5 張獻懷;大面積燒傷救治獲新突破[N];大眾科技報;2008年

6 張獻懷;我國大面積燒傷救治取得新突破[N];科技日報;2008年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 蔡颯;非外源性基因干擾誘導表皮細胞去分化及再生汗腺的臨床研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2008年

2 杜泉;AQP5在手汗癥合并腋窩多汗患者腋窩汗腺的表達定位及人汗腺細胞體外模型的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 郝文杰;表皮細胞生長因子對人臍帶間充質(zhì)干細胞向汗腺細胞轉(zhuǎn)化的影響[D];河北醫(yī)科大學;2010年

2 劉坤坤;間充質(zhì)干細胞與汗腺細胞融合實現(xiàn)汗腺再生的研究[D];河北醫(yī)科大學;2014年

3 趙志嬌;人臍帶間充質(zhì)干細胞向汗腺細胞誘導分化及向裸鼠移植的研究[D];河北醫(yī)科大學;2013年

，

本文編號：1052169