發(fā)布時(shí)間：2017-10-18 00:19

  本文關(guān)鍵詞：不同亞型流感病毒NS1蛋白的細(xì)胞定位差異分析

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【摘要】：NS1蛋白是流感病毒編碼的一種小分子多功能蛋白,可在病毒的復(fù)制過(guò)程中抑制宿主細(xì)胞的抗病毒免疫應(yīng)答。為研究不同亞型流感病毒的NS1蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位差異,分別用H1N1亞型WSN、PR8和CA04毒株,H9N2亞型SD毒株及H7N9亞型AH01毒株感染A549、MDCK細(xì)胞系以及構(gòu)建的可表達(dá)不同亞型流感病毒NS1蛋白的p CMV-Myc-NS1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,用激光共聚焦顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)不同亞型流感病毒在不同細(xì)胞系和時(shí)間點(diǎn)的定位差異,感染后24 h時(shí)WSN和PR8毒株的NS1主要定位于細(xì)胞質(zhì)中,而CA04和SD毒株主要定位于細(xì)胞核內(nèi)。另外,觀察過(guò)表達(dá)的WSN、SD和AH01毒株NS1的細(xì)胞定位,轉(zhuǎn)染后24 h時(shí)WSN毒株NS1定位于細(xì)胞質(zhì)中,而SD和AH01毒株主要定位于細(xì)胞核中。經(jīng)氨基酸序列比對(duì),對(duì)WSN毒株NS1蛋白進(jìn)行關(guān)鍵氨基酸點(diǎn)突變,結(jié)果顯示單一位點(diǎn)的改變未導(dǎo)致NS1蛋白細(xì)胞定位的改變,其細(xì)胞定位的差異不是由單一位點(diǎn)決定的。綜上所述,分析不同亞型中的NS1的定位差異,這對(duì)進(jìn)一步了解NS1蛋白同宿主細(xì)胞不同區(qū)域的蛋白的相互作用、流感病毒的調(diào)節(jié)機(jī)制以及病毒感染細(xì)胞中天然免疫反應(yīng)具有一定的指導(dǎo)意義。
【作者單位】： 中國(guó)科學(xué)院微生物研究所病原微生物與免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)科學(xué)院大學(xué);安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 流感病毒 NS蛋白 細(xì)胞定位 氨基酸位點(diǎn)突變
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(Nos.31100644,81271849,81321063)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：R373
【正文快照】： 流感病毒屬于正黏病毒科,其中A型流感病毒基因組由8節(jié)段的負(fù)鏈單股RNA組成,編碼17種蛋白。該病毒的感染能夠引起多種宿主因子發(fā)生變化,從而引起宿主細(xì)胞的各種生理生化反應(yīng),如炎癥反應(yīng)、細(xì)胞形態(tài)變化以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制或激活等[1],最近流行的H7N9和H5N6亞型流感,均由A型流

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1051865