發(fā)布時(shí)間：2017-10-14 16:00

  本文關(guān)鍵詞：弓形蟲TaqMan-MGB熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立

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【摘要】：為建立一種快速、敏感的弓形蟲檢測(cè)方法,本研究根據(jù)弓形蟲GRA7基因保守序列設(shè)計(jì)特異性檢測(cè)引物和TaqMan-MGB探針,建立了弓形蟲熒光定量PCR檢測(cè)方法。結(jié)果顯示,該方法能特異地檢測(cè)弓形蟲DNA,而對(duì)新孢子蟲、牛巴貝斯、馬駑巴貝斯等蟲DNA的檢測(cè)均為陰性,具有良好的特異性;經(jīng)3D數(shù)字PCR判定,其最低檢測(cè)限為4.58拷貝/μL,靈敏度是常規(guī)PCR的1 000倍;重復(fù)性試驗(yàn)的組內(nèi)、組間變異系數(shù)均小于5%;對(duì)62份疑似弓形蟲感染流產(chǎn)的胎牛腦組織DNA進(jìn)行檢測(cè),熒光定量PCR陽性檢出率為24.19%(15/62),常規(guī)PCR為19.35%(12/62),陽性樣品均包含于熒光定量PCR陽性樣品中。本研究建立的熒光定量PCR檢測(cè)方法可用于弓形蟲病的早期診斷和日常監(jiān)測(cè),為監(jiān)控弓形蟲"帶蟲宿主"提供了良好的技術(shù)支持。
【作者單位】： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;伊犁出入境檢驗(yàn)檢疫局綜合技術(shù)服務(wù)中心;重慶澳龍生物制品有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲 熒光定量PCR TaqMan-MGB探針 D數(shù)字PCR
【基金】：新疆維吾爾自治區(qū)科技成果轉(zhuǎn)化專項(xiàng)項(xiàng)目(201454129) 庫爾勒市重點(diǎn)科技計(jì)劃項(xiàng)目(2013051108)
【分類號(hào)】：R382.5
【正文快照】： 弓形蟲病(Toxoplasmosis)是由剛地弓形蟲CCATACCAACAGCC-3'和MGB探針TG-P:5'-FAM-(Toxoplasma gondii)引起的一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生性原CATCTACGAGGAGCACAC-MGB-3',擴(kuò)增產(chǎn)物預(yù)期蟲病,人和多種恒溫動(dòng)物均易感,是呈世界性流行大小為133 bp。引物和探針均由北京鼎國(guó)昌盛生物的人畜共

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王建成;什么是弓形蟲和弓形蟲病?[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2003年05期

2 袁吉云,張奎,楊汝杰,張蔚;蘇州地區(qū)弓形蟲病的初步調(diào)查(摘要)[J];蘇州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1982年01期

3 張秀平;;弓形蟲病化學(xué)治療的研究[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊(cè));1984年03期

4 王長(zhǎng)烈;在淋巴結(jié)炎患者中查出弓形蟲病[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊(cè));1987年03期

5 孫德建;;布隆迪弓形蟲病血清流行病學(xué)調(diào)查[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊(cè));1989年03期

6 邵其峰;趙玉強(qiáng);;全國(guó)弓形蟲病防治科研會(huì)議簡(jiǎn)訊[J];中國(guó)寄生蟲病防治雜志;1990年04期

7 甘紹伯,李爽;弓形蟲病100例分析[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1991年05期

8 崔君兆,馬重麟,陸宙光,于恩庶;診治11例弓形蟲病的經(jīng)驗(yàn)和診斷標(biāo)準(zhǔn)的探討[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1991年05期

9 薛純良;弓形蟲病的現(xiàn)代治療[J];寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;1991年02期

10 陳珊;眼弓形蟲病14例臨床分析[J];實(shí)用眼科雜志;1991年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱引潔;吳文學(xué);賀國(guó)強(qiáng);;弓形蟲病的診斷現(xiàn)狀[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜寄生蟲學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2006年

2 李輝;張健;;一例犬弓形蟲病的診斷與治療[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)小動(dòng)物醫(yī)學(xué)分會(huì)第四次學(xué)術(shù)研討會(huì)、中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)外科學(xué)分會(huì)第十六次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（2）[C];2009年

3 李祥瑞;;弓形蟲病的流行的新趨勢(shì)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)食品衛(wèi)生學(xué)分會(huì)第十一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

4 崔平;秦建華;方素芳;;河北省動(dòng)物弓形蟲病流行病學(xué)調(diào)查[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜寄生蟲學(xué)分會(huì)第五次代表大會(huì)暨第八次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

5 藺智兵;張厚雙;曹杰;周勇志;李國(guó)清;周金林;;弓形蟲real-time PCR檢測(cè)方法的建立和初步應(yīng)用[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜寄生蟲學(xué)分會(huì)第六次代表大會(huì)暨第十一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

6 楊娜;穆名楊;李紅魁;何建斌;;中國(guó)東北地區(qū)雞源弓形蟲的流行病學(xué)調(diào)查[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)分會(huì)第十六次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

7 劉晶;蔡進(jìn)忠;于晉海;夏兆飛;林德貴;劉群;;幾種動(dòng)物弓形蟲病血清流行病學(xué)的初步調(diào)查[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜寄生蟲學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2006年

8 王權(quán);蔣蔚;荊振宇;陳永軍;楊康;宋寧寧;崔常勇;;五種中藥體外抗弓形蟲抑制效果的研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜寄生蟲學(xué)分會(huì)第六次代表大會(huì)暨第十一次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

9 鞏薇;衛(wèi)禮;王吉;賀爭(zhēng)鳴;邢瑞昌;;實(shí)驗(yàn)小鼠弓形蟲檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[A];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2004年

10 陳西岐;劉秀蘭;張克功;于德順;;貓弓形蟲病的診治[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜寄生蟲學(xué)分會(huì)第五次代表大會(huì)暨第八次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林曉麗;養(yǎng)貓者易感染弓形蟲應(yīng)謹(jǐn)防患精神分裂癥[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2007年

2 小郭;弓形蟲病危害不輕[N];中國(guó)商報(bào);2000年

3 戴培紅;北京友誼醫(yī)院探索治療弓形蟲病的新途徑[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

4 本報(bào)記者 蔡玉冰 通訊員 黃賢君;弓形蟲沒你想的可怕[N];廣東科技報(bào);2012年

5 李水源;當(dāng)前豬場(chǎng)弓形蟲病的防控[N];中國(guó)畜牧獸醫(yī)報(bào);2013年

6 本報(bào)記者 白軼南;弓形蟲病 危及胎兒健康[N];保健時(shí)報(bào);2005年

7 臨城縣畜牧局 李路民;豬得弓形蟲病 吃了貓的虧[N];河北科技報(bào);2002年

8 北京友誼醫(yī)院北京熱帶醫(yī)學(xué)研究所研究員 甘紹伯 副主任醫(yī)師 馮曼玲;弓形蟲——寵物的“寵物”[N];健康報(bào);2000年

9 連孝華;孕婦玩貓狗易危害胎兒[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2007年

10 王志海 邵芹;犬弓形蟲病[N];中國(guó)畜牧報(bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 呂剛;弓形蟲表面抗原蛋白5的結(jié)構(gòu)分析及免疫學(xué)研究[D];山東大學(xué);2015年

2 龔國(guó)華;上海城區(qū)犬、貓弓形蟲病流行病學(xué)調(diào)查及藥物治療的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 尹青;弓形蟲Δbag1Δku80株的構(gòu)建及其作為貓弓形蟲病疫苗候選株的免疫原性、安全性和效力的評(píng)價(jià)[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 徐鵬;弓形蟲新毒力基因TgMAPK1表達(dá)特性及其初步功能研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

5 張步彩;泰州地區(qū)豬弓形蟲血清流行病學(xué)調(diào)查及中藥治療急性感染弓形蟲小鼠效果的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

6 陳金鈴;CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞失能參與弓形蟲分泌排泄抗原致小鼠早孕流產(chǎn)的機(jī)制[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

7 楊鳴發(fā);弓形蟲RH株脯氨酰氨氨基肽酶特征與功能性研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

8 吳亮;弓形蟲“遲發(fā)型死亡”機(jī)制的研究[D];江蘇大學(xué);2012年

9 張東林;弓形蟲病分子診斷方法及弓形蟲分離株耐藥性的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

10 司進(jìn);弓形蟲病免疫診斷及靶向生物治療的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊曉宇;重組弓形蟲TRXL蛋白和EN02蛋白免疫保護(hù)力的評(píng)價(jià)[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 蔣宗儒;弓形蟲ROP18激酶抑制宿主NF-κB信號(hào)通路的分子機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

3 趙玲瀟;基于泛素-弓形蟲多價(jià)抗原的重組疫苗對(duì)小鼠的免疫保護(hù)性研究[D];山東大學(xué);2015年

4 王帥;弓形蟲超氧化物歧化酶（SOD）基因分析和克隆表達(dá)[D];山東大學(xué);2015年

5 冷麗;云南大理HIV陽性者感染弓形蟲SAG1、c22-8基因位點(diǎn)的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

6 李筱鑫;弓形蟲酪蛋白激酶CK1β基因缺失株構(gòu)建[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

7 蔡玉峰;貓弓形蟲抗體ELISA檢測(cè)方法的建立與評(píng)價(jià)[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

8 閆曉月;弓形蟲棒狀體蛋白R(shí)OP7的生物信息學(xué)分析、原核表達(dá)及組織學(xué)定位[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

9 李芬香;弓形蟲TgPRMT5基因的克隆鑒定，細(xì)胞定位及功能初步分析[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

10 趙東岳;弓形蟲B1等基因Real-time PCR與截短SAG2基因克隆、表達(dá)及ELISA建立[D];福建農(nóng)林大學(xué);2013年

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