本文關(guān)鍵詞：弓形蟲TaqMan-MGB熒光定量PCR檢測方法的建立

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【摘要】：為建立一種快速、敏感的弓形蟲檢測方法,本研究根據(jù)弓形蟲GRA7基因保守序列設(shè)計特異性檢測引物和TaqMan-MGB探針,建立了弓形蟲熒光定量PCR檢測方法。結(jié)果顯示,該方法能特異地檢測弓形蟲DNA,而對新孢子蟲、牛巴貝斯、馬駑巴貝斯等蟲DNA的檢測均為陰性,具有良好的特異性;經(jīng)3D數(shù)字PCR判定,其最低檢測限為4.58拷貝/μL,靈敏度是常規(guī)PCR的1 000倍;重復(fù)性試驗的組內(nèi)、組間變異系數(shù)均小于5%;對62份疑似弓形蟲感染流產(chǎn)的胎牛腦組織DNA進行檢測,熒光定量PCR陽性檢出率為24.19%(15/62),常規(guī)PCR為19.35%(12/62),陽性樣品均包含于熒光定量PCR陽性樣品中。本研究建立的熒光定量PCR檢測方法可用于弓形蟲病的早期診斷和日常監(jiān)測,為監(jiān)控弓形蟲"帶蟲宿主"提供了良好的技術(shù)支持。
【作者單位】： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;伊犁出入境檢驗檢疫局綜合技術(shù)服務(wù)中心;重慶澳龍生物制品有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲 熒光定量PCR TaqMan-MGB探針 D數(shù)字PCR
【基金】：新疆維吾爾自治區(qū)科技成果轉(zhuǎn)化專項項目(201454129) 庫爾勒市重點科技計劃項目(2013051108)
【分類號】：R382.5
【正文快照】： 弓形蟲病(Toxoplasmosis)是由剛地弓形蟲CCATACCAACAGCC-3'和MGB探針TG-P:5'-FAM-(Toxoplasma gondii)引起的一種專性細胞內(nèi)寄生性原CATCTACGAGGAGCACAC-MGB-3',擴增產(chǎn)物預(yù)期蟲病,人和多種恒溫動物均易感,是呈世界性流行大小為133 bp。引物和探針均由北京鼎國昌盛生物的人畜共

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本文編號：1031929