前言

針對EOA目前的治療方法主要包括經(jīng)皮附睪穿刺取精，實行體外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)及單精子卵泡衆(zhòng)內(nèi)顯微注射技術（intracytoplasmic sperm injection, ICSI)或?qū)嵭休斁芨讲G管吻合術(vasoepididymostomy,VE),以重建生殖管道的通暢。1992年世界首例ICSI/試管嬰兒誕生，自此徹底改變了男性不育癥的治療策略，成為治療多種不育癥的主要手段，是男性不育治療新的里程碑。ICSI技術使精卵細胞無需經(jīng)歷復雜的受精過程，，直接將精子注入卵細胞內(nèi)，形成受精胚胎.該技術對精子數(shù)量、活力、受精能力的要求極低，是治療包括梗阻性無精子癥以及部分非梗阻性無精子癥（non-obstructive azoospermia, NOA)在內(nèi)的男性因素所致配子傳遞障礙的有效手段。在試管嬰兒時代，男科醫(yī)生的外科治療在生殖領域是否正逐漸變得微不足道？答案顯然是否定的，近幾年的技術革命應該說是賦予了顯微外科輸精管附睪管吻合術新的生命--更易行的操作和顯著改善的效果，使它在針對梗阻性無精癥（obstructive azoospermia, OA)的治療上，成為首先選擇。并且研究顯示顯微外科輸精管附睪管吻合方法和IVF/ICSI方法相比：（1)患者可以通過自然受孕獲得后代，避免了可能的社會倫理、法律及社會爭議[5]等問題，減少了多胎產(chǎn)風險、遺傳及出生缺陷，（2)成本效益低，即每獲得一個后代的成本低（見下表）。(3) IVF/ICSI技術對女性生理的干擾大。
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材料和方法

1. 實驗動物
依據(jù)月齡、體重及精液分析結(jié)果（采取假陰道人工取精法并行精液分析，參考主要精液指標：精液量、精子密度、精子活力等），蹄選出38只健康5-6月齡加利福尼亞雄性大白兔(平均體重3.5-4.0kg)為實驗對象。另外挑選健康雌性5-6月齡加利福尼亞兔(平均體重3.5-4.0kg)3只作為誘導取精對象。本實驗所用動物均由昆明醫(yī)科大學實驗動物中心提供，動物合格證號：（SCXK滇2013-0006),分籠詞養(yǎng)于昆明醫(yī)科大學生物研究所小動物中心標準實驗房(22-irc),給予規(guī)律光照(12h:12h)，給予標準顆粒飼料自由進食及飲水。

2. 主要儀器和試劑
稀釋液：5%葡萄糖注射液、0.9%注射用生理鹽水上海百特醫(yī)療用品有限公司；
精子染色液：精子染色檢測試劑盒（Diff-Quik〉深圳華康生物醫(yī)學工程公司
青霉素鈉：河南新鄉(xiāng)華星藥廠0.48g(80萬單位）批號：國藥準字H410208I7
1%戊巴比妥鈉：昆明醫(yī)科大學動物實驗中心提供
亞甲藍：國藥準字H32024827江蘇濟川制藥有限公司0523-87606428
5%利多卡因：國藥準字：H37022147山東華魯制藥有限公司
醫(yī)用碘伏(500ml):衛(wèi)消字（2004)第0721號山東利爾康消毒科技有限公司
聚維酮碘(250m0:衛(wèi)消字（2002)第0038號上海中優(yōu)醫(yī)藥高科技有限公司

前言......7
材料和方法.... 11
結(jié)果............... 25
討論.......27 
結(jié)論.......36

討論

人類疾病的動物模型，是醫(yī)學科學研究中所建立的具有人類疾病模擬性動物實驗對象，使用動物模型是現(xiàn)代生物醫(yī)學研究中的一個極為重要的試驗方法和手段，通過對模型動物的研究，可以解決無法在人體內(nèi)直接進行實驗研究的難題。我們認為建立確切、安全可行的動物模型對于男性科醫(yī)生來講，有助于夯實基本功、提高顯微技能水平，從而為臨床縮短手術時間、確保手術質(zhì)量并且減少術后并發(fā)癥提供保障；對于患者及家庭來講，將有更大機會通過自然受孕方式解決不育問題，從而獲得家庭幸福感和性滿足感，減少身體創(chuàng)傷，減輕家庭經(jīng)濟負擔，并且可以避免后代身體缺陷以及不必要的社會倫理問題等。通過查閱文獻資料，我們發(fā)現(xiàn)對于顯微輸精管附睪管吻合術目前尚無具體的、行之有效的方法，更無確切的動物模型可循。通過研究我們發(fā)現(xiàn)家兔詞養(yǎng)簡單，成本較低；生殖系統(tǒng)生理解剖與人相近性高；手術操作模擬性高、簡單易行；術后檢測技術（家兔假陰道取精及精液分析技術）成熟，并且可以反復操作，因而被認為是該項培訓比較理想實驗對象。問題與展望：1.臨床對于施行附睪輸精管吻合術的患者，術后隨訪時間應>6個月[52]。而本實驗由于時間、費用限制以及無參考標準，術后我們只觀測了第2?4月的精液及精子結(jié)果，因此術后再通率結(jié)果統(tǒng)計可能會受到影響。2.盡管輸精管遠端梗阻也是V-E吻合的適應癥，但是臨床中附睪梗阻性無精癥發(fā)病率更高、手術過程更復雜，考慮到附睪梗阻性無精癥發(fā)病機制復雜，模型建立相當困難，所以本實驗梗阻性無精癥模型制作，我們采用的家兔近睪端輸精管結(jié)扎術建立起來的模型帶有一定的局限性。3.實驗中我們分析了影響術后復通率的相關因素，而實驗前后家兔睪丸、附睪功能變化尚不清楚，若能完善實驗前后家兔精裝生化分析及睪丸病理學檢査，家兔梗阻性無精癥病理進展及術后再通率的影響因素的分析將更為全面。4.本研究主要通過術后精液檢查以查到精子證實精道再通，標志著實驗成功，至于實驗前后家兔精子活力、密度、活率有差異，個人分析可能是由于吻合術后精道通暢度不及正常情況、術后只是單側(cè)再通或者合并存在漏精、睪丸及附睪功能受到影響等，具體原因有待進一步研究。
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結(jié)論

1.采取家兔陰囊腹側(cè)靠近底部縱行切口（約Icm)行“輸精管近睪端結(jié)扎術”建立家兔梗阻性無精癥模型，術中局部損傷小，術后并發(fā)癥少，恢復快，簡易、可行；以此建立起的模型比較貼近于臨床附睪尾部梗阻性無精癥的病理結(jié)果。
2月后行吻合手術時，肉眼可觀察到附睪體積增大，附睪管飽滿，顯微鏡下附睪管（約0.4-0.5mni)，輸精管、動靜脈等組織結(jié)構(gòu)顯示比較清晰，吻合手術操作相對容易且進行順利。本研究證實了課題設計的科學性--家兔睪丸、附睪較大，附睪管、輸精管較粗，具有與人相近性高、手術操作容易、可反復取精檢測等優(yōu)勢，是顯微吻合術很好的實驗模擬對象。2.通過對術后精液檢測結(jié)果分析，本試驗術后再通率為63.89%，確且證實了家兔顯微輸精管附睪管吻合實驗的可行性，并且具有微創(chuàng)、安全、容易操作的特點，可作為臨床男科手術醫(yī)生開展“顯微輸精管附睪管吻合術"前的一種很好的技能訓練方法和模型，而值得研究和推廣。另外，本次研究發(fā)現(xiàn)：術后與術前相比，家兔精液量無明顯差異，而精子活力、密度、活率有差異，而且本研究以術后檢測到精子為成功標志，對于上述差異在此不作深究。
3.通過此次顯微吻合的動物模擬實驗，我們更加鞏固和掌握了顯微外科輸精管吻合的思維流程和操作技巧；另外，實驗中我們切實體會到了顯微吻合手術是一項精細、長時間操作，需要術者有扎實的顯微外科基礎和足夠的耐心，而且術者的顯微技能水平對于手術的成敗起決定性作用。因此，作為男科手術醫(yī)生，平時我們應注重顯微思維的培養(yǎng)和顯微基本功的訓練，以便更好地服務臨床。
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參考文獻（略）