哈密大棗中β-D-葡萄糖苷酶活性測(cè)定條件的優(yōu)化
發(fā)布時(shí)間:2024-04-15 04:11
該試驗(yàn)旨在對(duì)哈密大棗中β-D-葡萄糖苷酶活性測(cè)定條件進(jìn)行研究。通過Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化β-D-葡萄糖苷酶活性的測(cè)定條件,并對(duì)哈密大棗在不同干制過程中β-D-葡萄糖苷酶活性的變化進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明:當(dāng)酶解時(shí)緩沖溶液的p H為5.3, PVP添加量為3%,酶解溫度為36℃,酶解時(shí)間為94 min,測(cè)定波長(zhǎng)為400 nm時(shí),酶活性最大,該條件適于哈密大棗中β-D-葡萄糖苷酶活性的測(cè)定。在確定測(cè)定條件的基礎(chǔ)上,對(duì)哈密大棗在不同干制方式及過程中的β-D-葡萄糖苷酶活性變化規(guī)律進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,在自然曬干條件下,β-D-葡萄糖苷酶活性在干制第2天上升到最高點(diǎn)(1 700.32 U),在第6天酶活性消失;在45℃熱風(fēng)干制過程中,β-D-葡萄糖苷酶在第8小時(shí)活性到達(dá)最高點(diǎn)(3 692.13 U),在第36小時(shí)酶活性消失。
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【部分圖文】:
本文編號(hào):3955717
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圖1對(duì)硝基苯酚波長(zhǎng)掃描
由圖1可知,對(duì)硝基苯酚在390~420nm可見光波長(zhǎng)范圍內(nèi)有特征吸收曲線,且在400nm處有最大吸收峰,因此確定400nm是對(duì)硝基苯酚的最適測(cè)定波長(zhǎng)。2.1.2對(duì)硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)曲線
圖2對(duì)硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)曲線
由圖2可知,標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.0172x+0.0074,相關(guān)系數(shù)R2=0.9991,對(duì)硝基苯酚與吸光度線性關(guān)系良好,符合測(cè)定要求。2.1.3PVP添加量對(duì)酶活性的影響
圖3PVP添加量對(duì)酶活性的影響
在2.1.3和2.1.4試驗(yàn)基礎(chǔ)上,對(duì)反應(yīng)過程中緩沖溶液的類型與pH進(jìn)行篩選。由圖5可知,乙酸-乙酸鈉在pH5.5時(shí)的酶活性明顯高于其他類型的緩沖溶液,檸檬酸-檸檬酸三鈉與檸檬酸-磷酸二鈉的酶活性較低。由此得出,選用乙酸-乙酸鈉在pH5.5時(shí)對(duì)哈密大棗中β-D-葡萄糖苷....
圖4不同溫度、時(shí)間對(duì)酶活性的影響
圖3PVP添加量對(duì)酶活性的影響圖5不同緩沖液類型和pH對(duì)酶活性的影響曲線
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