將植物乳桿菌D1501(Lactobacillus plantarum D1501)接種于黃漿水中,37 ℃靜置培養(yǎng)24h后制成酸漿。抑菌活性測(cè)定表明,該方法制備的酸漿對(duì)供試的革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌具有明顯的抗菌活性,對(duì)假絲酵母有弱的抑菌活性,但對(duì)釀酒酵母和2株霉菌沒(méi)有抑制作用。經(jīng)中和及酶解實(shí)驗(yàn)推測(cè)酸漿中的抑菌物質(zhì)為細(xì)菌素。將經(jīng)過(guò)30、10、3 kDa超濾分離得到的無(wú)細(xì)胞超濾液旋蒸濃縮定容后,采用RESOURCE-Q陰離子交換柱和300SB-C18反相層析柱依次純化,得到色譜純度細(xì)菌素物質(zhì),命名為L(zhǎng)p100。該細(xì)菌素經(jīng)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析,確定分子質(zhì)量約為1 434.90 Da,氨基酸序列為MCCKVLLLLSRR。最終細(xì)菌素比活力為7 247.00 IU/mg,純化倍數(shù)為79.94 倍,回收率為1%。

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【部分圖文】：

圖1未發(fā)酵黃漿水及D1501酸漿對(duì)指示菌的的抑制作用

將菌株D1501發(fā)酵黃漿水制備的酸漿中和離心，并用0.22?μm微孔濾膜過(guò)濾除菌，得到無(wú)細(xì)胞上清液（D1501酸漿），對(duì)其進(jìn)行抑菌活性檢測(cè)。圖1表明，D1501酸漿對(duì)指示菌大腸桿菌K-12和金黃色葡萄球菌ATCC6538有明顯抑菌活性，而未發(fā)酵黃漿水沒(méi)有檢測(cè)到明顯的抑菌作用，表明....

圖2RESOURCE-Q離子交換層析洗脫曲線

圖2為組分A(<3?kDa）經(jīng)RESOURCE-Q陰離子交換層析的洗脫曲線，組分1為穿透峰，組分2、3、4為各洗脫峰。將各組分凍干濃縮至10?mL分別測(cè)定蛋白含量和抑菌活性。結(jié)果顯示穿透峰無(wú)抑菌活性，洗脫峰表現(xiàn)出不同的抑菌活性（表5），而組分2抑菌活性最高，因此挑選組分2進(jìn)行....

圖3組分2的高效液相色譜圖

圖3為組分2經(jīng)C18柱反相層析的高效液相色譜分離圖，將各峰對(duì)應(yīng)的管8、9、10、11、14分開(kāi)收集，分別命名為組分a～e，將各組分濃縮至5?mL分別測(cè)定各組分的蛋白含量和抑菌活性。由表6可知，除組分e外均具有抑菌活性，而組分c抑菌活性最大，因此挑選組分c進(jìn)行下一步分離純化。2.....

圖4組分c的高效液相色譜圖

圖4為組分c經(jīng)C18柱二次反相層析的高效液相色譜分離圖，管6、7為組分I，管8為組分II，管9為組分III，管10為組分IV，管11～13為組分V，將各組分濃縮至1?mL，分別測(cè)定蛋白含量和抑菌活性。如表7所示，組分II、III、IV均具有抑菌活性，而組分II的抑菌活性最大，因....

本文編號(hào)：3911002