旨在分離純化枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)中能夠誘導(dǎo)細(xì)菌素Paracin1.7分泌的刺激因子,并探明其對(duì)副干酪乳桿菌(Lactobacillus paracasei) HD1.7細(xì)菌素生成量及群體感應(yīng)相關(guān)基因luxS表達(dá)的影響。本研究通過60%硫酸銨沉淀、CM Sepharose Fast Flow弱陽離子交換柱層析中度純化及Superdex 75凝膠層析精度純化,將獲得的層析分離物與L. paracasei HD1.7共培養(yǎng),檢測(cè)共培養(yǎng)發(fā)酵液的抑菌活性及l(fā)uxS基因的轉(zhuǎn)錄水平,并用SDS-PAGE與Native-PAGE檢測(cè)分離物質(zhì)。結(jié)果表明L. paracasei HD1.7抑菌活性為126.68%;luxS基因上調(diào)表達(dá),為對(duì)照菌株的2.43倍;刺激因子的表觀分子量約為30 kDa。本研究利用三步法初步分離純化出誘導(dǎo)Paracin1.7生成的刺激因子,明確該刺激因子可以啟動(dòng)種間群體感應(yīng)相關(guān)基因luxS,為L. paracasei HD1.7的群體感應(yīng)研究奠定了理論和技術(shù)基礎(chǔ)。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1.1 菌株與培養(yǎng)基
        1.1.1 試驗(yàn)菌株
        1.1.2 培養(yǎng)基
    1.2 方法
        1.2.1 B.subtilis刺激因子發(fā)酵液的制備
        1.2.2 B.subtilis刺激因子的分離純化
        1.2.3熒光定量PCR檢測(cè)QS相關(guān)基因luxS的轉(zhuǎn)錄水平變化
        1.2.4 SDS-PAGE與Native-聚丙烯酰胺凝膠電泳
        1.2.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 60%硫酸銨沉淀
    2.2 CM Sepharose Fast Flow離子交換層析
    2.3 Superdex 75凝膠層析
    2.4 刺激因子的純化得率
    2.5 SDS-PAGE檢測(cè)分離物質(zhì)表觀分子量與Native-PAGE檢測(cè)分離物質(zhì)及活性驗(yàn)證
    2.6 QS相關(guān)基因lux S表達(dá)效果的檢測(cè)
3 討論與結(jié)論



本文編號(hào)：3895286