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結(jié)合淀粉活性乳酸菌利用生淀粉產(chǎn)酶條件及代謝產(chǎn)物

發(fā)布時(shí)間:2022-12-22 00:55
  為研究具有特異性結(jié)合淀粉活性乳酸菌的淀粉代謝能力,以副干酪乳桿菌L1為對(duì)象,研究其產(chǎn)酶性質(zhì)及對(duì)生淀粉的利用能力,對(duì)產(chǎn)酶條件進(jìn)行優(yōu)化,利用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)定生淀粉酶分子質(zhì)量,高效液相色譜法測(cè)定碳水化合物和有機(jī)酸的產(chǎn)生及利用情況。結(jié)果表明,生淀粉酶存在于L1菌體細(xì)胞表面和上清液中,該酶對(duì)不同來(lái)源生淀粉均具有一定的水解能力,生淀粉對(duì)該酶具有誘導(dǎo)作用。在培養(yǎng)基初始p H 6.5、淀粉占碳源比例68%、碳源添加量2.03%條件下,表現(xiàn)出最高酶活力為(191.64±0.63)U/m L。碳水化合物水解產(chǎn)物麥芽低聚糖為中間產(chǎn)物,葡萄糖、麥芽糖為終產(chǎn)物;有機(jī)酸水解產(chǎn)物以乳酸為主要產(chǎn)物,檸檬酸為次級(jí)產(chǎn)物。本研究從代謝角度證實(shí)了L1結(jié)合生淀粉的同時(shí),具有利用生淀粉的能力,對(duì)乳酸菌在淀粉類基質(zhì)中的應(yīng)用有著重要意義。 

【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
        1.1.1 菌種
        1.1.2 試劑
        1.1.3 培養(yǎng)基
    1.2 儀器與設(shè)備
    1.3 方法
        1.3.1 菌種的活化
        1.3.2 L1產(chǎn)酶位置分析
        1.3.3 生淀粉酶活力測(cè)定
        1.3.4 產(chǎn)酶誘導(dǎo)性及穩(wěn)定性分析
        1.3.5 生淀粉酶的濃縮純化
        1.3.6 十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)及基于Native-PAGE的酶譜分析
        1.3.7 不同來(lái)源生淀粉對(duì)L1產(chǎn)酶活力分析
        1.3.8 副干酪乳桿菌L1產(chǎn)酶單因素試驗(yàn)
        1.3.9 乳酸菌產(chǎn)酶條件響應(yīng)面試驗(yàn)
        1.3.1 0 代謝產(chǎn)物分析
            1.3.1 0. 1 L1淀粉水解產(chǎn)物變化情況
            1.3.1 0. 2 L1水解淀粉過(guò)程中產(chǎn)酸情況
    1.4 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
    2.1 L1產(chǎn)酶位置分析
    2.2 L1產(chǎn)酶的誘導(dǎo)性
    2.3 SDS-PAGE及酶譜分析
    2.4 不同來(lái)源生淀粉對(duì)L1產(chǎn)酶的影響
    2.5 L1產(chǎn)酶條件優(yōu)化
        2.5.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果
        2.5.2 響應(yīng)面設(shè)計(jì)與結(jié)果
        2.5.3 模型方差分析及響應(yīng)面分析
        2.5.4 產(chǎn)酶最佳條件確定及驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
    2.6 L1利用淀粉代謝產(chǎn)物分析
        2.6.1 L1水解淀粉產(chǎn)物變化分析
        2.6.2 L1代謝淀粉產(chǎn)酸分析
3 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]乳酸菌發(fā)酵大豆糖蜜生產(chǎn)乳酸及糖代謝變化[J]. 江楊娟,徐麗,陳美思,周小敏,韓翠萍,王松.  食品科學(xué). 2018(06)
[2]對(duì)甘薯淀粉具有絮凝活性的乳酸菌的分離鑒定及其特性研究[J]. 張莉力,許云賀,李新華.  食品科學(xué). 2010(07)

碩士論文
[1]乳酸菌酸漿豆腐工藝優(yōu)化及凝固機(jī)理初探[D]. 葉青.錦州醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]不同來(lái)源淀粉的分子結(jié)構(gòu)對(duì)其酶解性能影響的研究[D]. 于軒.江南大學(xué) 2013



本文編號(hào):3723108

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