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超高效液相色譜-四極桿靜電場軌道離子阱質(zhì)譜分析沼蝦過敏原蛋白

發(fā)布時間:2022-11-06 15:16
  目的建立超高效液相色譜-四極桿靜電場軌道離子阱質(zhì)譜法,分析沼蝦中的過敏原蛋白。方法基于Bottomup(自下而上)蛋白分析策略,采用Tris-HCl提取羅氏沼蝦樣品中的目標蛋白,胰蛋白酶40℃消化6 h,肽段經(jīng)過色譜分離后采用四極桿靜電場軌道離子阱質(zhì)譜(Full MS/dd-MS~2監(jiān)測模式,TopN=10)測定,利用UniProt蛋白數(shù)據(jù)庫和Proteome Discoverer軟件鑒定過敏原蛋白。結(jié)果獲得4種過敏原蛋白,分別為原肌球蛋白、精氨酸激酶、肌漿鈣結(jié)合蛋白和血藍蛋白,肽段覆蓋率分別為53%、36%、12%和12%,翻譯后修飾的位點有天冬氨酸(D)的甲基化,天冬酰氨(N)和谷氨酰氨(Q)的脫酰氨化以及蛋氨酸(M)的氧化。結(jié)論超高效液相色譜-四極桿靜電場軌道離子阱質(zhì)譜能獲得豐富的肽段及碎片信息,靈敏度和分辨率較高,可用于蝦及蝦制品的過敏原蛋白鑒定和分析。 

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 樣品和試劑
    1.2 樣品前處理方法
    1.3 色譜和質(zhì)譜條件
    1.4 質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 酶解處理過程優(yōu)化
    2.2 主要過敏原蛋白及肽段鑒定
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3703731

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