目的建立超高效液相色譜-四極桿靜電場(chǎng)軌道離子阱質(zhì)譜法,分析沼蝦中的過敏原蛋白。方法基于Bottomup（自下而上）蛋白分析策略,采用Tris-HCl提取羅氏沼蝦樣品中的目標(biāo)蛋白,胰蛋白酶40℃消化6 h,肽段經(jīng)過色譜分離后采用四極桿靜電場(chǎng)軌道離子阱質(zhì)譜（Full MS/dd-MS~2監(jiān)測(cè)模式,TopN=10）測(cè)定,利用UniProt蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)和Proteome Discoverer軟件鑒定過敏原蛋白。結(jié)果獲得4種過敏原蛋白,分別為原肌球蛋白、精氨酸激酶、肌漿鈣結(jié)合蛋白和血藍(lán)蛋白,肽段覆蓋率分別為53%、36%、12%和12%,翻譯后修飾的位點(diǎn)有天冬氨酸（D）的甲基化,天冬酰氨（N）和谷氨酰氨（Q）的脫酰氨化以及蛋氨酸（M）的氧化。結(jié)論超高效液相色譜-四極桿靜電場(chǎng)軌道離子阱質(zhì)譜能獲得豐富的肽段及碎片信息,靈敏度和分辨率較高,可用于蝦及蝦制品的過敏原蛋白鑒定和分析。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 樣品和試劑
    1.2 樣品前處理方法
    1.3 色譜和質(zhì)譜條件
    1.4 質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 酶解處理過程優(yōu)化
    2.2 主要過敏原蛋白及肽段鑒定
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
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