采用熒光光譜、紫外光譜和傅里葉紅外光譜法研究不同溫度下槲皮素和異槲皮素對獼猴桃糖蛋白GP2的影響。確定了GP2與槲皮素和異槲皮素發(fā)生相互作用生成新的復(fù)合物,在300 K和310 K溫度下的熒光猝滅機制主要是靜態(tài)猝滅;結(jié)合常數(shù)分別為107.66 L/moL和63.07 L/moL,對應(yīng)的結(jié)合位點數(shù)為0.65和0.57;氫鍵和范德華力是二者之間主要的相互作用力;通過同步熒光光譜法研究確定了槲皮素和異槲皮素與獼猴桃糖蛋白GP2結(jié)合位點更接近色氨酸殘基;利用傅里葉紅外光譜和紫外光譜研究槲皮素和異槲皮素的加入對糖蛋白GP2構(gòu)象的變化。 

【文章來源】：糧食與油脂. 2020,33(12)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

不同溫度下GP2與槲皮素和異槲皮素相互作用的熒光猝滅光譜

熒光猝滅機制分為2種，不同熒光猝滅機制的反應(yīng)原理是不同的。由猝滅劑和熒光物質(zhì)反應(yīng)生成不發(fā)光的物質(zhì)從而影響熒光強度強弱的稱為靜態(tài)猝滅；而因為猝滅劑和熒光物質(zhì)之間發(fā)生碰撞引起的熒光強度的改變稱為動態(tài)猝滅（也稱碰撞猝滅）。根據(jù)Stem-Volmer公式得到的300 K和310 K下的Stem-Volmer曲線見圖2，對Stern-volmer曲線線性擬合得到結(jié)果表1。由圖2和表1可知：在300 K和310 K時，糖蛋白GP2與槲皮素和異槲皮素之間相互作用的曲線的相關(guān)性較好。不同溫度對熒光猝滅的影響有所不同，溫度升高，動態(tài)猝滅常數(shù)隨著分子之間發(fā)生碰撞的機會增加而變大。圖2中，溫度升高到310 K，槲皮素和異槲皮素與糖蛋白GP2相互作用時，動態(tài)猝滅常數(shù)反而減小，這說明多酚對GP2的熒光猝滅可能不是動態(tài)猝滅，而是槲皮素和異槲皮素與糖蛋白GP2混合體系中生成了復(fù)合物。對比動態(tài)猝滅中猝滅劑對熒光分子的最大碰撞猝滅常數(shù)與本試驗中的雙分子猝滅速率常數(shù)可知（2.0×1010 L/(mol·s)<1011 L/(mol·s)，推測槲皮素和異槲皮素與糖蛋白GP2相互作用的熒光猝滅機制是靜態(tài)猝滅。

根據(jù)公式（1），做出Log[(F0-F)/F]對log[Q]不同溫度下的雙倒數(shù)曲線，如圖3。其中，曲線的截距為Ka，斜率為n。由圖3和表2可得：在300 K和310 K時，糖蛋白GP2與槲皮素和異槲皮素相互作用的雙倒數(shù)曲線的線性方程相關(guān)系數(shù)R2分別為0.92(300 K）、0.88(310 K），表明線性良好。糖蛋白GP2與槲皮素和異槲皮素的結(jié)合位點數(shù)n約為1，表明多酚和糖蛋白GP2結(jié)合作用較強，且有一個結(jié)合位點形成。隨著溫度的升高，結(jié)合常數(shù)Ka均大幅度降低，說明溫度對糖蛋白GP2與槲皮素和異槲皮素相互作用生成的復(fù)合物的穩(wěn)定性有影響，確定該相互作用的猝滅機制為靜態(tài)猝滅。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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