發(fā)布時間：2021-08-09 09:42

　　酶解法是制備多肽的常用方法,對酶解工藝的控制很大程度上影響酶解的效果。文章采用具有專一性酶切位點的TPCK-胰蛋白酶酶解縊蟶鮮肉,在單因素試驗基礎(chǔ)上,通過正交試驗優(yōu)選TPCK-胰蛋白酶的酶解工藝條件,為充分利用縊蟶資源、有效發(fā)揮縊蟶的營養(yǎng)價值提供思路,為科研人員今后進(jìn)一步研究制備縊蟶多肽提供數(shù)據(jù)參考。 

【文章來源】：福建輕紡. 2020,(11)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

酶解時間對TPCK-胰蛋白酶酶解效果的影響

3.2.2 料液比對TPCK-胰蛋白酶酶解效果的影響稱取5 g新鮮去殼的縊蟶肉，用p H值為7.8的緩沖溶液作為反應(yīng)液，酶的添加量為2250 U/g，酶解溫度為37℃條件下，分別按料液比1∶1.0、1∶2.0、1∶3.0、1∶4.0、1∶5.0、1∶6.0酶解2.0 h，酶解結(jié)果如圖2所示。由圖2可知，料液比從1∶1.0擴(kuò)大至1∶6.0，多肽提取量呈先上升后下降的變化趨勢。當(dāng)料液比為1∶3.0時，多肽提取量達(dá)到單因素試驗的最高水平。當(dāng)料液比大于1∶3.0時，反應(yīng)體系中溶液的增多，減少了TPCK-胰蛋白酶與底物蛋白碰撞接觸的機(jī)會，導(dǎo)致多肽提取量下降。因此，料液比選取在1∶3.0左右。

稱取5g新鮮的去殼縊蟶肉，用p H值為7.8的緩沖溶液作為反應(yīng)液，酶解溫度為37℃，料液比為1∶3.0，酶添加量為4500、9000、13500、18000、22500 U/g條件下，分別酶解2.0 h，酶解結(jié)果如圖3所示。由圖3可知，在一定范圍內(nèi)，隨酶添加量的增加，多肽提取量也相應(yīng)增加。當(dāng)酶添加量為18000 U/g時，多肽提取量達(dá)到單因素試驗的最高水平。當(dāng)酶添加量大于18000 U/g時，多肽提取量反而開始降低。這可能是由于TPCK-胰蛋白酶將縊蟶蛋白反應(yīng)完全后，酶解液中還有適合酶切位點的肽段，TPCK-胰蛋白酶對這些肽段進(jìn)行酶解，使之降解成游離氨基酸，導(dǎo)致多肽提取量降低。綜上，TPCK-胰蛋白酶的酶添加量選擇為18000 U/g左右。3.2.4 TPCK-胰蛋白酶酶解工藝的正交試驗優(yōu)化結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3331834