柚汁胞木質(zhì)素解析與POD活性及同工酶譜分析
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更多相關(guān)文章: 柚 汁胞粒化 木質(zhì)素 HSQC NMR POD 同工酶譜
【摘要】:柚[Citrus maxima(Burm.)Merr.]汁胞;F(xiàn)象對(duì)其食用品質(zhì)和商品價(jià)值造成了嚴(yán)重影響,而其發(fā)生機(jī)制仍未得到解釋。前期研究發(fā)現(xiàn)木質(zhì)素代謝與汁胞;^(guò)程關(guān)系密切,因此本研究從該代謝途徑入手,對(duì)不同品種和組織中的木質(zhì)素進(jìn)行組分分析,并對(duì)與氧化木質(zhì)素前體相關(guān)的POD進(jìn)行酶活及同工酶譜分析,以期為后續(xù)汁胞粒化機(jī)制的研究提供更多有用的信息。我們首先建立了從柚組織中分離木質(zhì)素的方法,通過(guò)紫外掃描及HSQC NMR技術(shù)對(duì)來(lái)自不同組織和品種的乙;幚淼哪举|(zhì)素進(jìn)行分析。結(jié)果表明,p-0-4'連接方式在所有試驗(yàn)組織的木質(zhì)素中均是主要的連接方式,其次是與愈創(chuàng)木基結(jié)構(gòu)單元含量相關(guān)聯(lián)的β-5'連接方式,而β-β'連接方式只在紫丁香基含量較高的組織中檢測(cè)到。;举|(zhì)素中愈創(chuàng)木基結(jié)構(gòu)單元的含量極高(91.13-96.82%),與其他組織(葉片、莖及囊衣)的木質(zhì)素組分并不相同。這種特異性積累的木質(zhì)素不易降解,主要由松柏醇聚合形成。不同品種在木質(zhì)素組成上差異性不大,但是其愈創(chuàng)木基和紫丁香基含量比例卻有很大差異,說(shuō)明品種間;臋C(jī)制可能是相同的,而;膰(yán)重程度卻不同。為了對(duì)與松柏醇氧化相關(guān)的POD進(jìn)行研究,我們首先確立了可溶性及離子結(jié)合POD提取的最佳體系分別為pH 8.0,100 mM Tris-HC1和含0.1%Triton X-100+1M NaCl的pH 8.0,100 mM Tris-HC1。在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,可溶性及離子結(jié)合POD活性整體均呈下降趨勢(shì),可溶性POD活性較離子結(jié)合POD高出很多,二者存在極顯著差異。可溶性POD近中柱與遠(yuǎn)中柱酶活存在極顯著差異,其酶譜中近中柱的堿性POD組分活性較遠(yuǎn)中柱高,反映了其與汁胞;南嚓P(guān)性。離子結(jié)合POD雖未在酶活上體現(xiàn)與汁胞;南嚓P(guān)性,但在;瘯r(shí)期卻出現(xiàn)了特異性的堿性POD組分,因此,該部分POD可能與汁胞;P(guān)系更為密切。此外,赤霉素處理雖然對(duì)這兩部分POD的酶活及同工酶譜均存在不同程度的影響,但其在汁胞;^(guò)程中所扮演的角色有待進(jìn)一步考究。
【關(guān)鍵詞】:柚 汁胞; 木質(zhì)素 HSQC NMR POD 同工酶譜
【學(xué)位授予單位】:福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S666.3
【目錄】:
- 摘要8-9
- ABSTRACT9-11
- 第一章 前言11-20
- 1 柚汁胞;芯窟M(jìn)展11-14
- 1.1 柚汁胞;男螒B(tài)解剖學(xué)研究進(jìn)展11-12
- 1.2 柚汁胞;纳飳W(xué)特性研究進(jìn)展12
- 1.3 柚汁胞;纳砩胺肿由飳W(xué)研究進(jìn)展12-14
- 1.3.1 礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)與汁胞粒化12-13
- 1.3.2 激素與汁胞;13
- 1.3.3 汁胞;幕钚匝醮x研究13
- 1.3.4 汁胞;募(xì)胞壁代謝研究13-14
- 2 木質(zhì)素合成代謝相關(guān)研究14-17
- 2.1 木質(zhì)素前體的合成15
- 2.2 木質(zhì)醇的運(yùn)輸15-16
- 2.3 木質(zhì)醇的氧化16
- 2.4 木質(zhì)素聚合物的形成16
- 2.5 木質(zhì)素結(jié)構(gòu)單元的分布16-17
- 3 過(guò)氧化物酶相關(guān)研究17-18
- 3.1 POD特性17-18
- 3.2 POD與木質(zhì)素18
- 4 本研究的目的和意義18-20
- 第二章 柚汁胞木質(zhì)素組分解析20-30
- 1 材料與方法20-22
- 1.1 植物材料20
- 1.2 試驗(yàn)試劑20
- 1.3 試驗(yàn)設(shè)備20-21
- 1.4 木質(zhì)素提取21
- 1.5 木質(zhì)素紫外光譜掃描21
- 1.6 木質(zhì)素核磁共振分析21-22
- 2 結(jié)果與分析22-28
- 2.1 木質(zhì)素紫外光譜掃描22-23
- 2.2 木質(zhì)素核磁共振分析23-28
- 2.2.1 木質(zhì)素內(nèi)部結(jié)構(gòu)單元連接方式分析25-26
- 2.2.2 木質(zhì)素結(jié)構(gòu)單元組成分析26-28
- 3 討論28-30
- 第三章 POD酶活測(cè)定及同工酶譜分析30-41
- 1 材料與方法30-33
- 1.1 植物材料30
- 1.2 試驗(yàn)設(shè)備30
- 1.3 試驗(yàn)試劑30-31
- 1.4 汁胞POD提取體系篩選及各發(fā)育時(shí)期酶活測(cè)定31-32
- 1.4.1 可溶性POD提取體系篩選31
- 1.4.2 離子結(jié)合POD提取體系篩選31
- 1.4.3 共價(jià)結(jié)合POD活性測(cè)定31-32
- 1.4.4 汁胞各發(fā)育時(shí)期POD酶活測(cè)定32
- 1.5 汁胞POD同工酶譜分析32-33
- 1.5.1 酸性POD32-33
- 1.5.2 堿性POD33
- 2 結(jié)果與分析33-39
- 2.1 可溶性POD提取體系篩選33-34
- 2.2 離子結(jié)合POD提取體系篩選34-35
- 2.3 共價(jià)結(jié)合POD活性測(cè)定35
- 2.4 汁胞各生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期POD活性測(cè)定35-36
- 2.5 汁胞各生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期POD同工酶譜分析36-39
- 2.5.1 可溶性POD同工酶譜分析36-38
- 2.5.2 離子結(jié)合POD同工酶譜38-39
- 3 討論39-41
- 第四章 小結(jié)與展望41-43
- 參考文獻(xiàn)43-50
- 附錄50-52
- 致謝52
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,本文編號(hào):943705
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