本文關(guān)鍵詞：碳源對(duì)雨生紅球藻生長(zhǎng)和蝦青素積累的影響及培養(yǎng)條件的優(yōu)化

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【摘要】：蝦青素具有強(qiáng)大的清除自由基能力,其抗氧化功能是維生素E的550倍,且高于胡蘿卜素、玉米黃素、膽黃素、黃體素,被譽(yù)為“超級(jí)氧化劑”。雨生紅球藻是目前所知的天然蝦青素含量最高的生物,且雨生紅球藻中的蝦青素均為3S,3S’異構(gòu)體,是理想的天然蝦青素生產(chǎn)者。本文以實(shí)驗(yàn)室保藏的雨生紅球藻為實(shí)驗(yàn)材料,以蝦青素產(chǎn)量為指標(biāo),在雨生紅球藻綠色游動(dòng)細(xì)胞轉(zhuǎn)為紅色不動(dòng)孢子積累蝦青素階段比較添加含碳物質(zhì)的量相等的乙酸鈉、葡萄糖、丙酮酸鈉進(jìn)行混合營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng),選出最佳碳源。結(jié)果表明,混合營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)條件下丙酮酸鈉較乙酸鈉、葡萄糖更適于雨生紅球藻生長(zhǎng)和蝦青素積累,其添加量為含碳物質(zhì)的量0.10mol/L時(shí),蝦青素產(chǎn)量為6.0346±0.427mg·L-。本文探討了不同丙酮酸鈉濃度對(duì)雨生紅球藻由綠色游動(dòng)細(xì)胞轉(zhuǎn)為紅色不動(dòng)孢子階段生物量與蝦青素積累的影響。轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基中丙酮酸鈉濃度分別設(shè)置為含碳物質(zhì)的量0.075、0.080、0.085、0.090、0.095、0.100、0.105、0.110mol/L,結(jié)果表明其最佳轉(zhuǎn)化濃度為含碳物質(zhì)的量0.100mol/L。中心組合實(shí)驗(yàn)(CCD)中,以0.10mol/L丙酮酸鈉為碳源,對(duì)光照強(qiáng)度、溫度和pH進(jìn)行了優(yōu)化。得出光照強(qiáng)度為149.25μmol photons m-2s-1,溫度為28.98℃,時(shí)長(zhǎng)為10.48d,pH10為最佳轉(zhuǎn)化條件,所得蝦青素產(chǎn)量為13.086±0.238mg·L-1,是未優(yōu)化轉(zhuǎn)化條件時(shí)含量的1.39倍。探討了不同碳供給方式對(duì)雨生紅球藻轉(zhuǎn)化積累蝦青素的影響。以乙酸鈉最佳濃度0.02mol/L,丙酮酸鈉最佳濃度0.10mol/L為基礎(chǔ),將乙酸鈉、丙酮酸鈉分為兩種形式添加：一、兩種碳源同時(shí)使用：二、先使用一種碳源,數(shù)天后更換另一碳源。結(jié)果表明：一、兩種碳源同時(shí)使用時(shí),含碳物質(zhì)的量為丙酮酸鈉0.10mol/L,乙酸鈉0.01mol/L時(shí),蝦青素產(chǎn)量最高,達(dá)10.836±0.583mg·L-1；二、首先添加丙酮酸鈉作為轉(zhuǎn)化碳源,轉(zhuǎn)化8d后更換乙酸鈉為轉(zhuǎn)化碳源的雨生紅球藻蝦青素產(chǎn)量為兩碳源混合使用蝦青素產(chǎn)量最高,達(dá)10.887±0.315mg·L-。
【關(guān)鍵詞】：雨生紅球藻 蝦青素 兼養(yǎng) 轉(zhuǎn)化
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S917.3
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-12
• 1 前言12-18
• 1.1 蝦青素12
• 1.2 雨生紅球藻12-13
• 1.3 雨生紅球藻蝦青素積累的影響因素13-16
• 1.3.1 營(yíng)養(yǎng)方式13-15
• 1.3.2 光照15
• 1.3.3 溫度15
• 1.3.4 pH15-16
• 1.4 雨生紅球藻生產(chǎn)蝦青素的現(xiàn)狀16
• 1.5 立題依據(jù)與研究?jī)?nèi)容16-18
• 1.5.1 立題依據(jù)16
• 1.5.2 研究?jī)?nèi)容16-18
• 2 碳源種類(lèi)和濃度對(duì)雨生紅球藻生長(zhǎng)和蝦青素積累的影響18-33
• 2.1 引言18
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料18-19
• 2.2.1 藻種及培養(yǎng)基18-19
• 2.3 試驗(yàn)方法19-21
• 2.3.1 雨生紅球藻游動(dòng)細(xì)胞培養(yǎng)的方法19
• 2.3.2 轉(zhuǎn)接方法19
• 2.3.3 檢測(cè)方法19-21
• 2.3.4 丙酮酸鈉、乙酸鈉、葡萄糖三種有機(jī)碳源對(duì)雨生紅球藻積累蝦青素的量的影響21
• 2.4 結(jié)果與討論21-32
• 2.4.1 三種有機(jī)碳源不同濃度梯度對(duì)雨生紅球藻蝦青素產(chǎn)量的比較21-24
• 2.4.2 三種有機(jī)碳源不同濃度梯度對(duì)生物量積累量的比較24-26
• 2.4.3 三種有機(jī)碳源不同濃度梯度對(duì)蝦青素含量的比較26-28
• 2.4.4 三種有機(jī)碳源不同濃度梯度對(duì)細(xì)胞含碳量積累量的比較28-30
• 2.4.5 三種有機(jī)碳源不同濃度梯度對(duì)細(xì)胞含氮量積累量的比較30-32
• 2.5 本章小結(jié)32-33
• 3 不同濃度丙酮酸鈉對(duì)雨生紅球藻生長(zhǎng)和蝦青素積累的影響33-42
• 3.1 引言33
• 3.2 實(shí)驗(yàn)試劑33
• 3.2.1 藻種及培養(yǎng)基33
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法33-35
• 3.3.1 雨生紅球藻游動(dòng)細(xì)胞培養(yǎng)的方法33
• 3.3.2 轉(zhuǎn)接方法33
• 3.3.3 檢測(cè)方法33-35
• 3.3.4 丙酮酸鈉濃度的優(yōu)化35
• 3.4 結(jié)果與討論35-41
• 3.4.1 不同含碳量的丙酮酸鈉對(duì)雨生紅球藻蝦青素積累的量的影響35-37
• 3.4.2 不同含碳量的丙酮酸鈉對(duì)雨生紅球藻生物量的影響37-38
• 3.4.3 不同含碳量的丙酮酸鈉對(duì)雨生紅球藻蝦青素含量的影響38-39
• 3.4.4 不同含碳量的丙酮酸鈉對(duì)雨生紅球藻細(xì)胞含碳量的影響39-40
• 3.4.5 不同含碳量的丙酮酸鈉對(duì)雨生紅球藻細(xì)胞含氮量的影響40-41
• 3.5 本章小結(jié)41-42
• 4 以丙酮酸鈉為碳源條件下環(huán)境因子對(duì)雨生紅球藻生長(zhǎng)和蝦青素積累的影響42-64
• 4.1 引言42
• 4.2 實(shí)驗(yàn)試劑42
• 4.2.1 藻種及培養(yǎng)基42
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法42-47
• 4.3.1 雨生紅球藻游動(dòng)細(xì)胞培養(yǎng)的方法42-43
• 4.3.2 轉(zhuǎn)接方法43
• 4.3.3 檢測(cè)方法43-44
• 4.3.4 添加碳物質(zhì)的量為0.10mol/L的丙酮酸鈉作為碳源雨生紅球藻的最適轉(zhuǎn)化溫度44
• 4.3.5 添加碳物質(zhì)的量為0.10mol/L的丙酮酸鈉作為碳源雨生紅球藻的最適轉(zhuǎn)化光照強(qiáng)度44-45
• 4.3.6 添加碳物質(zhì)的量為0.10mol/L的丙酮酸鈉作為碳源探究雨生紅球藻最適轉(zhuǎn)化pH45
• 4.3.7 添加碳物質(zhì)的量為0.10mol/L的丙酮酸鈉作為碳源探究雨生紅球藻最適轉(zhuǎn)化時(shí)長(zhǎng)45
• 4.3.8 基于含碳物質(zhì)的量0.10mol/L的丙酮酸鈉設(shè)計(jì)CCD中心組合實(shí)心優(yōu)化轉(zhuǎn)化條件45-47
• 4.4 結(jié)果與討論47-63
• 4.4.1 不同溫度對(duì)雨生紅球藻蝦青素積累的量的影響47-48
• 4.4.2 不同溫度對(duì)雨生紅球藻細(xì)胞含碳量的影響48-49
• 4.4.3 不同溫度對(duì)雨生紅球藻細(xì)胞含氮量的影響49-50
• 4.4.4 不同光照強(qiáng)度對(duì)雨生紅球藻蝦青素積累的量的影響50-51
• 4.4.5 不同光照強(qiáng)度對(duì)雨生紅球藻細(xì)胞含碳量的影響51-52
• 4.4.6 不同光照強(qiáng)度對(duì)雨生紅球藻細(xì)胞含氮量的影響52-53
• 4.4.7 不同pH對(duì)雨生紅球藻蝦青素積累的量的影響53-54
• 4.4.8 不同pH對(duì)雨生紅球藻細(xì)胞含碳量的影響54-55
• 4.4.9 不同pH對(duì)雨生紅球藻細(xì)胞含氮量的影響55-56
• 4.4.10 不同轉(zhuǎn)化時(shí)長(zhǎng)對(duì)雨生紅球藻蝦青素積累的量的影響56-57
• 4.4.11 中心組合實(shí)驗(yàn)(CCD)優(yōu)化轉(zhuǎn)化條件57-63
• 4.4.12 驗(yàn)證試驗(yàn)63
• 4.5 本章小結(jié)63-64
• 5 不同乙酸鈉和丙酮酸鈉混合營(yíng)養(yǎng)模式對(duì)雨生紅球藻生長(zhǎng)和積累蝦青素的影響64-77
• 5.1 引言64
• 5.2 實(shí)驗(yàn)試劑64
• 5.2.1 藻種及培養(yǎng)基64
• 5.3 實(shí)驗(yàn)方法64-68
• 5.3.1 雨生紅球藻游動(dòng)細(xì)胞培養(yǎng)的方法64-65
• 5.3.2 轉(zhuǎn)接方法65
• 5.3.3 檢測(cè)方法65-66
• 5.3.4 同時(shí)添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻蝦青素產(chǎn)量的影響66-67
• 5.3.5 相繼添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻蝦青素產(chǎn)量的影響67-68
• 5.4 結(jié)果與討論68-76
• 5.4.1 同時(shí)添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻蝦青素產(chǎn)量的影響68-69
• 5.4.2 同時(shí)添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻生物量的影響69-70
• 5.4.3 同時(shí)添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻細(xì)胞含碳量的影響70-71
• 5.4.4 同時(shí)添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻細(xì)胞含氮量的影響71-72
• 5.4.5 相繼添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻蝦青素產(chǎn)量的影響72-73
• 5.4.6 相繼添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻生物量的影響73-74
• 5.4.7 相繼添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻細(xì)胞含碳量的影響74-75
• 5.4.8 相繼添加乙酸鈉、丙酮酸鈉對(duì)兼養(yǎng)轉(zhuǎn)化雨生紅球藻細(xì)胞含氮量的影響75-76
• 5.5 本章小結(jié)76-77
• 參考文獻(xiàn)77-85
• 致謝85-86
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷86

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1 李曉霞,曹平華,禹學(xué)禮,陶林;雨生紅球藻在不同培養(yǎng)基中生長(zhǎng)效果的研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2004年08期

2 蘇忠亮;程江峰;梁成偉;張媛媛;劉杰;;雨生紅球藻對(duì)環(huán)境脅迫的分子防御機(jī)制[J];生物技術(shù)通報(bào);2009年03期

3 莊惠如,施巧琴,盧海聲,吳松剛,陳躍興,陳健;營(yíng)養(yǎng)脅迫對(duì)雨生紅球藻蝦青素累積的影響[J];水生生物學(xué)報(bào);2000年03期

4 陸開(kāi)形,蔣霞敏,翟興文;不同條件下雨生紅球藻生長(zhǎng)的研究[J];水利漁業(yè);2003年01期

5 王潮崗;韓q，

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