本文關(guān)鍵詞：湖南省柑橘黃龍病調(diào)查及病菌遺傳多樣性分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：柑橘黃龍病(Citrus Huanglongbing)能對(duì)柑橘產(chǎn)業(yè)造成毀滅性的影響,其病原菌是一種細(xì)菌,屬于薄壁菌門、韌皮部桿菌屬。隨著柑橘種植技術(shù)的大力推廣和政府的扶持以及全球氣候變暖,柑橘黃龍病的發(fā)生區(qū)域也在增多。為了了解柑橘黃龍病在我省的分布情況、傳播特點(diǎn)、種群差異,更好地建立柑橘黃龍病防治示范區(qū),本文對(duì)湖南省的零陵區(qū)、江華縣、江永縣、道縣、宜章縣、資興市等20多個(gè)縣(市),以及江西省的大余縣、福建省的泉州市的柑橘葉片疑似發(fā)病樣品及柑橘木虱進(jìn)行檢測(cè),主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：1、對(duì)采集和送樣的22個(gè)縣(市)216份樣品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示郴州市北湖區(qū)、郴州市汝城縣、郴州市永興縣等為柑橘黃龍病新的疫區(qū),確定湖南省岳陽(yáng)市岳陽(yáng)縣和華容縣的柑橘黃龍病是由于苗木的隨意調(diào)運(yùn)而引起的。了解了湖南地區(qū)柑橘黃龍病的蔓延趨勢(shì)及湖南、江西、福建三省的柑橘黃龍病發(fā)病情況。2、通過(guò)16S rDNA和M94319序列引物OI1/OI2和TL/TR進(jìn)行PCR擴(kuò)增并測(cè)序,用系統(tǒng)發(fā)生軟件MEGA5.0進(jìn)行聚類分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)湖南省內(nèi)的柑橘黃龍病病原菌的遺傳分化距離較小,江西贛州市兩個(gè)縣的樣品基本屬于同一個(gè)小種,福建泉州市的樣品單獨(dú)為一個(gè)小種。其遺傳分化的規(guī)律主要取決于地域的分布,寄主植物品種的差異也是造成遺傳分化的一個(gè)重要因素。由于M94319為黃龍病病原菌亞洲種的特有基因片段,因此能快速鑒定出病原菌是否為亞洲種。3、通過(guò)改進(jìn)的SDS法提取單頭柑橘木虱總DNA,通過(guò)OI1/OI2和TL/TR兩種引物對(duì)提取的總DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,與陽(yáng)性對(duì)照保持一致的樣品送樣測(cè)序,可以快速鑒定其是否帶有病原菌。這種檢測(cè)體系對(duì)帶毒木虱的檢測(cè)率在80%以上,是一套比較完整,且穩(wěn)定性、靈敏性、可操作性都十分好的柑橘木虱的檢測(cè)體系。4、了解湖南地區(qū)的柑橘黃龍病的發(fā)生規(guī)律及基本防控方法。在春、夏、秋稍萌發(fā)的時(shí)候重點(diǎn)進(jìn)行藥劑防治,防止柑橘木虱的傳毒,已經(jīng)發(fā)病的園區(qū)采取及時(shí)挖除病株修剪病枝,未發(fā)病園區(qū)嚴(yán)格把關(guān)無(wú)毒苗木的調(diào)運(yùn)。
【關(guān)鍵詞】：柑橘黃龍病 遺傳多樣性 16S rDNA M94319 防控
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S436.66
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第一章 文獻(xiàn)綜述10-22
• 1 柑橘黃龍病概述10-22
• 1.1 柑橘黃龍病的簡(jiǎn)介10-16
• 1.1.1 柑橘黃龍病的分布及在我國(guó)的發(fā)生情況10-11
• 1.1.2 柑橘黃龍病的癥狀11-13
• 1.1.3 柑橘黃龍病的病原13-16
• 1.1.4 柑橘黃龍病菌的傳播16
• 1.2 柑橘黃龍病的診斷16-21
• 1.2.1 田間調(diào)查及指示植物鑒定16-17
• 1.2.2 理化性質(zhì)鑒定法17-18
• 1.2.3 鏡檢法鑒定18
• 1.2.4 血清學(xué)鑒定18
• 1.2.5 分子生物學(xué)鑒定18-21
• 1.3 研究的目的和意義21-22
• 第二章 湖南省柑橘黃龍病的鑒定22-32
• 1 材料和方法22-29
• 1.1 材料22-23
• 1.1.1 樣品采集地點(diǎn)及方法22-23
• 1.2 主要儀器和設(shè)備23-24
• 1.3 主要試劑及配置24-25
• 1.3.1 常用化學(xué)試劑24
• 1.3.2 常用試劑配置24-25
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法25-29
• 1.4.1 CTAB法提取柑橘葉片總DNA25
• 1.4.2 試劑盒取柑橘葉片總DNA25
• 1.4.3 改進(jìn)SDS法提取單頭木虱DNA25-26
• 1.4.4 凝膠電泳26-27
• 1.4.5 PCR擴(kuò)增檢測(cè)27-29
• 2 結(jié)果與分析29-31
• 3 結(jié)論與討論31-32
• 第三章 遺傳多樣性分析32-38
• 1 材料與方法32-33
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料32
• 1.2 引物的選擇32-33
• 2 結(jié)果與分析33-37
• 2.1 發(fā)病區(qū)域33-34
• 2.2 16S rDNA引物擴(kuò)增結(jié)果34-35
• 2.3 M94319序列引物擴(kuò)增結(jié)果35-37
• 3 小結(jié)37-38
• 第四章 總結(jié)與展望38-41
• 參考文獻(xiàn)41-49
• 致謝49-50
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷50

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10 省農(nóng)科院果樹所副研究員 范國(guó)成;柑橘黃龍病診斷及防控技術(shù)[N];福建科技報(bào);2011年

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本文編號(hào)：490160