本文關(guān)鍵詞：四川部分地區(qū)副豬嗜血桿菌的耐藥性檢測及其與PCV2、PRRSV的混合感染調(diào)查，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis, HPS)是存在于上呼吸道的條件性致病菌,一些強毒力的菌株能對上呼吸道的防御系統(tǒng)造成損傷,引發(fā)宿主的全身感染,造成養(yǎng)殖戶較大的經(jīng)濟損失。本研究從四川省多地豬場采集疑似副豬嗜血桿菌病患豬病料,進行副豬嗜血桿菌的分離鑒定與藥敏試驗,并對副豬嗜血桿菌與圓環(huán)病毒2型(PCV2)和豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)混合感染進行了抗原抗體檢測。主要研究結(jié)果如下：1.四川地區(qū)副豬嗜血桿菌的分離鑒定與藥敏試驗2014年2月底到11月底,從四川省雅安、成都、西昌等不同地區(qū)采集疑似副豬嗜血桿菌病患豬病料232份,進行細菌分離培養(yǎng),經(jīng)革蘭氏染色觀察、生化鑒定、PCR鑒定,從其中15個地區(qū)成功分離出48株副豬嗜血桿菌。選取其中7株副豬嗜血桿菌分離株進行16SrRNA基因測序比較,核酸同源性較高,都在95.9%以上。對分離出的48株副豬嗜血桿菌進行了藥敏試驗,結(jié)果表明分離株普遍對氟苯尼考、頭孢噻肟、菌必治、強力霉素和利福平敏感,對復方新諾明、林可霉素、青霉素、氨芐西林、慶大霉素、丁胺卡那、阿莫西林耐藥。試驗發(fā)現(xiàn)48株副豬嗜血桿菌,其耐藥譜都不盡相同,同一豬場分離的不同菌株,其耐藥性差距較小。2.HPS、PCV2、PRRSV抗原抗體混合感染調(diào)查利用PCR和RT-PCR的方法分別對采集的病料進行PCV2和PRRSV檢測。檢出副豬嗜血桿菌與PCV2混合感染率為64.6%；副豬嗜血桿菌與PRRSV混合感染率為58.3%。副豬嗜血桿菌與PCV2和PRRSV混合感染率為29.1%。本研究主要采集了2014年保育豬的血清進行抗體檢測,調(diào)查表明,四川地區(qū)保育豬HPS抗體陽性率為64.10%,并且四川地區(qū)的豬只均未免疫過副豬嗜血桿菌免疫,表明四川地區(qū)保育豬普遍存在副豬嗜血桿菌感染。未免疫PCV2疫苗的血清抗體陽性率為42.06%,未免疫PRRSV疫苗的血清抗體陽性率為36.67%。HPS與PCV2混合感染率為30.83%,HPS與PRRSV混合感染率為30%,HPS、PCV2、PRRSV的混合感染率為29.12%。
【關(guān)鍵詞】：副豬嗜血桿菌 耐藥性 PCV2 PRRSV 混合感染
【學位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S858.28
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• ABSTRACT5-7
• 符號說明7-11
• 第一章 文獻綜述11-21
• 1 副豬嗜血桿菌病的研究現(xiàn)狀11-18
• 1.1 病原學11
• 1.2 流行病學11-12
• 1.3 致病機理12-13
• 1.4 發(fā)病表現(xiàn)13-14
• 1.5 診斷方法14-16
• 1.5.1 病原學診斷14
• 1.5.2 血清學診斷技術(shù)14-15
• 1.5.3 分子生物學診斷技術(shù)15-16
• 1.6 我國副豬嗜血桿菌的耐藥性研究16-17
• 1.7 副豬嗜血桿菌的防治17-18
• 2 副豬嗜血桿菌與其他病原混合感染研究18-19
• 2.1 副豬嗜血桿菌與PCV2的混合感染研究18
• 2.2 副豬嗜血桿菌與PRRSV的混合感染研究18-19
• 2.3 副豬嗜血桿菌與細菌的混合感染研究19
• 3 本研究的目的與意義19-21
• 第二章 副豬嗜血桿菌的分離鑒定與耐藥性調(diào)查21-36
• 1 試驗材料21-23
• 1.1 病料來源21
• 1.2 菌種來源21
• 1.3 主要試劑21-22
• 1.4 主要培養(yǎng)基的制備22
• 1.5 主要儀器22-23
• 2 試驗方法23-25
• 2.1 病料細菌分離23
• 2.2 革蘭氏染色觀察23
• 2.3 生化鑒定23
• 2.4 PCR鑒定23-24
• 2.5 PCR產(chǎn)物測序及同源性比對24
• 2.6 16SrRNA基因序列分析24-25
• 2.7 分離株的藥敏試驗25
• 3 試驗結(jié)果25-33
• 3.1 患豬病狀及剖檢情況25-26
• 3.2 病料細菌分離26
• 3.3 分離株革蘭氏染色結(jié)果26-27
• 3.4 分離株生化試驗結(jié)果27
• 3.5 PCR鑒定結(jié)果27-28
• 3.6 HPS分離結(jié)果28-29
• 3.7 副豬嗜血桿菌的16SrRNA序列分析結(jié)果29-32
• 3.7.1 16SrRNA基因進化樹分析29-30
• 3.7.2 16SrRNA基因同源性分析30-32
• 3.8 藥敏試驗結(jié)果32-33
• 4 討論與小結(jié)33-36
• 第三章 副豬嗜血桿菌與PCV2、PRRSV混合感染情況調(diào)查36-50
• 1. 實驗材料36-38
• 1.1 組織病料來源36
• 1.2 血清材料36-37
• 1.3 主要試劑37-38
• 1.4 主要設備38
• 2 試驗方法38-41
• 2.1 副豬嗜血桿菌與PCV2的混合感染情況調(diào)查38-39
• 2.1.1 病毒DNA的提取38
• 2.1.2 PCR鑒定38-39
• 2.2 副豬嗜血桿菌與PRRSV的混合感染情況調(diào)查39-40
• 2.2.1 病毒RNA的提取39
• 2.2.2 反轉(zhuǎn)錄39
• 2.2.3 將反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進行PCR鑒定39-40
• 2.3 副豬嗜血桿菌與PCV2、PRRSV的血清學流行病學調(diào)查40-41
• 2.3.1 副豬嗜血桿菌血清流行病學調(diào)查40
• 2.3.2 PCV2、PRRSV的血清流行病學調(diào)查40-41
• 3 試驗結(jié)果41-45
• 3.1 PCV2的PCR鑒定結(jié)果41
• 3.2 PRRSV的PCR鑒定結(jié)果41-42
• 3.3 HPS與PCV2、PRRSV抗原混合感染情況42
• 3.4 血清流行病學調(diào)查結(jié)果42-45
• 3.4.1 PCV2血清流行病學調(diào)查結(jié)果42
• 3.4.2 PRRSV血清流行病學調(diào)查結(jié)果42-43
• 3.4.3 副豬嗜血桿菌桿菌血清流行病學調(diào)查結(jié)果43-44
• 3.4.4 血清流行病學的混合感染調(diào)查結(jié)果44-45
• 4 討論與小結(jié)45-50
• 4.1 關(guān)于豬圓環(huán)病檢測結(jié)果分析45
• 4.2 關(guān)于藍耳病檢測結(jié)果分析45-47
• 4.3 關(guān)于副豬嗜血桿菌病檢測結(jié)果分析47-48
• 4.4 混合感染情況分析48-50
• 第四章 結(jié)論50-51
• 參考文獻51-58
• 致謝58-59
• 附錄一 副豬嗜血桿菌藥敏結(jié)果統(tǒng)計表59-62
• 附錄二 測序序列62-64

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本文編號：448065