龍腦樟組織培養(yǎng)再生體系研究
本文關(guān)鍵詞:龍腦樟組織培養(yǎng)再生體系研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:樟樹(Cirmamonun Camphora(L) presl)中含有的龍腦,具有重要的藥用價值,被認為是我國冰片生產(chǎn)的最佳原料。龍腦樟有植物黃金的美譽,既是高級香料,又是名貴稀有藥材,同時也是化工原料。本試驗以優(yōu)良龍腦樟扦插苗為基本研究材料,通過無性系繁殖獲得植株,在組織培養(yǎng)過程中,開展了對龍腦樟不同外植體滅菌方式、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗和移栽等多個試驗,建立龍腦樟無性繁殖體系。為龍腦樟工廠化育苗奠定基礎(chǔ)。本試驗的研究結(jié)果如下:1.龍腦樟無菌體系的建立。頂芽莖段使用:75%乙醇8s+0.1%HgCl2 8min+2滴吐溫效果最好;莖段中部使用:75%乙醇10s+0.1%HgCl2 10min+2滴吐溫效果最好;莖段基部:75%乙醇20s+0.1%HgCl2 15min+2滴吐溫效果最好,可使外植體污染率降到最低,成活率最高。2.龍腦樟愈傷組織誘導(dǎo)。試驗結(jié)果表明,外植體誘導(dǎo)愈傷組織難易排序:莖段葉柄嫩葉,選擇莖段為愈傷組織外植體。愈傷組織誘導(dǎo)率最高的培養(yǎng)基配方為:MS+2,4-D3.0 mg/L+NAA0.4 mg/L+IBA0.4 mg/L;通過極差分析結(jié)果和方差分析,各因素對龍腦樟愈傷組織誘導(dǎo)影響作用的順序為:2,4-DIBANAA,2,4-D對龍腦樟愈傷組織誘導(dǎo)影響最大。3.龍腦樟不定芽誘導(dǎo)。試驗結(jié)果表明,頂芽莖段的萌芽率明顯高于帶腋芽莖段。龍腦樟不定芽芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為:MS+6-BA 3.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖20h/L,通過極差分析結(jié)果和方差分析,各因素對龍腦樟不定芽誘導(dǎo)影響作用的順序為:6-BANAA蔗糖,6-BA各種濃度對不定芽誘導(dǎo)影響顯著。4.抑制褐化。試驗通過三種方式抑制褐化,試驗結(jié)果表明,通過使用AC對外植體褐化抑制效果最佳,AC濃度在1.0g/L時抑制龍腦樟外植體褐化能力最強。5.龍腦樟愈傷組織誘導(dǎo)不定芽。愈傷組織繼代增殖系數(shù)最高的培養(yǎng)基配方為:MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA0.6mg/L+蔗糖20g/L,通過極差分析結(jié)果和方差分析,各因素對龍腦樟不定芽誘導(dǎo)影響作用的順序為:6-BANAA蔗糖。6.龍腦樟繼代增殖培養(yǎng)。極差分析中的R值得出,各因素對不定芽增殖培養(yǎng)影響作用的順序為:6-BANAAIBA。不定芽增殖系數(shù)最高的培養(yǎng)基配方為:MS+6-BA 3.5 mg/L+NAA0.25mg/L。7.繼代次數(shù)對龍腦樟苗繼代的影響。進行多次繼代培養(yǎng)試驗,研究多次繼代對龍腦樟增殖系數(shù)的影響。隨著繼代次數(shù)增加,龍腦樟繼代增殖系數(shù)先升后降。第二次繼代平均增殖系數(shù)最大。8.龍腦樟的生根培養(yǎng)。龍腦樟組培苗生根最適宜培養(yǎng)基配方為:1/2MS+IBA0.5 mg/L+IAA1.0 mg/L+AC0.2g/L,通過極差分析結(jié)果和方差分析,各因素對龍腦樟不定芽誘導(dǎo)影響作用的順序為:6-BANAAIBA。9.龍腦樟組培苗的移栽和煉苗。不同基質(zhì)對龍腦樟組培苗移栽試驗中,泥炭土:木屑=1:1的成活率明顯高于其他基質(zhì)。
【關(guān)鍵詞】:龍腦樟 組織培養(yǎng) 外植體 愈傷組織 不定芽 離體快繁
【學(xué)位授予單位】:福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S792.23
【目錄】:
- 摘要7-9
- Abstract9-11
- 1 緒論11-18
- 1.1 引言11-12
- 1.2 研究現(xiàn)狀12-16
- 1.2.1 外植體的選擇與表面消毒12-13
- 1.2.2 初代培養(yǎng)13-15
- 1.2.3 繼代培養(yǎng)15
- 1.2.4 生根培養(yǎng)15-16
- 1.3 樟樹國內(nèi)外研究現(xiàn)狀16-18
- 1.3.1 樟樹組培快繁的研究16-17
- 1.3.2 龍腦樟國內(nèi)外研究現(xiàn)狀17-18
- 1.4 存在的問題18
- 2 試驗準(zhǔn)備18-21
- 2.1 試驗地點18
- 2.2 試驗材料18-19
- 2.3 預(yù)備試驗設(shè)計19-20
- 2.4 預(yù)備試驗結(jié)果與分析20-21
- 3 試驗設(shè)計21-29
- 3.1 龍腦樟外植體滅菌試驗設(shè)計21-23
- 3.1.1 頂芽莖段滅菌試驗設(shè)計22
- 3.1.2 帶腋芽莖的中部滅菌試驗設(shè)計22-23
- 3.1.3 帶腋芽莖的基部滅菌試驗設(shè)計23
- 3.2 龍腦樟的初代培養(yǎng)試驗設(shè)計23-26
- 3.2.1 龍腦樟愈傷組織誘導(dǎo)試驗設(shè)計24-25
- 3.2.2 龍腦樟芽誘導(dǎo)試驗設(shè)計25-26
- 3.2.3 初代培養(yǎng)中龍腦樟外植體褐化處理試驗設(shè)計26
- 3.3 繼代培養(yǎng)試驗設(shè)計26-28
- 3.3.1 愈傷組織誘導(dǎo)不定芽再生培養(yǎng)試驗設(shè)計26-27
- 3.3.2 龍腦樟的不定芽增殖培養(yǎng)試驗設(shè)計27-28
- 3.3.3 龍腦樟繼代次數(shù)對龍腦樟組培苗增殖系數(shù)的影響試驗設(shè)計28
- 3.4 龍腦樟組培苗的生根培養(yǎng)試驗設(shè)計28-29
- 3.4.1 不同生長素對生根培養(yǎng)的影響試驗設(shè)計28-29
- 3.5 龍腦樟生根苗的煉苗和移栽29
- 3.5.1 煉苗29
- 3.5.2 不同移栽基質(zhì)對龍腦樟組培苗成活率的影響29
- 3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析方法29
- 4 結(jié)果與分析29-46
- 4.1 龍腦樟外植體滅菌試驗29-32
- 4.2 龍腦樟的初代培養(yǎng)32-39
- 4.2.1 愈傷組織誘導(dǎo)研究32-35
- 4.2.2 不定芽誘導(dǎo)試驗效果35-38
- 4.2.3 初代培養(yǎng)中龍腦樟外植體褐化處理效果38-39
- 4.3 龍腦樟繼代培養(yǎng)39-44
- 4.3.1 愈傷組織繼代試驗結(jié)果39-41
- 4.3.2 龍腦樟的不定芽增殖培養(yǎng)41-43
- 4.3.3 龍腦樟繼代次數(shù)對龍腦樟組培苗增殖系數(shù)的影響43-44
- 4.4 生根培養(yǎng)44-45
- 4.5 龍腦樟組培苗的煉苗和移栽45-46
- 4.5.1 不同基質(zhì)對苗木成活率的影響45-46
- 5 小結(jié)與討論46-51
- 5.1 小結(jié)46-49
- 5.1.1 外植體的選擇與滅菌47
- 5.1.2 初代培養(yǎng)47-48
- 5.1.3 龍腦樟繼代培養(yǎng)48-49
- 5.1.4 生根培養(yǎng)49
- 5.1.5 煉苗和移栽49
- 5.2 討論49-51
- 參考文獻51-55
- 附錄55-58
- 致謝58
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