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樟葉越桔原植物及其組織培養(yǎng)系的化學(xué)成分分析

發(fā)布時間:2017-05-30 00:06

  本文關(guān)鍵詞:樟葉越桔原植物及其組織培養(yǎng)系的化學(xué)成分分析,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:樟葉越桔(Vaccinium dunalianum Wight)屬杜鵑花科越桔屬植物。主產(chǎn)于云南、四川、貴州、西藏等地,在云南省境內(nèi)則主要分布于云南西北部經(jīng)滇中高原至滇南和滇東南。其幼嫩葉芽,因形似雀嘴呈錐狀,在云南彝族民間又稱“雀嘴茶”,據(jù)記載自明代開始就作為一種茶代用品長期飲用至今,具有祛風(fēng)除濕、舒筋活絡(luò)等功效。樟葉越桔還是一種富含咖啡酰熊果苷類物質(zhì)的特殊資源植物,其主要成分的黑色素生成抑制活性優(yōu)于熊果苷,且毒性僅為熊果苷的1/2。熊果苷是源于綠色植物的天然活性物質(zhì),是國際公認(rèn)的21世紀(jì)的最為安全有效的理想皮膚美白祛斑活性劑。由于熊果苷作為次生代謝產(chǎn)物通常以微量形式存在于植物體中,且天然植物來源困難,因此,樟葉越桔有望作為熊果苷天然替代品資源加以應(yīng)用,具有重要的開發(fā)價值。本研究以樟葉越桔為植物材料,分別開展了樟葉越桔不同產(chǎn)地及不同部位中主要化學(xué)成分的含量分析;以樟葉越桔幼嫩莖段為外植體,建立其組織培養(yǎng)和快速繁殖體系;樟葉越桔陰干果實的化學(xué)成分分離鑒定和營養(yǎng)成分分析等三方面的研究工作,以期為該植物的種質(zhì)資源保護(hù)及進(jìn)一步的綜合開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。取得的主要研究結(jié)果如下:1.建立了樟葉越桔中熊果苷(arbutin,1)、綠原酸(chlorogenic acid,2)和6'-O-咖啡酰熊果苷(6'-O-caffeoylarbutin,3)等3種主要化學(xué)成分的HPLC同步定量分析方法。運用該方法對樟葉越桔不同產(chǎn)地及不同部位中上述3種化學(xué)成分的含量分布進(jìn)行了測定分析,結(jié)果表明化合物3的含量高于1和2,且3在葉芽中的含量高達(dá)31.76%,葉芽、花芽及葉中1-3的含量均高于其他部位。2.以野生樟葉越桔幼嫩帶芽莖段為外植體,通過對初代啟動培養(yǎng)、增殖及生根培養(yǎng)方案的篩選,建立了樟葉越桔的組織培養(yǎng)和快速繁殖體系。結(jié)果表明,最適啟動培養(yǎng)基為WPM+6-BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1,外植體誘導(dǎo)萌發(fā)率達(dá)83.33%;增殖培養(yǎng)基為WPM+ZT 2.0 mg·L-1,可獲得較高的增殖倍率,且暗培養(yǎng)7d可達(dá)最佳增殖效果;生根最適培養(yǎng)基為WPM+IBA 0.2 mg·L-1,生根率達(dá)86.67%。3.運用植物化學(xué)研究方法,樟葉越桔果實用80%甲醇冷浸提取后,依次用石油醚和乙酸乙酯進(jìn)行萃取,萃取后剩余水溶液部分進(jìn)一步采用Diaion HP20、MCI和CG161吸附樹脂、硅膠、Sephadex LH-20凝膠和HPLC半制備Rp-18等柱層析方法進(jìn)行分離純化,從中共分離得到19個化合物。采用質(zhì)譜、1H和13C NMR波譜分析技術(shù)鑒定了其中4個化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)分別為6'-O-咖啡酰熊果苷(6'-Ocaffeoylarbutin,1)、水晶蘭苷甲酯(monotropein methyl ester,2)、二氫水晶蘭苷甲酯(dihydroxy monotropein methyl ester,3)和熊果苷(4);衔2和3為首次從越桔屬植物中分離得到,其余化合物的結(jié)構(gòu)正在解析中。4.對云南省武定縣產(chǎn)樟葉越桔陰干果實的營養(yǎng)成分進(jìn)行了測定分析,結(jié)果表明,樟葉越桔陰干果實營養(yǎng)成分豐富,粗纖維含量高達(dá)36.3%;含有16種氨基酸,氨基酸配比較為合理,其中必需氨基酸含量占氨基酸總量的38.9%,天門冬氨酸和谷氨酸等鮮味氨基酸含量豐富,占氨基酸總量的26.18%;含有9種礦質(zhì)元素,常量元素的分布規(guī)律為鉀鈣鎂磷鈉,具有典型的高鉀低鈉特征,具有較高的營養(yǎng)價值和保健價值。
【關(guān)鍵詞】:樟葉越桔 化學(xué)成分 分離鑒定 定量分析 營養(yǎng)成分 組織培養(yǎng)
【學(xué)位授予單位】:西南林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S663.9
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • ABSTRACT7-11
  • 1 前言11-24
  • 1.1 越桔屬植物概述11-18
  • 1.1.1 越桔屬植物的引種栽培11-12
  • 1.1.2 越桔屬植物的組織培養(yǎng)12-13
  • 1.1.3 越桔屬植物的化學(xué)成分及生物活性13-18
  • 1.2 樟葉越桔概述18-21
  • 1.2.1 樟葉越桔的生物學(xué)特性和分布18-19
  • 1.2.2 樟葉越桔的研究現(xiàn)狀19-20
  • 1.2.3 樟葉越桔主要化學(xué)成分研究現(xiàn)狀20-21
  • 1.3 研究的目的和意義21-23
  • 1.4 試驗流程23-24
  • 2 樟葉越桔不同產(chǎn)地及部位中主要化學(xué)成分的含量分析24-33
  • 2.1 試驗材料、試劑和儀器24
  • 2.2 試驗方法24-26
  • 2.2.1 HPLC檢測條件24
  • 2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線建立24-25
  • 2.2.3 提取條件優(yōu)化25-26
  • 2.2.4 樟葉越桔不同產(chǎn)地及不同部位樣品的含量測定26
  • 2.3 結(jié)果與分析26-33
  • 2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立26-27
  • 2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性27-28
  • 2.3.3 樟葉越桔的加標(biāo)回收28
  • 2.3.4 不同體積分?jǐn)?shù)甲醇溶液對提取效果的影響28
  • 2.3.5 不同超聲時間和超聲次數(shù)對提取效果的影響28-29
  • 2.3.6 不同產(chǎn)地樟葉越桔中 1-3 的含量分析29-30
  • 2.3.7 樟葉越桔不同部位中 1-3 的含量分析30-33
  • 3 樟葉越桔的組織培養(yǎng)及其化學(xué)成分的定性分析33-40
  • 3.1 試驗材料33
  • 3.2 試驗流程圖33
  • 3.3 培養(yǎng)方法33-35
  • 3.3.1 培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件33
  • 3.3.2 外植體處理33-34
  • 3.3.3 腋芽誘導(dǎo)的啟動34
  • 3.3.4 繼代與增殖34
  • 3.3.5 生根培養(yǎng)34-35
  • 3.4 結(jié)果與分析35-38
  • 3.4.1 外植體的消毒處理35
  • 3.4.2 腋芽誘導(dǎo)的啟動培養(yǎng)35-36
  • 3.4.3 繼代與增殖培養(yǎng)36-37
  • 3.4.4 生根培養(yǎng)37-38
  • 3.5 無菌組培苗的初步定性分析38-40
  • 4 樟葉越桔果實化學(xué)成分分離鑒定及營養(yǎng)成分分析40-54
  • 4.1 樟葉越桔果實化學(xué)成分分離鑒定40-50
  • 4.1.1 試驗材料、試劑和儀器40
  • 4.1.2 試驗方法40-45
  • 4.1.3 結(jié)果與分析45-50
  • 4.1.3.1 結(jié)構(gòu)鑒定45-48
  • 4.1.3.2 波譜分析48-50
  • 4.2 樟葉越桔果實的營養(yǎng)成分分析50-54
  • 4.2.1 試驗材料50
  • 4.2.2 試驗方法50
  • 4.2.3 結(jié)果與分析50-54
  • 5 結(jié)論與討論54-57
  • 5.1 樟葉越桔不同產(chǎn)地及部位中主要化學(xué)成分的含量分析54-55
  • 5.2 樟葉越桔的組織培養(yǎng)及其化學(xué)成分的定性分析55
  • 5.3 樟葉越桔果實化學(xué)成分的分離鑒定及營養(yǎng)成分分析55-57
  • 5.3.1 樟葉越桔果實化學(xué)成分的分離鑒定55
  • 5.3.2 樟葉越桔果實的營養(yǎng)成分分析55-57
  • 參考文獻(xiàn)57-62
  • 附圖62-66
  • 個人簡介66-67
  • 導(dǎo)師簡介67-68
  • 致謝68

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1 朱東陽;尹繼庭;丁勇;儲曉;凡春梅;龔秀會;劉小燭;趙平;;樟葉越桔葉芽總RNA提取方法比較研究[J];西部林業(yè)科學(xué);2013年01期

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3 ;[J];;年期

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1 羅旭璐;樟葉越桔原植物及其組織培養(yǎng)系的化學(xué)成分分析[D];西南林業(yè)大學(xué);2015年


  本文關(guān)鍵詞:樟葉越桔原植物及其組織培養(yǎng)系的化學(xué)成分分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:405958

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