子宮內(nèi)膜炎是威脅藏綿羊健康的疾病之一,嚴(yán)重阻礙著藏綿羊養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展,其病因是病原微生物感染藏綿羊子宮,所引起的一種繁殖障礙性疾病,導(dǎo)致綿羊消瘦、體重降低,影響綿羊的繁殖性能。由于羊子宮內(nèi)膜炎不出現(xiàn)全身性的發(fā)熱、炎癥、疼痛等臨床癥狀,特別是隱性子宮內(nèi)膜炎,易被飼養(yǎng)者忽視,也是藏綿羊淘汰率升高的主要原因,給綿羊養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。本研究共采集600份青海牧區(qū)的藏綿羊子宮,對(duì)樣品進(jìn)行單一PCR檢測(cè)并建立了多重PCR方法,隨機(jī)挑取30份陽(yáng)性進(jìn)行病原菌的分離與鑒定試驗(yàn)。取得結(jié)果有以下幾點(diǎn):（1）通過(guò)培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)菌株并提取基因組,篩選出特異性引物,建立了單一PCR方法,其特異性良好,靈敏性較高。運(yùn)用單一PCR法檢測(cè)的600份樣品中,無(wú)乳鏈球菌感染比例占47.33%,大腸桿菌占34.83%,金黃色葡萄球菌占6.5%,大腸桿菌和無(wú)乳鏈球菌混合感染占24.67%,未檢出沙門(mén)氏菌和化膿隱秘桿菌。（2）通過(guò)單一PCR法的反應(yīng)條件及檢測(cè)結(jié)果,以無(wú)乳鏈球菌cfb基因、大腸桿菌phoA基因和金黃色葡萄球菌nuc基因?yàn)榘谢?標(biāo)準(zhǔn)菌株的基因組為模板,建立了多重PCR法。選取單一PCR檢測(cè)的陽(yáng)性樣品,運(yùn)用多重P... 

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Summary
縮略語(yǔ)表
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1 藏綿羊的研究進(jìn)展
        1.1 藏綿羊的來(lái)源與發(fā)展
        1.2 青海藏綿羊的類型與分布
        1.3 青海藏綿羊的生活習(xí)性
        1.4 青海藏綿羊圍產(chǎn)期常見(jiàn)的疾病
    2 藏綿羊子宮內(nèi)膜炎的研究
        2.1 子宮內(nèi)膜炎的致病機(jī)理
        2.2 藏綿羊子宮內(nèi)膜炎的分類
            2.2.1 急性子宮內(nèi)膜炎
            2.2.2 慢性化膿性子宮內(nèi)膜炎
            2.2.3 慢性卡他性子宮內(nèi)膜炎
            2.2.4 隱性子宮內(nèi)膜炎
        2.3 藏綿羊子宮內(nèi)膜炎主要致病菌
            2.3.1 無(wú)乳鏈球菌
            2.3.2 大腸桿菌
            2.3.3 金黃色葡萄球菌
            2.3.4 化膿隱秘桿菌
            2.3.5 沙門(mén)氏菌
            2.3.6 其他的病原菌
        2.4 羊子宮內(nèi)膜炎主要致病菌檢測(cè)方法
            2.4.1 傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)分離與鑒定法
            2.4.2 酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定法
            2.4.3 聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)
            2.4.4 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)
            2.4.5 核酸探針技術(shù)
            2.4.6 基因芯片
        2.5 羊子宮內(nèi)膜炎的治療
            2.5.1 西藥配合激素療法
            2.5.2 生物學(xué)療法
            2.5.3 中醫(yī)療法
            2.5.4 其他防控對(duì)策
    3 研究的目的與意義
第二部分 試驗(yàn)研究
    試驗(yàn)一 藏綿羊子宮內(nèi)膜炎單一PCR的建立與應(yīng)用
        1 試驗(yàn)材料與方法
            1.1 標(biāo)準(zhǔn)菌株
            1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 試劑的配制
            1.5 試驗(yàn)樣品
            1.6 標(biāo)準(zhǔn)菌株的培養(yǎng)
            1.7 基因組的提取
            1.8 引物的篩選與合成
            1.9 單一PCR檢測(cè)的特異性試驗(yàn)
            1.10 單一PCR檢測(cè)的靈敏性試驗(yàn)
                1.10.1 活菌計(jì)數(shù)法
                1.10.2 單一PCR靈敏的性檢測(cè)
            1.11 單一PCR檢測(cè)方法的應(yīng)用
        2 結(jié)果
            2.1 PCR引物特異性檢測(cè)
                2.1.1 金黃色葡萄球菌引物特異性檢測(cè)
                2.1.2 化膿隱秘桿菌引物特異性檢測(cè)
                2.1.3 沙門(mén)氏菌引物特異性檢測(cè)
                2.1.4 無(wú)乳鏈球菌引物特異性檢測(cè)
                2.1.5 大腸桿菌特異性結(jié)果
            2.2 單一PCR靈敏性試驗(yàn)
            2.3 單一PCR檢測(cè)樣品的結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    試驗(yàn)二 藏綿羊子宮內(nèi)膜炎多重PCR的建立及應(yīng)用
        1 材料與方法
            1.1 標(biāo)準(zhǔn)菌株
            1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
            1.3 試驗(yàn)樣品
        2 試驗(yàn)方法
            2.1 PCR反應(yīng)條件及體系的建立
            2.2 多重PCR敏感度測(cè)定
            2.3 多重PCR檢測(cè)方法的應(yīng)用
        3 結(jié)果
            3.1 多重PCR反應(yīng)體系的結(jié)果
            3.2 多重PCR靈敏性試驗(yàn)
            3.3 多重PCR法的應(yīng)用
            3.4 多重PCR與單一PCR檢測(cè)的符合率
        4 討論
        5 小結(jié)
    試驗(yàn)三 藏綿羊子宮內(nèi)膜炎主要病原菌的分離與鑒定
        1 試驗(yàn)材料與方法
            1.1 主要儀器
            1.2 主要試劑
            1.3 試劑的配置
            1.4 試驗(yàn)樣品
            1.5 病原菌的分離培養(yǎng)
            1.6 病原菌的生化鑒定
        2 病原菌分離結(jié)果
            2.1 病原菌的分離和鏡檢結(jié)果
            2.2 病原菌菌株的分離結(jié)果
            2.3 病原菌的生化鑒定結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
在讀期間發(fā)表論文和研究成果等
導(dǎo)師簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]一例雛鴨大腸桿菌與金黃色葡萄球菌混合感染的分離鑒定與耐藥性研究[J]. 張曉梅,孫培明.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2020(07)
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[3]利用高密度基因芯片開(kāi)展灘羊群體親緣關(guān)系遺傳分析[J]. 馬麗娜,馬青.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2020(03)
[4]芯片技術(shù)在畜禽育種中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 馬麗娜,劉永進(jìn),王錦,趙正偉,馬青.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2020(01)
[5]分子生物學(xué)技術(shù)在食品微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J]. 張悅,王靜怡.  現(xiàn)代食品. 2020(01)
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[9]歐拉型藏羊母羊繁殖性能分析[J]. 后永貴.  中國(guó)畜禽種業(yè). 2019(12)
[10]7例犬子宮蓄膿病例的病原菌分離鑒定[J]. 陳詩(shī)涵,魏潤(rùn)宇,李軍朝,管飄萍,黃紫貝,王彥紅,張信軍,王海燕,劉文博.  中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2019(12)

博士論文
[1]藏綿羊HMOX1和HMOX2基因克隆、表達(dá)及其與耐低氧適應(yīng)關(guān)聯(lián)性研究[D]. 何建文.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]不同品種牛群子宮內(nèi)膜炎流行病學(xué)調(diào)查及其SNP差異分析[D]. 牛暉.吉林大學(xué) 2016
[3]內(nèi)蒙古地區(qū)奶牛臨床型子宮內(nèi)膜炎致病葡萄球菌超抗原基因分布、耐藥性及分型研究[D]. 趙俊利.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]奶牛臨床型子宮內(nèi)膜炎主要致病菌的分離鑒定及多重PCR檢測(cè)方法的建立[D]. 王寧寧.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2019
[2]貂源肺炎雙球菌和金黃色葡萄球菌的毒力基因檢測(cè)及其致病性研究[D]. 商園園.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[3]基于SSR標(biāo)記評(píng)估青海省家牦牛和藏綿羊遺傳多樣性及近交程度[D]. 王秀蓉.青海師范大學(xué) 2019
[4]發(fā)酵乳桿菌對(duì)LTA誘導(dǎo)的牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞炎性損傷干預(yù)作用的研究[D]. 王佳美.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[5]發(fā)酵乳桿菌對(duì)LPS誘導(dǎo)的牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞炎性損傷調(diào)節(jié)作用的研究[D]. 李美琦.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[6]高原牧區(qū)藏綿羊睪丸及山羊隱睪免疫相關(guān)調(diào)節(jié)因子的表達(dá)及分布初步研究[D]. 宋笑.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[7]隴西縣奶牛子宮內(nèi)膜炎流行病學(xué)調(diào)查與主要致病菌分離鑒定和藥敏試驗(yàn)[D]. 孟彥軍.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[8]致病性牛源大腸桿菌毒力基因分子流行病學(xué)調(diào)查和耐藥突變選擇窗的應(yīng)用[D]. 宋美英.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[9]金黃色葡萄球菌和大腸桿菌感染子宮的機(jī)制研究[D]. 楊黎明.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[10]高寒草甸天然牧草和栽培草地燕麥對(duì)藏綿羊消化代謝的影響[D]. 李福厚.蘭州大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3688051