發(fā)布時間：2022-10-08 16:12

　　由于抗生素具有抑菌和殺菌作用,在蜂業(yè)養(yǎng)殖中常被非法使用,導(dǎo)致消費(fèi)者可能長期低劑量攝入抗生素危害健康。因此,本文基于核酸適配體與目標(biāo)物的特異性識別,分別建立了針對氯霉素（CAP）和四環(huán)素（TC）的熒光檢測方法,并用于蜂蜜中CAP與TC的檢測。論文主要內(nèi)容如下:第一部分,基于核酸適配體與可調(diào)節(jié)催化活性的氯化血紅素模擬酶檢測蜂蜜中CAP。氯化血紅素（hemin）單體催化活性高,可以催化過氧化氫（H₂O₂）氧化酪胺產(chǎn)生熒光,而hemin二聚體催化活性低無法進(jìn)行有效催化反應(yīng)。將hemin單體分別修飾在CAP適配體的3’端及適配體互補(bǔ)鏈的5’端,由于形成雙鏈結(jié)構(gòu),使hemin形成二聚體。當(dāng)CAP存在時,適配體與CAP結(jié)合,雙鏈解離,hemin二聚體分離成為單體形態(tài),可催化酪胺氧化而產(chǎn)生熒光,以320 nm為激發(fā)波長,通過在410 nm處測定溶液的熒光強(qiáng)度可對CAP進(jìn)行定量檢測。在優(yōu)化條件下,CAP的檢測線性范圍為0.1~10 ng mL^-1,檢出限為0.07 ng mL^-1。將此方法用于蜂蜜中CAP的檢測,加標(biāo)... 

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 抗生素及其檢測方法
        1.1.1 氯霉素和四環(huán)素
        1.1.2 氯霉素和四環(huán)素的檢測方法
    1.2 核酸適配體
    1.3 四面體DNA納米結(jié)構(gòu)
    1.4 過氧化物模擬酶
        1.4.1 過氧化物模擬酶簡介
        1.4.2 氯化血紅素(hemin)
    1.5 論文立意及研究內(nèi)容
        1.5.1 論文立意
        1.5.2 研究內(nèi)容
第2章 基于可調(diào)節(jié)催化活性的模擬酶與核酸適配體檢測蜂蜜中氯霉素
    2.1 引言
    2.2 試驗(yàn)部分
        2.2.1 主要試劑與儀器
        2.2.2 P1-P2 雙鏈DNA合成
        2.2.3 氯霉素檢測
        2.2.4 選擇性
        2.2.5 實(shí)際樣品檢測及方法驗(yàn)證
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 檢測原理
        2.3.3 檢測條件優(yōu)化
        2.3.4 線性范圍
        2.3.5 選擇性
        2.3.6 蜂蜜樣品檢測與ELISA試劑盒檢測
    2.4 本章小結(jié)
第3章 構(gòu)建基于四面體DNA納米結(jié)構(gòu)修飾的磁性微球用于目標(biāo)DNA的檢測
    3.1 引言
    3.2 試驗(yàn)部分
        3.2.1 主要試劑與儀器
        3.2.2 四面體DNA結(jié)構(gòu)合成
        3.2.3 適配體與磁性微球的連接及密度測定
        3.2.4 目標(biāo)DNA檢測
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 檢測原理
        3.3.2 四面體DNA結(jié)構(gòu)合成
        3.3.3 檢測適配體的表征及密度測定
        3.3.4 HCR反應(yīng)表征
        3.3.5 檢測時間比較
        3.3.6 檢測抗干擾能力比較
        3.3.7 檢測靈敏度比較
    3.4 本章小結(jié)
第4 章四面體DNA納米結(jié)構(gòu)修飾的磁性微球用于蜂蜜中四環(huán)素的檢測
    4.1 引言
    4.2 試驗(yàn)部分
        4.2.1 主要試劑與儀器
        4.2.2 四面體DNA結(jié)構(gòu)合成
        4.2.3 磁性微球表面四面體DNA連接及密度測定
        4.2.4 四環(huán)素檢測
        4.2.5 選擇性試驗(yàn)
        4.2.6 實(shí)際樣品檢測與ELISA試劑盒驗(yàn)證
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.0 檢測原理
        4.3.1 四面體DNA結(jié)構(gòu)合成及表征
        4.3.2 熒光顯微鏡表征HCR反應(yīng)
        4.3.3 檢測條件優(yōu)化
        4.3.4 線性范圍
        4.3.5 選擇性
        4.3.6 蜂蜜樣品四環(huán)素的檢測
    4.4 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
    5.3 創(chuàng)新點(diǎn)
致謝
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的適配體傳感器用于卡那霉素的比色檢測[J]. 田潤,陶晴,卞曉軍,朱福琳,顏娟.  分析化學(xué). 2020(05)
[2]功能化核酸適體檢測氯霉素可行性研究[J]. 陳盼,禹思宇,胡憶文,唐連飛,譚建錫.  食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2020(01)
[3]環(huán)丙沙星-固體脂質(zhì)納米粒的制備及抗菌效果[J]. 陳勝廣,馬俊花,王菁楠,朱鴻玲,顧明君.  同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2019(06)
[4]高效液相色譜法測定地表水中四環(huán)素類抗生素[J]. 周晚晴,黃金飛,金小玲,李鍵,盧湞樂,葉明立,陳梅蘭.  化學(xué)試劑. 2020(02)
[5]超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定雞肉中四環(huán)素類和喹諾酮類抗生素含量[J]. 張昆侖,陳曉明,張曉光,虞震,劉玉嬌.  食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2019(22)
[6]基于核酸適配體的電化學(xué)法檢測鉛離子[J]. 高金娥,戴先凱.  食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2019(18)
[7]基于G-四鏈體-氯化血紅素DNA酶比色法測定銀離子和汞離子傳感器的構(gòu)筑[J]. 肖志友,司恒丹,鄧蘭清,龍麗,居榮梅,張鑫,劉益飛.  分析測試學(xué)報. 2019(07)
[8]以氯化血紅素作為指示劑的Hg2+電化學(xué)傳感器的制備與應(yīng)用[J]. 陳碧嬌,李曉燕,牛燕燕,謝慧,羅貴鈴,習(xí)亞茹,熊懿,孫偉.  山東化工. 2019(07)
[9]一種高靈敏檢測貝類中大田軟海綿酸的可拋式核酸適配體傳感器[J]. 陳佳琦,吳海燕,張旭志,鄭關(guān)超,孫曉杰,郭萌萌,譚志軍,翟毓秀,牟海津.  分析化學(xué). 2019(06)
[10]氯霉素單克隆抗體的制備及ELISA檢測方法的建立[J]. 范素菊,楊興東,高潤.  中國畜牧獸醫(yī). 2018(09)



本文編號：3688021