目前豬的卵母細(xì)胞在體外成熟的效率較低、質(zhì)量較差,導(dǎo)致后期胚胎體外生產(chǎn)的發(fā)育效率低下,嚴(yán)重影響了克隆技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)模型和動(dòng)物繁殖等領(lǐng)域中的應(yīng)用。卵母細(xì)胞體外成熟是體細(xì)胞核移植、體外受精等技術(shù)的主要環(huán)節(jié),制約著后期胚胎發(fā)育的生產(chǎn)效率,對(duì)胚胎發(fā)育的影響至關(guān)重要。本實(shí)驗(yàn)主要以豬卵母細(xì)胞和孤雌激活（PA）、體細(xì)胞核移植（SCNT）、體外受精（IVF）囊胚為研究對(duì)象,旨在探究體外培養(yǎng)體系中,維生素A（VtiaminA,VA）對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟及其胚胎早期發(fā)育的影響。首先,本實(shí)驗(yàn)對(duì)豬卵母細(xì)胞培養(yǎng)基中所添加的VA濃度進(jìn)行了優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)20μg/ml的VA能顯著提高豬卵母細(xì)胞的體外成熟率（75%±2.13%vs 52%±3.26%）（***P<0.01,差異極顯著）。除此之外,還發(fā)現(xiàn)VA添加組中MⅡ期卵母細(xì)胞內(nèi)RAR基因和GSH基因的轉(zhuǎn)錄水平均顯著高于對(duì)照組。成熟后卵母細(xì)胞的免疫熒光染色結(jié)果進(jìn)一步證實(shí),VA添加組MⅡ期細(xì)胞內(nèi)的ROS和GSH的抗氧化水平顯著高于對(duì)照組。基于上述結(jié)果,本實(shí)驗(yàn)接著用VA對(duì)PA、SCNT、IVF早期胚胎的卵裂率、囊胚率的影響進(jìn)行了深入研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,孤雌胚胎V... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

VA對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟的影響（n=3）

22圖1.2VB6對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟的影響（n=3）Figure1.2EffectofVB6onthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.3VC對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟的影響當(dāng)向IVM成熟液里添加濃度分別為20μg/ml、35μg/ml、50μg/ml和65μg/ml的VC時(shí)，38.5℃恒溫培養(yǎng)43h后，鏡下觀察及統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖1.3所示，VC添加的不用濃度組均對(duì)卵母細(xì)胞的成熟沒(méi)有顯著影響。圖1.3VC對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟的影響（n=3）Figure1.3EffectofVConthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.4VD對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟的影響類似的，當(dāng)將不同濃度VD加入IVM成熟液中，38.5℃培養(yǎng)43h后發(fā)現(xiàn)，低濃度的VD引入能促進(jìn)卵母細(xì)胞的成熟，其中當(dāng)VD添加濃度為25μg/ml時(shí)對(duì)卵母細(xì)胞的成熟具有顯著的促進(jìn)作用（圖1.4，*p<0.05，差異顯著）。

22圖1.2VB6對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟的影響（n=3）Figure1.2EffectofVB6onthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.3VC對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟的影響當(dāng)向IVM成熟液里添加濃度分別為20μg/ml、35μg/ml、50μg/ml和65μg/ml的VC時(shí)，38.5℃恒溫培養(yǎng)43h后，鏡下觀察及統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖1.3所示，VC添加的不用濃度組均對(duì)卵母細(xì)胞的成熟沒(méi)有顯著影響。圖1.3VC對(duì)豬卵母細(xì)胞體外成熟的影響（n=3）Figure1.3EffectofVConthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.4VD對(duì)卵母細(xì)胞體外成熟的影響類似的，當(dāng)將不同濃度VD加入IVM成熟液中，38.5℃培養(yǎng)43h后發(fā)現(xiàn)，低濃度的VD引入能促進(jìn)卵母細(xì)胞的成熟，其中當(dāng)VD添加濃度為25μg/ml時(shí)對(duì)卵母細(xì)胞的成熟具有顯著的促進(jìn)作用（圖1.4，*p<0.05，差異顯著）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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