目前豬的卵母細胞在體外成熟的效率較低、質(zhì)量較差,導致后期胚胎體外生產(chǎn)的發(fā)育效率低下,嚴重影響了克隆技術(shù)在生物醫(yī)學模型和動物繁殖等領(lǐng)域中的應(yīng)用。卵母細胞體外成熟是體細胞核移植、體外受精等技術(shù)的主要環(huán)節(jié),制約著后期胚胎發(fā)育的生產(chǎn)效率,對胚胎發(fā)育的影響至關(guān)重要。本實驗主要以豬卵母細胞和孤雌激活（PA）、體細胞核移植（SCNT）、體外受精（IVF）囊胚為研究對象,旨在探究體外培養(yǎng)體系中,維生素A（VtiaminA,VA）對卵母細胞體外成熟及其胚胎早期發(fā)育的影響。首先,本實驗對豬卵母細胞培養(yǎng)基中所添加的VA濃度進行了優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)20μg/ml的VA能顯著提高豬卵母細胞的體外成熟率（75%±2.13%vs 52%±3.26%）（***P<0.01,差異極顯著）。除此之外,還發(fā)現(xiàn)VA添加組中MⅡ期卵母細胞內(nèi)RAR基因和GSH基因的轉(zhuǎn)錄水平均顯著高于對照組。成熟后卵母細胞的免疫熒光染色結(jié)果進一步證實,VA添加組MⅡ期細胞內(nèi)的ROS和GSH的抗氧化水平顯著高于對照組。基于上述結(jié)果,本實驗接著用VA對PA、SCNT、IVF早期胚胎的卵裂率、囊胚率的影響進行了深入研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組相比,孤雌胚胎V... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

VA對豬卵母細胞體外成熟的影響（n=3）

22圖1.2VB6對豬卵母細胞體外成熟的影響（n=3）Figure1.2EffectofVB6onthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.3VC對卵母細胞體外成熟的影響當向IVM成熟液里添加濃度分別為20μg/ml、35μg/ml、50μg/ml和65μg/ml的VC時，38.5℃恒溫培養(yǎng)43h后，鏡下觀察及統(tǒng)計結(jié)果如圖1.3所示，VC添加的不用濃度組均對卵母細胞的成熟沒有顯著影響。圖1.3VC對豬卵母細胞體外成熟的影響（n=3）Figure1.3EffectofVConthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.4VD對卵母細胞體外成熟的影響類似的，當將不同濃度VD加入IVM成熟液中，38.5℃培養(yǎng)43h后發(fā)現(xiàn)，低濃度的VD引入能促進卵母細胞的成熟，其中當VD添加濃度為25μg/ml時對卵母細胞的成熟具有顯著的促進作用（圖1.4，*p<0.05，差異顯著）。

22圖1.2VB6對豬卵母細胞體外成熟的影響（n=3）Figure1.2EffectofVB6onthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.3VC對卵母細胞體外成熟的影響當向IVM成熟液里添加濃度分別為20μg/ml、35μg/ml、50μg/ml和65μg/ml的VC時，38.5℃恒溫培養(yǎng)43h后，鏡下觀察及統(tǒng)計結(jié)果如圖1.3所示，VC添加的不用濃度組均對卵母細胞的成熟沒有顯著影響。圖1.3VC對豬卵母細胞體外成熟的影響（n=3）Figure1.3EffectofVConthematurationofporcineoocytesinvitro（n=3）1.3.1.4VD對卵母細胞體外成熟的影響類似的，當將不同濃度VD加入IVM成熟液中，38.5℃培養(yǎng)43h后發(fā)現(xiàn)，低濃度的VD引入能促進卵母細胞的成熟，其中當VD添加濃度為25μg/ml時對卵母細胞的成熟具有顯著的促進作用（圖1.4，*p<0.05，差異顯著）。

【參考文獻】：
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碩士論文
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本文編號：3583923