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煙草白星病的病原學及生防菌篩選

發(fā)布時間:2017-05-06 15:16

  本文關鍵詞:煙草白星病的病原學及生防菌篩選,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:煙草白星病(Phyllosticta nicotianae Ell.et EV)又叫煙草斑點病,與煙草蛙眼病、黑斑病以及氣候斑點病極為相似,不易區(qū)分且易混生。煙草白星病的病原(Phyllosticta nicotianae)一直以來被認為是葉點霉,而葉點霉和莖點霉屬于真菌中的半知菌亞門、腔孢綱、球殼孢目的兩個屬。二者形態(tài)差異很小,分屬界定標準較模糊,種類鑒定較困難。兩屬的傳統(tǒng)分類依據(jù)主要是以寄生部位進行劃分,寄生在葉片上的為葉點霉(Phyllosticta)、寄生在葉以外的為莖點霉(Phoma),但實際鑒定中,常遇到同一種Phyllosticta或Phoma既寄生在葉片上又寄生在莖、果實等其它部位的情況,因此很難斷定該病菌是屬于Phyllosticta還是Phoma,對此,前人也鮮有研究報道。本文采用傳統(tǒng)的真菌形態(tài)學鑒定法及分子生物學鑒定法,對采自6個煙草主產(chǎn)區(qū)的病樣進行了病原菌分離鑒定,以及病原菌的生物學特性研究和拮抗菌的篩選。旨為查明煙草白星病病原菌的分類地位,為煙草白星病的防治提供理論依據(jù)。研究結果如下:(1)煙草白星病病原菌的分離與鑒定:采用對染病葉片單斑進行分離、純化,對分離菌株致病性測定、形態(tài)學鑒定及分子生物學鑒定等研究法,對采自于遼寧、黑龍江、廣西等6個煙草主產(chǎn)區(qū)的具有煙草白星病癥狀的病樣進行了病原菌分離鑒定。依據(jù)形態(tài)學鑒定法從300多個樣品中共分離出31株疑似菌株。通過分子生物學鑒定結果表明,菌株間的its序列差異較小、相似度較高;NCBI比對聚類分析表明,5株是莖點霉屬(Phoma.sp)、2組為擬莖點霉屬(Phomasis.sp),1組為葉點霉(Phyllosticta.sp),都屬于未定種,進而通過β-tubulin測定的結果為5株是莖點霉屬(Phoma),分離菌致病性測定結果表明他們均具有致病性。(2)病原菌的生物學特性研究:煙草白星病病原菌適宜的培養(yǎng)基是OA和PDA;最適pH值為5.0-7.0;溫度為4-35℃的范圍內(nèi)均可生長,25℃左右產(chǎn)孢量最多、孢子萌發(fā)率最大,當溫度為40℃不再產(chǎn)孢;光照對病原菌直徑大小影響不大,但光暗交替利于產(chǎn)孢。(3)拮抗菌的篩選及抑菌效果:從煙草根際土壤中分離純化得到20株真菌和14株細菌,其中有9株真菌和1株細菌對煙草白星病病菌具有明顯的抑菌作用。采用五點對峙法,以9株真菌、1株細菌和5種農(nóng)藥(甲基托布津、多菌靈、多菌清、百菌清和惡霉靈)對煙草白星病病原菌進行了抑菌活性檢測,結果表明:真菌M7、M8、M9以及有效濃度為25 mg/μl的多菌清具有較好的抑菌效果,他們可使病原菌的菌落不擴展。
【關鍵詞】:煙草白星病 病原菌鑒定 拮抗菌篩選
【學位授予單位】:遼寧師范大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:S435.72;S476.1
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-9
  • 引言9-11
  • 1 文獻綜述11-17
  • 1.1 煙草的現(xiàn)狀11
  • 1.2 煙草主要病害與防治11-14
  • 1.2.1 煙草白星病病害癥狀11-12
  • 1.2.2 煙草白星病病的防治12-13
  • 1.2.3 煙草生長發(fā)育期的其他葉斑病13-14
  • 1.3 莖點霉屬和葉點霉屬14-15
  • 1.3.1 莖點霉屬和葉點霉屬的分類與區(qū)別14-15
  • 1.3.2 莖點霉的寄主范圍15
  • 1.4 分子鑒定15
  • 1.5 論文研究內(nèi)容及目的、意義15-17
  • 1.5.1 論文研究內(nèi)容15-16
  • 1.5.2 論文研究目的及意義16-17
  • 2 煙草白星病病原菌的鑒定17-34
  • 2.1 材料與方法17-22
  • 2.1.1 實驗材料17-18
  • 2.1.2 實驗方法18-22
  • 2.2 結果與分析22-32
  • 2.2.1 菌種的分離純化與保存22-23
  • 2.2.2 分離菌株的形態(tài)學鑒定23-24
  • 2.2.3 分離菌株的分子生物學鑒定24-31
  • 2.2.4 分離菌株的侵染性檢測31-32
  • 2.3 結論與討論32-34
  • 2.3.1 結論32
  • 2.3.2 討論32-34
  • 3 煙草白星病病原菌的生物學特性研究34-42
  • 3.1 材料與方法34-36
  • 3.1.1 材料34
  • 3.1.2 方法34-36
  • 3.2 結果與分析36-40
  • 3.2.1 不同培養(yǎng)基對煙草白星病病原菌的影響36
  • 3.2.2 pH值對病原菌菌落直徑的影響36-37
  • 3.2.3 溫度對病原菌菌落直徑的影響37-39
  • 3.2.4 光照對病原菌菌落直徑的影響39
  • 3.2.5 濕度對病原菌致病的影響39-40
  • 3.3 結論與討論40-42
  • 3.3.1 結論40
  • 3.3.2 討論40-42
  • 4 煙草白星病病原拮抗菌的篩選及藥劑抑菌實驗42-48
  • 4.1.材料與方法42-43
  • 4.1.1 材料:42
  • 4.1.2 方法42-43
  • 4.2.結果與分析43-46
  • 4.2.1 拮抗菌的形態(tài)觀察43-44
  • 4.2.2 拮抗菌的抑菌率44-45
  • 4.2.3 藥劑對煙草白星病病原菌的抑菌效果45-46
  • 4.3 結論與討論46-48
  • 4.3.1 結論46-47
  • 4.3.2 討論47-48
  • 結論48-49
  • 參考文獻49-52
  • 附錄Ⅰ rDNA-ITS測序結果52-61
  • 附錄Ⅱ rDNA-β-tubulin測序結果61-63
  • 攻讀碩士學位期間發(fā)表學術論文情況63-64
  • 致謝64-65

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本文編號:348663

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