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斑節(jié)對蝦Toll9受體基因信號調(diào)控功能及免疫特性分析

發(fā)布時間:2021-09-06 04:32
  斑節(jié)對蝦是沿海地區(qū)重要水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一,對于水產(chǎn)經(jīng)濟的發(fā)展貢獻(xiàn)極大。由于養(yǎng)殖環(huán)境惡化及各類病毒、細(xì)菌性疾病的爆發(fā),斑節(jié)對蝦養(yǎng)殖所面臨的挑戰(zhàn)前所未有的嚴(yán)峻。通過了解其先天性免疫防御機制,采取有效手段增強其抗病力是重要的解決方法。作為無脊椎生物,對蝦主要依靠先天性免疫途徑來進(jìn)行免疫調(diào)控與防御,而Toll樣受體是對蝦先天性免疫系統(tǒng)的重要組成部分。Toll樣受體是先天性免疫模式識別受體(pattern recognition receptor,PRR)中重要一員,主要免疫方式是通過抵御外源病原微生物的入侵進(jìn)而發(fā)揮免疫功能。Toll樣受體可識別特異性病原相關(guān)分子模式(Pathogen associated molecular pattern,PAMP),可將病原感染信號轉(zhuǎn)入胞內(nèi),形成信號級聯(lián)反應(yīng)再傳遞到核內(nèi),實現(xiàn)各類免疫分子的轉(zhuǎn)錄、表達(dá)與釋放,并顯著激活先天性免疫系統(tǒng)。斑節(jié)對蝦Toll受體免疫機制的研究有助于深入了解對蝦抵御病原反應(yīng)的具體機制。本研究以斑節(jié)對蝦Toll9基因ORF全長為模板,首次以哺乳動物細(xì)胞和果蠅細(xì)胞構(gòu)建免疫模型來探究PmToll9對于TLR/Toll信號通路的調(diào)控及應(yīng)對病原的... 

【文章來源】:上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】:109 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

斑節(jié)對蝦Toll9受體基因信號調(diào)控功能及免疫特性分析


果蠅免疫應(yīng)答信號通路示意圖(引自鄭路平,于淼,鄒向陽,等[19]

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑


上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文MyD88 非依賴性途徑可在 LPS 誘導(dǎo)下唄激發(fā),促進(jìn)糖皮質(zhì)激素衰減反應(yīng)基因-16、干擾素調(diào)節(jié)基因-1 表達(dá)和成熟。LPS 刺激后,使轉(zhuǎn)錄因子干擾素調(diào)節(jié)因子 3(interferon regulate factor 3,IRF3)活化,誘導(dǎo) IFN-β 表達(dá)。IFN-β 再依次激活 Stat1,進(jìn)而導(dǎo)致其他 IFN 誘導(dǎo)的基因的表達(dá)。另有研究認(rèn)為 TIRAP/MAL 參與活化 LPS誘導(dǎo)的 MyD88 非依賴途徑。TIRAP 作為 MyD88 樣適配蛋白(MyD88-adaptor-like,MAL),通過指導(dǎo)自身的 TIR 結(jié)構(gòu)域結(jié)合 TLR4 的 TIR 結(jié)構(gòu)域形成復(fù)合體,最終都要激活 NF-κB 或絲裂原活化蛋白激酶[46]。不同于 MyD88,目前發(fā)現(xiàn) TIRAP 只能參與 TLR4、TLR2、TLR1、TLR6 等分子的信號通路,介導(dǎo)信號傳遞[47,48]。

序列,系統(tǒng)進(jìn)化樹


圖 2-1 PmToll9 系統(tǒng)進(jìn)化樹Figure 2-1 The phylogenetic tree of PmToll9 with multiple species2.3.1.2 PmToll9 空間構(gòu)型從斑節(jié)對蝦組織內(nèi)擴增獲得了 PmToll9 序列全長(NCBI 登陸號為KY438975)。PmToll9 二維結(jié)構(gòu)預(yù)測結(jié)果顯示無規(guī)則卷曲結(jié)構(gòu)占據(jù)比例最高(達(dá)53.8%),α 螺旋占 27.68%,β 折疊占 15.25%(未展示)。利用 SWISS-MODEL網(wǎng)頁和 Pymol 軟件進(jìn)行三維結(jié)構(gòu)模型構(gòu)建,結(jié)果顯示 PmToll9 胞外區(qū)有 12 個亮氨酸富集區(qū)(LRRs),不含信號肽序列,但是含有 12 個 N-糖基化預(yù)測位點,119個潛在的磷酸化預(yù)測位點。類似于哺乳動物 TLRs,PmToll9 空間結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)為馬蹄型結(jié)構(gòu),其凹面區(qū)形成一個光滑的彎曲狀的 β 折疊結(jié)構(gòu)。PmToll9 的 N 端緊隨的是LRRs 區(qū)域,緊鄰 LRRs 區(qū)域的是 C 端“帽子”結(jié)構(gòu),并與跨膜區(qū)相連(見圖 2-2)。C端結(jié)構(gòu)與跨膜區(qū)之間的聯(lián)系在某種意義上被認(rèn)為在PmToll9細(xì)胞定位過程中發(fā)揮

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
[1]馬氏珠母貝熱休克蛋白和Toll樣受體基因的克隆與表達(dá)研究[D]. 王志新.廣東海洋大學(xué) 2014
[2]果蠅先天性免疫Toll與Imd信號通路相關(guān)基因進(jìn)化機制研究[D]. 韓明.南京師范大學(xué) 2014
[3]凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)C-型凝集素免疫作用機制的研究[D]. 于金紅.中國海洋大學(xué) 2013
[4]斑節(jié)對蝦TLR22及Relish基因的克隆與表達(dá)分析[D]. 劉文靜.上海海洋大學(xué) 2012
[5]中國明對蝦Toll樣受體基因的克隆和表達(dá)分析[D]. 楊昌健.中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2008
[6]海灣扇貝和櫛孔扇貝EST分析及C型凝集素基因的克隆與分析[D]. 胥煒.中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所) 2004



本文編號:3386754

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