綿羊尾型是養(yǎng)羊業(yè)一個重要的經(jīng)濟(jì)性狀,本文以四種尾型綿羊[長脂尾型的灘羊（Tan）、短脂尾型的小尾寒羊（STH）、長瘦尾型的甘肅高山細(xì)毛羊（GAF）以及短瘦尾型的藏綿羊（Tib）]為研究對象,利用分子生物學(xué)、形態(tài)學(xué)等方法從四種尾型綿羊尾部的形態(tài)學(xué)以及調(diào)控尾脂沉積相關(guān)基因的角度,分析脂尾羊及瘦尾羊的尾脂沉積性狀差異及其調(diào)控機(jī)理,并對關(guān)鍵基因進(jìn)行進(jìn)化和多態(tài)性研究,為進(jìn)一步認(rèn)識脂尾羊和瘦尾羊的遺傳分化關(guān)系奠定基礎(chǔ)。研究結(jié)果表明:（1）對于尾部表型來說,尾寬和尾厚與尾脂沉積呈正相關(guān)關(guān)系;（2）長尾型綿羊第一、二類尾椎總數(shù)一般為13枚,第三、四類尾椎總數(shù)由于退化程度不同其個體之間差異較大;短尾型綿羊第一、二類尾椎總數(shù)一般為9枚,第三、四類尾椎總數(shù)及退化程度個體差異較小;（3）不同尾型之間,椎體帶橫突寬與尾脂沉積量正相關(guān),且在長脂尾型綿羊（Tan）中寬度最大,在短瘦尾型綿羊（Tib）中寬度最小;（4）與瘦尾型綿羊相比,脂尾型綿羊主要通過增加脂肪細(xì)胞數(shù)目同時抑制脂降解途徑增加尾脂沉積;（5）脂代謝關(guān)鍵性基因PLIN1在脂尾型綿羊中存在脂溶性氨基酸由丙氨酸向纈氨酸的有義突變,其可能與其蛋白結(jié)構(gòu)與功能差異... 

【文章來源】：蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

試驗流程圖

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文綿羊尾形態(tài)結(jié)構(gòu)比較及其尾脂沉積相關(guān)基因的進(jìn)化關(guān)系研究162.3方法2.3.1尾部測量測定指標(biāo)包括胴體重、尾長、尾寬、尾厚和尾重，參考GB/T-17237-2008、GB/T-12694-2016、GB/T-51225-2017標(biāo)準(zhǔn)觀測四種不同尾型綿羊。胴體重：屠宰并放血，除去毛皮、內(nèi)臟、頭和蹄之后的重量。尾長：自然狀態(tài)下，綿羊活體尾根部至尾尖的垂直距離，利用卷尺測量。尾寬；自然狀態(tài)下，綿羊活體尾巴上部最寬處的水平距離，利用卷尺測量。尾厚：自然狀態(tài)下，綿羊活體最厚處的厚度，利用卷尺測量。尾重：屠宰后尾巴除去毛皮后的重量，利用電子天平測量。2.3.2尾椎CT掃描與三維重構(gòu)后測量（1）綿羊尾除去尾脂后利用蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院小動物輻照系統(tǒng)對尾椎進(jìn)行CT掃描，并利用Mimics20軟件對掃描得到的DCM格式的尾椎數(shù)據(jù)進(jìn)行降噪等處理后三維重構(gòu)分析。（2）對CT得到的尾椎掃描圖和三維重構(gòu)后的尾椎進(jìn)行測量并取平均值作為測量值，并且每種尾型綿羊隨機(jī)抽取一個樣本采用游標(biāo)卡尺對數(shù)據(jù)進(jìn)行檢驗。圖2-1尾椎測定模式圖Figure2-1caudalvertebrameasurementmodel

蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文綿羊尾形態(tài)結(jié)構(gòu)比較及其尾脂沉積相關(guān)基因的進(jìn)化關(guān)系研究18圖2-2細(xì)胞直徑測定模式圖Figure2-2Celldiametermeasurementmodel2.3.5RT-qPCR（1）總RNA提取所有與RNA提取相關(guān)的實驗器具均使用DEPC水洗凈高壓滅菌處理，槍頭、離心管等塑料制品均采用無RNA酶處理的產(chǎn)品，且提取過程在無菌臺中完成，并且離心都在4℃環(huán)境中進(jìn)行。a.將研缽用DEPC水潤洗浸泡1h，用錫紙完全包緊于烘箱160℃滅菌4h后,放置室溫冷卻，放入-20℃待用。b.去除研缽表面錫箔紙，倒入液氮預(yù)冷，待液氮不再劇烈沸騰時，加入0.1mg脂肪組織樣并快速充分研磨，期間補(bǔ)加液氮，保證樣品一直處于低溫中。c.在超凈工作臺中將完全研磨的樣品收集到無RNA酶的1.5mLEP管中，快速添加1mLTrizol并振蕩混勻。d.4℃離心機(jī)中12,000rpm離心10min。得到的溶液分三層，只取中間一層并移入新無RNA酶EP管中，添加200μL氯仿后振蕩混勻，直至溶液變?yōu)槿榘咨�，冰上靜置5min使得蛋白變性并與核酸分離。e.混勻，4℃離心機(jī)中12,000rpm離心10min。吸取500μL上清到新無RNA酶EP管，添加500μL異丙醇，上下顛倒數(shù)次后靜置10min。f.4℃，12,000rpm離心15min后棄去上清，保留沉淀（總RNA），添加1mL無水乙醇，輕彈起沉淀并懸浮于溶液中。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]5號染色體兩候選SNP基因定位以及與綿羊臀尾性狀的關(guān)聯(lián)分析[J]. 唐紅,徐夢思,孟季猛,周平,王立民,沈敏,高磊,石國慶,劉守仁,王新華,楊井泉,甘尚權(quán).  畜牧與獸醫(yī). 2016(09)
[2]不同尾型綿羊全基因組選擇信號檢測[J]. 劉真,王慧華,劉瑞鑿,吳明明,張淑珍,張莉,趙福平,杜立新,魏彩虹.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2015(10)
[3]MicroRNA調(diào)控動物脂肪細(xì)胞分化研究進(jìn)展[J]. 張進(jìn)威,羅毅,王宇豪,何劉軍,李明洲,王訊.  遺傳. 2015(12)
[4]肥胖的基礎(chǔ)研究[J]. 于進(jìn)海,周林康,吳麗貞,李蓬.  生命科學(xué). 2015(03)
[5]不同日齡阿勒泰大尾羊脂肪組織形態(tài)學(xué)及血脂指標(biāo)的比較[J]. 王金泉,王肖燕,臧長江,劉武軍,彭華剛,王琦,岳曉帆,姚剛.  中國畜牧獸醫(yī). 2014(12)
[6]蘭州大尾羊尾巴的形態(tài)特征與斷尾方法研究[J]. 閆振龍,溫建維,趙生國,朱燦燦,李路,韓志磊,王白雪,劉英,吳建平.  甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2014(06)
[7]脂肪組織冰凍切片油紅O滴染法的建立[J]. 王肖燕,王金泉,姚剛,張繼紅.  家畜生態(tài)學(xué)報. 2014(08)
[8]Distinction of white,beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells[J]. Anna Park,Won Kon Kim,Kwang-Hee Bae.  World Journal of Stem Cells. 2014(01)
[9]X染色體60149273位點在脂尾（臀）和瘦尾綿羊品種中的多態(tài)性及其基因定位[J]. 甘尚權(quán),沈敏,李歡,梁耀偉,楊井泉,高磊,劉守仁,王新華.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(22)
[10]綿羊X染色體59571364與59912586位點在脂尾、瘦尾綿羊群體中的多態(tài)性檢測及分析[J]. 張偉,沈敏,李歡,高磊,梁耀偉,楊井泉,劉守仁,王新華,甘尚權(quán).  遺傳. 2013(12)

博士論文
[1]不同尾型綿羊全基因組關(guān)聯(lián)分析、拷貝數(shù)變異及選擇信號檢測[D]. 朱才業(yè).中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]脂尾型綿羊尾部脂肪富集的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 韓吉龍.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]C57BL/6J小鼠白色脂肪與棕色脂肪組織蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 李娟.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2015
[4]肥胖與非肥胖男性內(nèi)臟及皮下脂肪差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 周姝含.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2012

碩士論文
[1]秦川�；蚪M遺傳變異及其與脊椎數(shù)的關(guān)系研究[D]. 奚玉蓮.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[2]烏珠穆沁羊羊尾的理化分析及羊油皂的研發(fā)[D]. 李響.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號：3367344