我國(guó)是世界上番茄種植面積和產(chǎn)量最大的國(guó)家。近年來(lái),番茄土傳病害日益嚴(yán)重,已成為制約番茄生產(chǎn)的重要因素,番茄枯萎病是其中最為典型、最難防治、最為普遍的病害之一。常用的防控手段包括改良農(nóng)業(yè)措施、物理方法、施用化學(xué)藥劑等,防治效果皆不理想。生防芽孢桿菌因其能夠產(chǎn)生抑制病原菌的脂肽物質(zhì),芽孢桿菌能夠產(chǎn)生環(huán)境適應(yīng)能力較強(qiáng)的芽孢,芽孢可以在多種較為惡劣的環(huán)境下存在并發(fā)揮作用,以及芽孢桿菌具有多種不同的作用方式,成為生物防治策略中非常重要的一部分。本試驗(yàn)從健康的番茄植株根際土中篩選分離得到一株對(duì)番茄枯萎病病原菌有較強(qiáng)生防活性的解淀粉芽孢桿菌菌株SDTB009,通過(guò)活性鑒定,各項(xiàng)生理生化指標(biāo)鑒定,分子生物學(xué)鑒定,使用透射電子顯微鏡觀察其微觀形態(tài),對(duì)其分類地位明確到了種屬。測(cè)定得到SDTB009不同濃度的發(fā)酵液的抑菌活性,以及SDTB009發(fā)酵液的溫室、田間生防效果,評(píng)價(jià)了SDTB009與化學(xué)藥劑聯(lián)合施用的防治效果。同時(shí),還對(duì)SDTB009產(chǎn)生的脂肽物質(zhì)進(jìn)行了分離、純化、鑒定,初步明確了其防治番茄枯萎病的生防機(jī)制,為生物防治、降低目標(biāo)化學(xué)藥劑的用量,保障番茄產(chǎn)業(yè)能夠可持續(xù)發(fā)展,提供一定的理論依據(jù)。主要試... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

SDTB009與實(shí)驗(yàn)室前期分離得到的多種病原菌進(jìn)行對(duì)峙培養(yǎng)番茄青枯病煙草黑脛病黃瓜灰霉病

解淀粉芽孢桿菌SDTB009的分離鑒定及其對(duì)番茄枯萎病的防治研究22圖2生防菌株SDTB009及脂肽粗提物對(duì)尖孢鐮刀菌番茄�；偷钠桨逡种谱饔肍igure2PlateinhibitionofbiocontrolstrainSDTB009andcrudelipopeptideonFusariumoxysporumtomatospecialization圖A為使用對(duì)峙培養(yǎng)法測(cè)定抑制效果，圖B牛津杯中為200uL脂肽物質(zhì)抽提液。圖A、B為尖孢鐮刀菌生長(zhǎng)7d后抑制作用。圖C為空白對(duì)照。3.2SDTB009菌株的鑒定及其生理生化特性SDTB009菌落最初在LB平板上表現(xiàn)出光滑的表面，但幾天后，菌落的表面變得干燥、起皺。菌落呈乳白色和凸起，具有規(guī)則的邊緣（圖3）。通過(guò)JEM1400Plus透射電子顯微鏡觀察菌株SDTB009的形態(tài)（圖4），從圖4中觀察可發(fā)現(xiàn)，菌株SDTB009呈圓柱狀，具有較厚的莢膜，周生鞭毛，菌體較厚，電子束不易打透，無(wú)法形成透明清晰的內(nèi)部圖片。生物化學(xué)和生理學(xué)特征示于表中（表2）。解淀粉芽孢桿菌SDTB009為革蘭氏陽(yáng)性菌株，可以水解淀粉（圖5）且不能單一利用甲醇生長(zhǎng)。16SrDNA系統(tǒng)發(fā)育樹顯示菌株SDTB009與解淀粉芽孢桿菌（GenBank登錄號(hào)MG264882）聚類到同一分支（圖4）。基于gyrB基因序列分析，菌株解淀粉芽孢桿菌SDTB009顯示出與解淀粉芽孢桿菌（GenBank登錄號(hào)JN086142）聚類在同一分支（圖5）�？傊谏鲜鲂螒B(tài)學(xué)，生物化學(xué)和分子表征，菌株SDTB009被鑒定為解淀粉芽孢桿菌。圖3SDTB009平板劃線形態(tài)Figure3SDTB009platescribepatternABC

解淀粉芽孢桿菌SDTB009的分離鑒定及其對(duì)番茄枯萎病的防治研究22圖2生防菌株SDTB009及脂肽粗提物對(duì)尖孢鐮刀菌番茄專化型的平板抑制作用Figure2PlateinhibitionofbiocontrolstrainSDTB009andcrudelipopeptideonFusariumoxysporumtomatospecialization圖A為使用對(duì)峙培養(yǎng)法測(cè)定抑制效果，圖B牛津杯中為200uL脂肽物質(zhì)抽提液。圖A、B為尖孢鐮刀菌生長(zhǎng)7d后抑制作用。圖C為空白對(duì)照。3.2SDTB009菌株的鑒定及其生理生化特性SDTB009菌落最初在LB平板上表現(xiàn)出光滑的表面，但幾天后，菌落的表面變得干燥、起皺。菌落呈乳白色和凸起，具有規(guī)則的邊緣（圖3）。通過(guò)JEM1400Plus透射電子顯微鏡觀察菌株SDTB009的形態(tài)（圖4），從圖4中觀察可發(fā)現(xiàn)，菌株SDTB009呈圓柱狀，具有較厚的莢膜，周生鞭毛，菌體較厚，電子束不易打透，無(wú)法形成透明清晰的內(nèi)部圖片。生物化學(xué)和生理學(xué)特征示于表中（表2）。解淀粉芽孢桿菌SDTB009為革蘭氏陽(yáng)性菌株，可以水解淀粉（圖5）且不能單一利用甲醇生長(zhǎng)。16SrDNA系統(tǒng)發(fā)育樹顯示菌株SDTB009與解淀粉芽孢桿菌（GenBank登錄號(hào)MG264882）聚類到同一分支（圖4）�；趃yrB基因序列分析，菌株解淀粉芽孢桿菌SDTB009顯示出與解淀粉芽孢桿菌（GenBank登錄號(hào)JN086142）聚類在同一分支（圖5）。總之，基于上述形態(tài)學(xué)，生物化學(xué)和分子表征，菌株SDTB009被鑒定為解淀粉芽孢桿菌。圖3SDTB009平板劃線形態(tài)Figure3SDTB009platescribepatternABC


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