我國是世界上番茄種植面積和產(chǎn)量最大的國家。近年來,番茄土傳病害日益嚴(yán)重,已成為制約番茄生產(chǎn)的重要因素,番茄枯萎病是其中最為典型、最難防治、最為普遍的病害之一。常用的防控手段包括改良農(nóng)業(yè)措施、物理方法、施用化學(xué)藥劑等,防治效果皆不理想。生防芽孢桿菌因其能夠產(chǎn)生抑制病原菌的脂肽物質(zhì),芽孢桿菌能夠產(chǎn)生環(huán)境適應(yīng)能力較強(qiáng)的芽孢,芽孢可以在多種較為惡劣的環(huán)境下存在并發(fā)揮作用,以及芽孢桿菌具有多種不同的作用方式,成為生物防治策略中非常重要的一部分。本試驗從健康的番茄植株根際土中篩選分離得到一株對番茄枯萎病病原菌有較強(qiáng)生防活性的解淀粉芽孢桿菌菌株SDTB009,通過活性鑒定,各項生理生化指標(biāo)鑒定,分子生物學(xué)鑒定,使用透射電子顯微鏡觀察其微觀形態(tài),對其分類地位明確到了種屬。測定得到SDTB009不同濃度的發(fā)酵液的抑菌活性,以及SDTB009發(fā)酵液的溫室、田間生防效果,評價了SDTB009與化學(xué)藥劑聯(lián)合施用的防治效果。同時,還對SDTB009產(chǎn)生的脂肽物質(zhì)進(jìn)行了分離、純化、鑒定,初步明確了其防治番茄枯萎病的生防機(jī)制,為生物防治、降低目標(biāo)化學(xué)藥劑的用量,保障番茄產(chǎn)業(yè)能夠可持續(xù)發(fā)展,提供一定的理論依據(jù)。主要試... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

SDTB009與實驗室前期分離得到的多種病原菌進(jìn)行對峙培養(yǎng)番茄青枯病煙草黑脛病黃瓜灰霉病

解淀粉芽孢桿菌SDTB009的分離鑒定及其對番茄枯萎病的防治研究22圖2生防菌株SDTB009及脂肽粗提物對尖孢鐮刀菌番茄�；偷钠桨逡种谱饔肍igure2PlateinhibitionofbiocontrolstrainSDTB009andcrudelipopeptideonFusariumoxysporumtomatospecialization圖A為使用對峙培養(yǎng)法測定抑制效果，圖B牛津杯中為200uL脂肽物質(zhì)抽提液。圖A、B為尖孢鐮刀菌生長7d后抑制作用。圖C為空白對照。3.2SDTB009菌株的鑒定及其生理生化特性SDTB009菌落最初在LB平板上表現(xiàn)出光滑的表面，但幾天后，菌落的表面變得干燥、起皺。菌落呈乳白色和凸起，具有規(guī)則的邊緣（圖3）。通過JEM1400Plus透射電子顯微鏡觀察菌株SDTB009的形態(tài)（圖4），從圖4中觀察可發(fā)現(xiàn)，菌株SDTB009呈圓柱狀，具有較厚的莢膜，周生鞭毛，菌體較厚，電子束不易打透，無法形成透明清晰的內(nèi)部圖片。生物化學(xué)和生理學(xué)特征示于表中（表2）。解淀粉芽孢桿菌SDTB009為革蘭氏陽性菌株，可以水解淀粉（圖5）且不能單一利用甲醇生長。16SrDNA系統(tǒng)發(fā)育樹顯示菌株SDTB009與解淀粉芽孢桿菌（GenBank登錄號MG264882）聚類到同一分支（圖4）�；趃yrB基因序列分析，菌株解淀粉芽孢桿菌SDTB009顯示出與解淀粉芽孢桿菌（GenBank登錄號JN086142）聚類在同一分支（圖5）�？傊�，基于上述形態(tài)學(xué)，生物化學(xué)和分子表征，菌株SDTB009被鑒定為解淀粉芽孢桿菌。圖3SDTB009平板劃線形態(tài)Figure3SDTB009platescribepatternABC

解淀粉芽孢桿菌SDTB009的分離鑒定及其對番茄枯萎病的防治研究22圖2生防菌株SDTB009及脂肽粗提物對尖孢鐮刀菌番茄專化型的平板抑制作用Figure2PlateinhibitionofbiocontrolstrainSDTB009andcrudelipopeptideonFusariumoxysporumtomatospecialization圖A為使用對峙培養(yǎng)法測定抑制效果，圖B牛津杯中為200uL脂肽物質(zhì)抽提液。圖A、B為尖孢鐮刀菌生長7d后抑制作用。圖C為空白對照。3.2SDTB009菌株的鑒定及其生理生化特性SDTB009菌落最初在LB平板上表現(xiàn)出光滑的表面，但幾天后，菌落的表面變得干燥、起皺。菌落呈乳白色和凸起，具有規(guī)則的邊緣（圖3）。通過JEM1400Plus透射電子顯微鏡觀察菌株SDTB009的形態(tài)（圖4），從圖4中觀察可發(fā)現(xiàn)，菌株SDTB009呈圓柱狀，具有較厚的莢膜，周生鞭毛，菌體較厚，電子束不易打透，無法形成透明清晰的內(nèi)部圖片。生物化學(xué)和生理學(xué)特征示于表中（表2）。解淀粉芽孢桿菌SDTB009為革蘭氏陽性菌株，可以水解淀粉（圖5）且不能單一利用甲醇生長。16SrDNA系統(tǒng)發(fā)育樹顯示菌株SDTB009與解淀粉芽孢桿菌（GenBank登錄號MG264882）聚類到同一分支（圖4）�；趃yrB基因序列分析，菌株解淀粉芽孢桿菌SDTB009顯示出與解淀粉芽孢桿菌（GenBank登錄號JN086142）聚類在同一分支（圖5）�？傊谏鲜鲂螒B(tài)學(xué)，生物化學(xué)和分子表征，菌株SDTB009被鑒定為解淀粉芽孢桿菌。圖3SDTB009平板劃線形態(tài)Figure3SDTB009platescribepatternABC


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