葉片是水稻進(jìn)行光合作用的主要場(chǎng)所,水稻卷葉可以使葉片更直立從而增加群體透光率。卷葉被認(rèn)為是水稻理想株型育種中重要的一環(huán),挖掘卷葉基因并將卷葉性狀引進(jìn)到優(yōu)良的水稻品種中可以進(jìn)一步提高水稻的產(chǎn)量。本研究的主要內(nèi)容是通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將玉米MYB家族基因?qū)胨酒贩N日本晴中,篩選穩(wěn)定遺傳卷葉性狀的轉(zhuǎn)基因水稻。通過細(xì)胞學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行鑒定并對(duì)T₁代水稻的農(nóng)藝性狀進(jìn)行調(diào)查,最后利用定量PCR技術(shù)對(duì)卷葉相關(guān)基因進(jìn)行表達(dá)量分析。具體研究結(jié)果如下:1.利用GATEWAY克隆技術(shù)構(gòu)建了41個(gè)玉米MYB家族轉(zhuǎn)錄因子基因的過表達(dá)載體,經(jīng)PCR檢測(cè)和測(cè)序驗(yàn)證表明載體構(gòu)建成功。2.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將41個(gè)MYB家族基因轉(zhuǎn)入水稻愈傷組織,通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)共獲得水稻652株,平均每個(gè)基因16株。3.將轉(zhuǎn)基因水稻移栽至大田,經(jīng)過兩代篩選我們發(fā)現(xiàn)編號(hào)為AC270的轉(zhuǎn)基因植株表現(xiàn)為穩(wěn)定且顯性遺傳卷葉性狀,經(jīng)過序列鑒定確定其為基因MYBR96的過表達(dá)植株。4.通過石蠟切片細(xì)胞學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)AC270卷葉植株泡狀細(xì)胞數(shù)量較野生型植株有所減少。5.對(duì)AC270卷葉植株農(nóng)藝性狀進(jìn)行調(diào)查,結(jié)果顯示:卷葉植... 

【文章來源】：河北科技大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MYB家族的結(jié)構(gòu)與分類[59]

7第2章載體構(gòu)建2.1實(shí)驗(yàn)材料與儀器2.1.1實(shí)驗(yàn)材料（1）GATEWAY目標(biāo)載體見圖2-1，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所作物高光效功能基因組提供。（2）目的基因入門載體，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物高光效功能基因組提供。所有目的基因均為玉米MYB轉(zhuǎn)錄因子家族成員，共41個(gè)，基因詳情見表2-1。（3）大腸桿菌DH5α，由北京全式金生物技術(shù)有限公司購(gòu)買。圖2-1GATEWAY目標(biāo)載體示意圖表2-1本實(shí)驗(yàn)?zāi)康幕蚣易迕騃D大田編號(hào)MYB52LOC103625936AC20MYB59LOC103629226AC21MYBR21LOC100191782AC25MYB44LOC100193529AC28

132.3結(jié)果與分析2.3.1家族進(jìn)化分析為了解本實(shí)驗(yàn)中41個(gè)MYB家族成員之間的親緣關(guān)系，對(duì)它們的核酸序列進(jìn)行比對(duì)見圖2-2，并構(gòu)建了系統(tǒng)進(jìn)化樹見圖2-3。由圖可以看出，進(jìn)化樹主要將1R-MYB基因聚于一個(gè)亞類，其它MYB基因聚于另一亞類。但偶爾也有1R-MYB基因聚到其它MYB基因亞類當(dāng)中，如：MYBR41和MYBR57。圖2-2MYB家族成員序列比對(duì)部分結(jié)果注：標(biāo)紅基因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)最終篩選得到的卷葉基因MYBR96圖2-3MYB家族基因進(jìn)化樹

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號(hào)：3260176